洋参御糖丸对糖尿病大鼠心肌微血管病变的干预作用

目的观察洋参御糖丸对糖尿病大鼠心肌微血管病变的干预作用。方法高糖高脂联合腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠心肌微血管损伤模型,筛选成模大鼠并将其随机分为模型组、二甲双胍组以及洋参御糖丸高、低剂量组,各组大鼠相应给予4周蒸馏水、二甲双胍70 mg/(kg·d)、洋参御糖丸2.7 g/(kg·d)、洋参御糖丸1.35 g/(kg·d)干预后,检测血糖、糖化血红蛋白,观察大鼠心肌超微结构以及对大鼠心肌AGEs、VEGF、VCAM-1的影响。结果洋参御糖丸高剂量组、二甲双胍组与模型组相比血糖、HbA1c均显著下降;心肌AGEs、VEGF、VCAM-1表达明显降低;电镜下心肌纤维排列整齐,肌丝结构正常,细胞核线粒体结构清晰,心肌微血管数目正常。结论洋参御糖丸在降糖同时能够修复心肌超微结构的损伤;并且具有降低AGEs、抑制病理性微血管促新生效应、抑制促内皮细胞黏附积聚作用,进而可能延缓糖尿病微血管病变进程。     

二仙汤对去卵巢大鼠心肌微血管及血液流变学的影响

目的:观察去卵巢大鼠心肌微血管密度、微血管内皮细胞形态及血液流变学的变化并探讨二仙汤的干预作用。方法:选用健康10周龄雌性SPF级SD大鼠32只,随机分为假手术组、模型组、雌激素组(戊酸雌二醇,0.18 mg·kg~(-1)),二仙汤组(9 g·kg~(-1))。去卵巢后2周开始灌胃给药,1次/d,连续16周。二仙汤组及雌激素组分别给予二仙汤或戊酸雌二醇灌胃,假手术组和模型组灌胃等体积纯净水。给药16周末,无创超声心动图(UCG)检测心功能;CD34免疫荧光染色法检测心肌微血管密度;透射电镜观测心肌微血管超微结构;放射免疫分析法检测血浆雌二醇(E_2)含量;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆内皮素-1(ET-1),前列环素I_2(PGI_2),血栓素A_2(TXA_2),血管内皮生长因子(VEGF)和血管性血友病因子(vWF)水平;凝固法检测凝血四项;血液流变学检测全血黏度和血浆黏度。结果:与假手术组比较,模型组左室射血分数(EF)显著降低(P0.01),左室短轴缩短率(FS)显著降低(P0.01),左室收缩末期容积(LVVols)显著升高(P0.01);心肌微血管密度显著减少(P0.01);心肌微血管内皮细胞肿胀明显,胞浆空化;血浆E_2含量显著降低(P0.01);ET-1,VEGF,vWF含量显著升高(P0.01),前列环素I_2/血栓素A_2(PGI_2/TXA_2)显著降低(P0.01);血浆活化部分凝血酶原时间(APTT)显著降低(P0.01),纤维蛋白原(FIB)含量显著升高(P0.01);全血黏度、血浆黏度、卡松黏度显著升高(P0.01),全血高、低切指数和红细胞聚集指数明显升高(P0.05)。与模型组比较,二仙汤组大鼠EF,FS明显升高(P0.05),LVVols明显降低(P0.05);微血管密度显著增多(P0.01);心肌微血管内皮细胞水肿改善,运输小泡清晰可见;血浆E_2显著升高(P0.01);ET-1,VEGF显著降低(P0.01),PGI_2/TXA_2显著升高(P0.01);APTT显著升高(P0.01);全血黏度、全血高切相对指数、红细胞聚集指数明显降低(P0.05),卡松黏度、血浆黏度显著降低(P0.01)。结论:二仙汤增加去卵巢大鼠心肌微血管密度、保护微血管内皮细胞结构的完整性,改善其内皮分泌功能和血液流变学,保护心功能。     

