5-氮胞苷对大鼠脂肪间充质干细胞的诱导分化作用及相关蛋白的表达

目的 探讨5-氮胞苷(5-Aza)对大鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)的诱导分化作用及相关蛋白的表达。 方法 采取酶消化法和贴壁法分离培养Sprague-Dawley(SD)大鼠腹部皮下脂肪组织，采用抗单核细胞人类白细胞抗原DR(HLA-DR)、兔抗CD13、CD44、CD105、血管性血友病因子(vWF)多克隆抗体对培养细胞进行鉴定，排除造血干细胞及成纤维细胞，取第3代ADMSCs细胞，以每孔1×104个细胞接种于24孔培养板中，并将其随机分为正常组和诱导组，正常组细胞于常规培养基中加入无菌生理盐水培养，诱导组细胞于常规培养基中加入浓度为10 μmol/L的5-Aza进行诱导培养。比较2组细胞的形态结构、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)及缝隙连接蛋白43(Connexin43)基因表达量及cTnT、cTnI、Connexin43蛋白的表达情况。 结果 诱导组ADMSCs细胞增殖缓慢，体积增大并逐渐变为棒状或宽梭形，形态呈心肌细胞特征；RT-qPCR结果显示，诱导组细胞cTnT、cTnI及Connexin43基因表达量增强；免疫组化结果显示，诱导组细胞细胞质明显可见棕黄色或棕褐色颗粒物质，而正常组细胞细胞质中棕黄色或棕褐色颗粒物质较少，且诱导组细胞cTnT、cTnI及Connexin43蛋白阳性表达评分明显高于正常组(P<0.05)。 结论 大鼠脂肪组织中含有多向分化潜能的间充质干细胞(MSCs)，5-Aza可以诱导大鼠ADMSCs向心肌细胞分化，ADMSCs有望成为治疗心肌梗死的种子细胞。      

黄连不同方法提取物治疗2型糖尿病大鼠的比较研究

目的比较黄连不同方法提取物中有效成分的含量及其对2型糖尿病大鼠的治疗效果,探讨其主要成分含量与其疗效的相关性。方法①高效液相色谱法(HPLC)测定黄连超临界萃取物及黄连模拟胃液提取物中代表性有效成分的含量;②90只成年雄性Wistar大鼠作为研究对象,随机抽取15只作为正常对照组(N组),予以标准鼠饲料喂养,其余大鼠予以高脂饲料喂养联合尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组(M组)、阳性对照组(D组)、黄连超临界萃取物治疗组(A组)和黄连模拟胃液提取物治疗组(B组);连续治疗9周后,比较各组大鼠的体重、OGTT血糖水平、血清三酰甘油(TG)及白介素-6(IL-6)水平以及肠道组织病理状态。结果①2种提取物在相同剂量时,黄连超临界萃取物中各代表性有效成分的含量均高于黄连模拟胃液提取物;2种提取物在有效剂量时,黄连超临界萃取物中仅小檗碱与巴马丁的含量高于黄连模拟胃液提取物;②以有效剂量治疗9周后,D组、A组、B组大鼠OGTT血糖水平、体重、血清TG及IL-6水平均明显低于M组大鼠(P0.05);A组与B组比较,差异无统计学意义(P0.05);光镜下,D组、A组、B组大鼠肠道组织石蜡切片HE染色显示炎性改善均显著优于M组。结论黄连超临界萃取物及黄连模拟胃液提取物对2型糖尿病大鼠均有一定的治疗作用,可显著降低血糖、血脂、体重及血清IL-6水平,改善肠道慢性炎症,其主要成分含量与其疗效无相关性。     

脑脊液 α-突触核蛋白和SWI在早期帕金森病诊断中的价值

目的探讨脑脊液α-突触核蛋白测定和SWI在早期帕金森病(Parkinson’s disease,PD)诊断中的价值。方法收集郑州大学第一附属医院2015-08—2017-12确诊的PD患者,根据H-Y分级分为早期PD组和中晚期PD组,招募同一时期内年龄及性别与PD组相匹配的健康志愿者,采用酶联免疫吸附测定试剂盒检测脑脊液α-突触核蛋白,所有患者及对照组同时行头颅横断位T_1WI、T_2WI和SWI成像检查。结果 PD组脑脊液中α-突触核蛋白水平低于对照组;不同分期PD比较,中晚期PD组脑脊液中α-突触核蛋白水平低于早期PD组,差异有统计学意义(P0.01)。头颅SWI分析显示,PD组与对照组的脑铁沉积比较,在苍白球、尾状核头和黑质区差异有统计学意义(P0.05),早期PD组与中晚期PD组在相同部位铁沉积比较,差异无统计学意义(P0.05);在红核和壳核区域,PD组与对照组铁沉积比较,差异无统计学意义(P0.05),早期PD组与中晚期PD组铁沉积比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论脑脊液α-突触核蛋白是PD早期病理改变的重要生物学指标。SWI通过检测脑内异常铁沉积,可用于协同诊断PD。     

