骨髓基质细胞载体支架的细胞相容性特点

目的:近年来,尽管骨组织工程发展迅速,但目前缺乏理想的支架材料,体外构建的组织工程化活性骨在体内的成骨能力各家报道不一,探讨骨髓基质细胞与L-聚乳酸/聚磷酸钙纤维复合支架的细胞相容性,为骨组织工程选择可降解支架材料提供依据.方法:实验于2002-03/06在第三军医大学中心实验室完成.将兔骨髓基质细胞与L-聚乳酸/聚磷酸钙纤维复合后在体外进行培养,观察细胞形态学变化,并对细胞黏附、细胞活度及接种细胞上架率进行测定.结果:扫描电镜下见支架上黏附细胞较多,接种前与接种支架后消化洗脱细胞的苏木精-伊红(HE)染色可见细胞形态无明显变化,接种支架前的细胞活度为97.08&;#177;1.06,接种后的细胞活度为96.87&;#177;0.96,接种支架的细胞上架率为(61.5&;#177;0.41)%.表明兔骨髓基质细胞能在L-聚乳酸/聚磷酸钙纤维复合支架上贴附、细胞活度不受影响及较高的细胞上架率.结论:L-聚乳酸/聚磷酸钙纤维复合支架具有良好的细胞相容性,可作为骨髓基质细胞的载体应用于骨组织工程.     

诱导转化人关节软骨细胞Ⅱ型胶原表型的有效方式

背量：诱导去分化软骨细胞重新表达Ⅱ型胶原主要基于软琼脂悬浮培养法。目的：用离心管聚集体培养(aggregate culture)诱导去分化转化人关节细胞的Ⅱ型胶原。设计：非随机非对照实验研究。地点和对象：实验在第三军医大学西南医院骨科完成，对象为转化人关节软骨细胞，美国Hyclone公司产品。干预：将体外长期培养韵第30，40，50代去分化转化软骨细胞消化后进行离心管培养，比较细胞在单层培养、离心管聚集体培养，以及在普通培养基，BAI诱导培养基下[2型骨形态发生蛋白(BMP-2) 抗坏血酸盐 胰岛素]，Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ型胶原的表达和胞外基质产生情况。主要观察指标：Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ型胶原的免疫组化染色，Ⅱ型胶原的mRNA表达。结果：在单层培养条件下，去分化转化软骨细胞只表达Ⅰ型胶原，而在BAI诱导培养基及离心管聚集体培养下该转化软骨细胞表达丰富的Ⅱ型胶原和大量胞外基质。结论：离心管聚集体培养和BAI诱导培养基是诱导去分化转化软骨细胞Ⅱ型胶原的有效方式。     

仿生脉冲电磁场对去卵巢骨质疏松大鼠骨生物力学性能的影响

目的观察仿生脉冲电磁场 (BEMF)对去卵巢大鼠腰椎和股骨生物力学性能的影响。方法 6月龄雌性未孕Wistar大鼠 40只随机分为模型组 (A组 ) ,假手术组 (B组 ) ,BEMF治疗组 (C组 ) ,雌激素治疗组 (D组 )。A组、C组、D组行双侧卵巢切除术 ,B组行假手术。术后 8w ,D组肌肉注射苯甲酸雌二醇 ,0 .5mg/kg ,1次 /2w ;C组暴露于BEMF治疗 ,1h/d ,1次 /d。A组、B组作为对照组。治疗 10w后 ,用CHALLENGER双能X线骨密度测定仪活体测定大鼠腰椎、股骨骨密度后处死各组实验动物 ,取出第 3腰椎、右侧股骨用INSTRON 10 11生物力学测试机测定生物力学指标。结果BEMF治疗后 ,大鼠腰椎、股骨的结构力学 (最大位移、最大载荷、最大能量吸收 )和材料力学 (最大应力、最大应变、弹性系数 )均有改善 (P <0 .0 5 )。结论BEMF可改善去卵巢大鼠腰椎和股骨的生物力学性能 ,增强抗骨折能力。     

膝十字韧带移植重建术中韧带末端缝合固定强度的生物力学测试

目的 测试Krackow双锁边缝合法缝合固定韧带末端的强度，探讨膝十字韧带移植重建术中韧带末端缝合固定方法及固定强度。方法 将24条髌韧带分为3组，对其末端分别采用Krackow双锁边缝合法缝合2针、3针以及Ethilon缝线、0．4mm直径钢丝两种缝合材料，分别进行拉伸力学检测以比较强度，探讨最佳的缝合针数和方法。结果 Krackow双锁边缝合法缝合2针，固定强度超过钢丝材料强度，l号Ethilon缝线缝合两针，其强度达到80N以上，超过缝线材料强度，将第一针贯穿韧带缝合，不降低固定强度。Krackow双锁边缝合法缝合2针或3针的固定强度差异无显性意义，第一针贯穿韧带，可减少缝线裸露但不降低固定强度，均超过缝合材料强度。结论 若想增加固定强度应从改进缝合材料强度和增加缝线数目着手。     

转化软骨细胞与正常软骨细胞的生物特性比较

目的比较转化人关节软骨细胞与正常软骨细胞之间的生物特性。方法观察两者的细胞形态、细胞的生长曲线、血清依赖性、染色体检查、软琼脂克隆形成试验、裸鼠致瘤性。结果转化软骨细胞更趋向于长梭形。两者的生长曲线比较相似,但转化软骨细胞的饱和密度要明显高于正常软骨细胞。两者都对血清有依赖性,都为二倍体核型,均不能在软琼脂上形成克隆。经6个月观察两者都不能使裸鼠致瘤。结论转化软骨细胞的生长速度要高于正常软骨细胞。转化软骨细胞为良性转化。     