补肾疏肝汤对慢性疲劳综合征大鼠模型抗疲劳作用机制的实验研究

目的研究补肾疏肝汤对慢性疲劳综合征大鼠模型抗疲劳的作用机制。方法将50只SD大鼠按照随机数字表法分为5组,即空白组、模型组及补肾疏肝汤低、中、高剂量组,各组均10只。除空白组外,其余4组大鼠均制备慢性疲劳综合征模型。在造模同时,空白组、模型组均予0.9%氯化钠注射液40 m L/(kg·d)灌胃;补肾疏肝汤低、中、高剂量组分别予补肾疏肝汤40 m L/(kg·d)灌胃,生药含量分别为17.28、34.56、69.12 g/(kg·d),分别相当于人体用量1、2、4倍,均14 d。比较各组大鼠第1 d首次、第14 d末次力竭游泳时间。比较各组大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,下丘脑5-羟色胺(5-HT)含量,大鼠骨骼肌过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)、细胞色素氧化酶(COX)含量。结果补肾疏肝汤低、中、高剂量组大鼠第14 d末次力竭游泳时间均较模型组延长(P<0.05),且补肾疏肝汤中剂量组大鼠第14 d末次力竭游泳时间最长(P<0.05)。补肾疏肝汤低剂量组第14 d末次力竭游泳时间较第1 d首次力竭游泳时间缩短(P<0.05);补肾疏肝汤中剂量组第14 d末次力竭游泳时间较第1 d首次力竭游泳时间延长(P<0.05)。模型组大鼠血清SOD水平低于空白组(P<0.05),MDA水平高于空白组(P<0.05)。补肾疏肝汤低、中、高剂量组大鼠血清SOD水平均高于模型组(P<0.05),补肾疏肝汤低、中剂量组血清MDA水平低于模型组(P<0.05)。补肾疏肝汤中剂量组大鼠血清SOD水平高于补肾疏肝汤低、高剂量组(P<0.05),MDA水平低于补肾疏肝汤低、高剂量组(P<0.05)。模型组大鼠下丘脑5-HT含量低于空白组(P<0.05)。补肾疏肝汤中、高剂量组大鼠下丘脑5-HT含量均高于模型组(P<0.05),且补肾疏肝汤中剂量组高于补肾疏肝汤高剂量组(P<0.05)。模型组大鼠骨骼肌PGC-1α、COX含量均低于空白组(P<0.05)。补肾疏肝汤低、中、高剂量组大鼠骨骼肌PGC-1α、COX含量均高于模型组(P<0.05),且补肾疏肝汤中剂量组大鼠骨骼肌PGC-1α、COX水平最高(P<0.05)。结论补肾疏肝汤能增强慢性疲劳综合征大鼠模型抗疲劳作用,补肾疏肝汤中剂量组更明显。     

针刺结合顽痰汤治疗卒中相关性肺炎大鼠实验研究

目的观察针刺结合顽痰汤对卒中相关性肺炎模型大鼠的治疗效果。方法动物分组:选取成年雄性大鼠120只,体质量230～280 g,鼠龄12周,从中随机抽取30只分为空白对照组、假手术组,每组15只,剩余大鼠造模完成后,用抽签法随机分为模型组、针刺组、中药低剂量组,中药高剂量组,针刺+中药低剂量组,针刺+中药高剂量组,共8组。空白对照组不做任何处理;假手术组只暴露右侧颈总、颈内和颈外动脉,不造成栓塞;模型组是通过线栓造成脑缺血再灌注而致肺炎模型;在模型建立后,针刺治疗组对模型使用针刺治疗;中药低、高剂量组分别使用低、高剂量中药治疗;针刺+中药低、高剂量治疗组分别使用针刺+低、高剂量中药治疗(其中所有组别中中药为顽痰汤加减)。结果治疗后,与空白对照组比较,模型组肺组织WBC,MPO活性均升高,差异有统计学意义(P 0. 05),假手术组各项指标差异无统计学意义(P 0. 05);与模型组比较,中药低剂量组肺组织WBC,MPO活性降低不明显,差异无统计学意义(P 0. 05),余各治疗组的各项指标均降低,差异有统计学意义(P 0. 05);针刺+中药高剂量组分别与中药高剂量组、针刺组进行组间比较,肺组织WBC,MPO活性差异有统计学意义(P 0. 05)。结论针刺结合顽痰汤治疗大鼠卒中相关性肺炎有一定的疗效,且针刺+中药高剂量组治疗卒中相关性肺炎疗效明显。     