肺炎患儿血清s TREM-1、s CD163、SP-A、LP(a)的变化及其意义

目的 探讨肺炎患儿血清可溶性髓系细胞触发受体-1(s TREM-1)、可溶性CD163(sCD163)、肺表面活性蛋白A(SP-A)、脂蛋白a(LP(a))的变化及其意义。方法 选取我院2016年1月至2017年12月收治的肺炎患儿120例(病例组)、选取同期健康小儿60例作为对照组,检测并比较两组的血清s TREM-1、sCD163、SP-A、LP(a)水平,并根据患儿病情、感染病原体情况进行分层分析。结果 病例组患儿的血清s TREM-1、sCD163、SP-A、LP(a)水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0. 05);重症组肺炎患儿的血清s TREM-1、sCD163、SP-A、LP(a)水平均显著普通组肺炎患儿,差异有统计学意义(P<0. 05);细菌感染组肺炎患儿的血清s TREM-1、sCD163、LP(a)水平均显著非细菌感染组肺炎患儿,差异有统计学意义(P<0. 05),细菌感染组肺炎患儿血清SP-A水平与非细菌感染组患儿差异无统计学意义(P>0. 05);肺炎患儿的血清s TREM-1、sCD163、SP-A、LP(a)水平与CPIS评分呈显著的正相关关系(P<0. 05)。结论 在不同病情的肺炎患儿中血清s TREM-1、sCD163、SP-A、LP(a)水平具有差异性,血清s TREM-1、sCD163、LP(a)在不同病原体感染的患儿中水平具有差异,联合检测上述指标对于临床诊断及指导治疗具有一定的价值。     

依维莫司联合内分泌治疗晚期激素受体阳性HER-2阴性乳腺癌患者的生存分析

目的探究依维莫司联合内分泌治疗晚期激素受体(HR)阳性人表皮生长因子受体(HER)-2阴性乳腺癌患者的生存情况。方法选取HR阳性HER-2阴性晚期乳腺癌患者40例,所有患者为多线解救治疗失败而选择依维莫司联合内分泌治疗。观察临床治疗总有效率,并对患者不良反应发生情况进行统计,采用Kaplan-Meier生存曲线分析患者生存周期情况,并对患者无进展生存期(PFS)的影响因素进行探究。结果 40例患者中4例未持续治疗,36例具有评估价值,其中完全缓解(CR)0例(0.00%),6例部分缓解(PR,16.67%),23例疾病稳定(SD,63.89%),7例疾病进展(PD,19.44%);总体客观有效率(ORR)为16.67%,临床获益率(CBR)为80.56%。40例患者中2例因费用等其他原因中断治疗的患者剔除后,共38例患者可参与药物不良反应发生情况的评价。2例(5.26%,2/38)因无法耐受急性肾功能损害等药物毒副作用停药,且1例急性肾功能损害患者因治疗无效死亡,2例经救治后存活但未继续依维莫司服药。38例患者虽发生不同程度不良反应,37例经对症支持治疗及药物减量后均好转,36例继续依维莫司治疗。2年随访期间,36例持续治疗的患者疾病进展最早为接受治疗后36 d,最迟为接受治疗后22.5个月,PFS范围为(1.2～22.5)个月,中位PFS(mPFS)为6.8个月,末次随访19例生存,生存率为52.78%。雌激素受体(ER)极高表达(+++)、有远处转移的患者PFS更短,孕激素受体(PR)极高表达(+++)的患者PFS更长,比较差异均有统计学意义(P0.05);患者接受治疗前转移部位数及既往化疗方式对患者PFS的影响差异无统计学意义(P0.05)。结论依维莫司联合内分泌治疗晚期HR阳性HER-2阴性乳腺癌患者的临床疗效显著,能有效延长患者的生存周期,ER极高表达及有远处转移是患者预后的危险因素。     

miR-335-5p对人关节软骨细胞的影响

目的探究miR-335-5p对人关节软骨细胞蛋白多糖(ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)、Ⅹ型胶原蛋白(CollagenⅩ)、基质金属蛋白酶(MMP)13的调节作用。方法通过取人创伤后截肢的膝关节软骨,分离并提取软骨细胞。miR-335-5p模拟物(mimics)、抑制剂(inhibitor)、mimicsNC、inhibitorNC分别转染至软骨细胞,利用qRT-PCR和Western印迹分别检测各组ACAN、CollagenⅡ、CollagenⅩ、MMP13的表达情况。结果与mimicsNC组相比,mimics组显著下调ACAN、CollagenⅡmRNA和蛋白表达水平,显著上调MMP13、Collagen X mRNA和蛋白表达水平(P0.05);与inhibitorNC组比较,inhibitor组显著上调ACAN、CollagenⅡmRNA和蛋白表达水平,显著下调MMP13、Collagen X mRNA和蛋白表达水平(P0.05)。结论 miR-335-5p能够抑制ACAN、CollagenⅡ并促进MMP13、Collagen X mRNA转录及蛋白合成,对OA的发病起到潜在的推进作用。     

β样淀粉蛋白和早老素增强子-2与环磷酸腺苷应答原件结合蛋白的关系

<正>β淀粉样蛋白(Aβ)沉积是阿尔茨海默病(AD)公认的一个病理学改变也是诊断依据之一。γ分泌酶是产生Aβ的最后剪切蛋白复合体,它剪切生成的Aβ主要为Aβ40和Aβ42。而比较认可的形成Aβ沉积的原因就是Aβ40和Aβ42比例的失调。γ分泌酶中起主要催化作用的部分是早老素(PS)-1,而早老素增强子(Pen)-2主要作用就是使PS-1内分解,对底物的催化作用产生影响。环磷酸腺苷应答原件结合蛋白(CREB)是与长期记忆和基因转录密切相关的一种