碱性成纤维细胞生长因子对牵张性脊髓损伤后神经元凋亡的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对牵张性脊髓损伤后神经元凋亡的影响。方法:大鼠脊髓T13-L2经牵张损伤,皮层体感诱发电位(CSEP)监测P1-N1波幅下降至术前波幅的70%后,于损伤平面以下经蛛网膜下隙置细导管,治疗组分别于术后即刻、0.5、1、2、3、4、8、12及24h经细导管注入bFGF溶液20滋l(含bFGF20滋g),对照组在相同时间注入等量生理盐水,然后于术后1d、4d、7d、14d及21d处死取材(n=4)。采用流式细胞仪及TUNEL法观察脊髓细胞凋亡情况,采用行为学评分及CSEP检查大鼠功能恢复情况。结果:术后4、7、14、21d,bFGF治疗组用流式细胞仪检测的凋亡率及TUNEL法染色示细胞凋亡均明显低于对照组(P<0.05、0.01)。神经行为学评分及皮层体感诱发电位也显示出大致相同的趋势。结论:碱性成纤维细胞生长因子能抑制牵张性脊髓损伤后神经元凋亡,并能促进脊髓功能恢复。     

去卵巢大鼠骨质疏松模型的特点

目的:观察去卵巢致Wistar大鼠骨质疏松模型骨密度、结构、最大载荷等变化特点,探讨骨量与骨结构的可能关系。方法:实验于2002-09/2004-01在解放军第三军医大学动物研究所及中心实验室完成。选择雌性未孕Wistar大鼠20只,随机数字表法分为去势组、假手术组,各10只。去势组行双侧卵巢切除,假手术组不切除卵巢。术后8周测定以下指标:①骨密度:在双能X射线骨密度仪的探头下,应用小动物软件进行腰椎和股骨的扫描,测定骨密度值。②椎体压缩测试:将磨制好的椎体置于实验机上,取加载速度1mm/min进行测试,其结构力学参数由载荷-变形曲线获得,材料力学参数由应力-应变曲线获得。③骨形态计量学检查指标:骨小梁面积百分数(%Tb.Ar),代表骨量;骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N),骨小梁分离度(Tb.Sp)。④血、尿生化指标的测定:血清钙、磷,尿钙、磷,尿肌酐,均采用BECKMAN自动生化分析仪。血清骨钙素、血清碱性磷酸酶、血清抗酒石酸酸性磷酸酶、尿羟脯氨酸具体参照试剂盒说明。结果:纳入动物20只,均进入结果分析。①去势组大鼠股骨骨密度明显低于假手术组[分别为(0.166±0.026),(0.195±0.027)g/cm2,P<0.05],腰椎骨密度尤其显著[分别为(0.190±0.011),(0.251±0.029)g/cm2,P<0.01]。②去势组大鼠股骨最大载荷与假手术组相比显著降低[分别为(94.43±8.96),(109.49±12.41)N,P<0.05],腰椎最大载荷降低尤其显著[分别为(98.75±8.19),(118.82±15.74)N,P<0.01]。③去势组大鼠骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)与假手术组相比显著降低(去势组分别为4.78±0.76,46.29±9.96,0.64±0.08,假手术组分别为7.74±1.76,60.91±3.80,1.26±0.26,P<0.01);骨小梁分离度(Tb.Sp)显著增高(分别为2300.85±480.10,1112.27±65.81,P<0.01)。④血、尿生化指标显示:骨吸收大于骨形成。结论:Wistar大鼠去卵巢8周成功建立了绝经后骨质疏松模型,骨量与骨结构的一些参数可能存在某种关系。     

不稳定性脊柱骨折合并脊髓损伤内固定方法的探讨

严重脊柱骨折是致残率较高的损伤之一.我院1976～1986年共收治脊柱损伤180例,其中113例合并脊髓损伤.近年来对脊柱生物力学的深入研究,加深了对不稳定骨折的理解,从而能正确的选择手术适应证.为此,本文试图对我们应用的几种内固定器材进行比较,并作出评价.     

加压外固定结合肢体延长治疗下肢短缩的骨不连与骨缺损(摘要)

伴有下肢短缩的骨不连与骨缺损主要是骨折后感染所致。由于存在大片软组织瘢痕和潜在感染,常规的植骨内固定治疗非常困难。近年来采用分期的治疗方法、带血管蒂或吻合血管骨移植,疗效大有提高。但这些治疗是以达到骨愈合为目的,仍常后遗下肢短缩畸形,对同时恢复伤肢长度迄今尚未重视。我们在加压外固定治疗骨不连的基础上,根据这类创伤病理特点,从1982年10月至1988年12月,应用加压外固定结合下肢延长,治疗12例,获得满意结果。 本组男性8例,女性4例。年龄8～25岁。8例伴有下肢短缩3～17cm,平均8cm;4例为骨干4～10cm缺损性骨不连接,平均缺损7cm。本组采用多平面固定的半环槽式     

加强四肢复杂骨折治疗的研究

由于致伤力的能量大 ,因而四肢复杂骨折损伤的程度严重 ,骨折块多且形态较复杂 ,并发症发生率亦高。如何改进这类骨折的治疗方法和提高治疗效果 ,仍是当前备受关注的重要研究课题之一。本期刊登相关的 6篇论文 ,内容比较丰富 ,部分反映了我国这方面研究的进展。开放性骨折既比较常见 ,又在如何合理选择固定骨折的方法上存在有待研究的问题。关于开放性粉碎性胫腓骨骨折髓内钉内固定是否需扩大骨髓腔 ,目前虽仍有争议 ,但日渐趋向不扩髓。范卫民等通过动物实验 ,经血流量测定、Ｘ线摄片观察及生物力学测试证明 ,扩髓组骨折端血流量显著低于非…