针刺预处理对缺氧缺血性脑病模型乳鼠血脑屏障的保护作用

目的：观察针刺预处理对缺氧缺血性脑病 （HIE） 模型乳鼠血脑屏障 （BBB） 的保护作用，探讨针刺治疗 HIE 的作用机制。方法：将 70 只 SPF 级乳鼠随机分为假手术组、模型组、针刺预处理组。除假手术组外，采用结扎左侧颈总动脉然后进行 3.5 h 缺氧以建立 HIE 模型。采用悬吊实验评估实验动物的运动能力，苏木素-伊红（HE）染色观察神经细胞缺氧缺血后的病理学变化，透射电镜观察 BBB 亚显微结构，脑干湿重法测量含水量，蛋白免疫印迹法检测脑缺氧缺血后闭锁蛋白 （Occludin）、紧密连接蛋白-1 （ZO-1） 表达水平。结果：与假手术组比较，模型组乳鼠悬吊实验维持时间减少 （P＜0.05），缺氧缺血侧脑组织含水量增加 （P＜0.05），皮层组织 Occludin、ZO-1 蛋白表达下降 （P＜0.05）。与模型组比较，针刺预处理组乳鼠悬吊实验维持时间增加 （P＜0.05），缺氧缺血侧脑组织含水量减少 （P＜0.05），皮层组织 Occludin、ZO-1 蛋白表达升高 （P＜0.05）。结论：针刺可能通过上调 Occludin、ZO-1 蛋白表达维持 BBB 的完整性，从而改善缺氧缺血性脑损伤。     

PBL与CBL教学法在留学生实验诊断教学的应用探讨

目的探讨PBL与CBL教学法在留学生实验诊断教学的应用效果。方法将PBL联合案例教学法(CBL)应用于临床医学本科留学生实验诊断教学,与大班传统讲授教学方法(对照组)相比较,通过问卷调查和成绩分析学习效果。结果试验组在激发学习兴趣和培养临床思维能力方面均高于对照组,理论知识的成绩和实习的成绩也是试验组优于对照组,P<0.05。结论PBL与CBL教学联合应用于实验诊断教学中能够有效提高教学质量,并受到学生的认可和喜爱。     

金属螺钉与聚氨酯橡胶慢性脊髓损伤大鼠模型的分析比较

目的:比较金属螺钉与聚氨酯橡胶压迫的慢性脊髓损伤（CSCI）大鼠模型的优劣，探索适合CSCI研究的大鼠模型。方法: 108只雄性Sprague-Dawley大鼠完全随机分组为假手术组（n=36）、金 属螺钉组（n=36）和聚氨酯橡胶组（n=36），记录造模术前及术后2.5 h、7 d、14 d、21 d、28 d各组下肢行为学运动功能评分（BBB评分）和体感诱发电位（SEP），取C5段脊髓组织行苏木精-伊红染色 法（HE）和原位末端标记法（TUNEL）染色。结果:BBB评分:金属螺钉组与聚氨酯橡胶组较假手术组均明显降低（金属螺钉组比假手术组，t=9.671，P<0.000 1；聚氨酯橡胶组比假手术组，t=4.997， P=0.002 5），且金属螺钉组评分低于聚氨酯橡胶组（t=2.705，P=0.035 3），金属螺钉组持续下降，聚氨酯橡胶组则于术后21 d降至最低后开始上升。SEP:金属螺钉组与聚氨酯橡胶组较假手术组均出 现潜伏期延长（金属螺钉组比假手术组，t=18.02，P<0.000 1；聚氨酯橡胶组比假手术组，t=10.82，P<0.000 1）和波幅下降（金属螺钉组比假手术组，t=145.5，P<0.0001；聚氨酯橡胶组比假手术组， t=3.97，P= 0.007 4），且金属螺钉组潜伏期延长时间长于聚氨酯橡胶组，金属螺钉组波幅降低幅度先大于聚氨酯橡胶组，后较之略低。HE染色:金属螺钉组与聚氨酯橡胶组均出现脊髓损伤的病理表现 ，且金属螺钉组从腹侧到背侧渐进性加重，聚氨酯橡胶组则表现为一致性。TUNEL染色:金属螺钉组与聚氨酯橡胶组较假手术组TUNEL阳性细胞数明显增多（金属螺钉组比假手术组，t=4.722，P=0.003 2 ；聚氨酯橡胶组比假手术组，t=8.263，P=0.000 2），且主要集中于脊髓灰质前角。金属螺钉组在术后第7天阳性细胞数达到最高，之后明显减少，聚氨酯橡胶组在术后逐渐增加至术后21 d达到最高。结 论:两种模型均有效地模拟了CSCI，金属螺钉CSCI模型适合损伤程度逐渐加重的CSCI研究，聚氨酯橡胶CSCI模型则适合压迫程度稳定的CSCI研究。     

miR-134对蛛网膜下腔出血后软脑膜纤维化的作用

目的探究miR-134对蛛网膜下腔出血（SAH）后软脑膜纤维化的作用及其机制。方法大鼠（40只）按照随机数字表法随机分2组,即假手术组（SHAM组,n=20）和模型组（SAH组,n=20）;2组脑组织采用芯片分析技术筛选差异表达的miRNAs,并采用RT-qPCR对其进行验证;使用miRDB软件预测miR-134的靶蛋白,采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-134对TGF-β1的靶向作用。采用western blot和RT-qPCR检测miR-134过表达和低表达的血管内皮细胞RAOEC中TGF-β1和CollagenⅠ表达。12只SAH大鼠随机分4组,各组颅骨后分别注射空白慢病毒（空白慢病毒组,n=3）、Lv-miR-134（Lv-miR-134组,n=3）、Lv-TGF-β1（Lv-TGF-β1组,n=3）和Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1（Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1组,n=3）,Masson染色观察各组软脑膜组织的纤维化。结果与SHAM组比较,SAH组miR-134表达降低,TGF-β1和CollagenⅠ的蛋白和mRNA表达增高（均P<0.05）。miR-134能够与TGF-β1的3′-UTR区域直接结合,并抑制其活性。血管内皮细胞中miR-134抑制TGF-β1和CollagenⅠ的蛋白和mRNA表达（P<0.05）。与空白慢病毒组相比,Lv-miR-134组、Lv-miR-134+siRNA-TGF-β1组的纤维化程度降低（P<0.05）,而Lv-TGF-β1组纤维化程度升高（P<0.05）。结论 miR-134通过调控TGF-β1抑制SAH后软脑膜纤维化。     

主题创意设计理念在实验诊断学慕课设计中的新应用

随着"互联网+高等教育"打破传统教育的时空界限和学校围墙,慕课平台的大力发展,慕课建设成为如今教学模式的新改革,中国医科大学附属第一医院实验诊断学教研室承担《实验诊断学》的慕课课程建设工作,并首次将主题创意设计的理念应用于医学教育的慕课建设中。课程内容涵盖目前5大专业,9章,19节,82个热门检测项目。本文从主题创意设计的课程设计理念、构建课程框架、组建主题创意团队等多方面探讨实验诊断学慕课课程建设的过程,并通过微信公众号分别对在校学生和社会人士进行关于主题创意设计理念的慕课设计的教学效果评价及满意度调查。调查结果显示在校学生及在职人员实验组的随堂小考成绩、满意度调查得分均高于对照组,差异具有统计学意义(t=4.266、4.689、4.198、3.869,P <0.001)。主题创意设计理念的慕课设计,有助提高学生对实验诊断课程的兴趣,提高慕课教学的教学质量,且在医学继续教育的领域,也可对相关专业的在职人员起到继续教育的作用。