醛固酮合成酶基因及环境因素对高血压交互作用

目的 探讨汉族人群醛固酮合成酶基因(CYP11B2)启动子区-344C/T和第三外显因子K173R多态性位点与原发性高血压(EHT)关系.方法 按病例对照研究方法选择来自黑龙江省哈尔滨市的2组人群(210例EHT患者和391名对照及补充的182例EHT患者和189名对照),利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性及直接测序技术分别对其进行-344C/T与K173R基因型检测,问卷调查和实验室检查获取传统危险因素.结果 总人群和男性中,-344C/T基因型分布在高血压组和对照组间差异均有统计学意义(P＜0.05),而K173R基因型分布仅在女性高血压组和对照组间差异有统计学意义(x2=11.16,P=0.003 8);总人群中,-344C/T CC+ TC、K173R KK分布与体质指数、腰围、血脂异常、高血糖对EHT均存在正交互作用,饮酒、吸烟与-344C/T CC+ TC分布同时出现对EHT发生有促进作用;按性别分组的亚群中,除男、女血脂异常、女性血糖升高与-344C/T CC+ TC分布同时存在对EHT存在负交互作用外,其余均为正交互作用.结论 -344C/T、K173R基因多态性分布在汉族EHT与正常人群中存在差异;-344 C/T CC +TC、K173R KK与传统危险因素联合作用可促进EHT发生.     

雌激素与内皮祖细胞的关系

近年来,对雌激素的研究趋于全面,雌激素与内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)关系的研究也日渐增多.目前,对雌激素与EPC的综述,主要论述雌激素对EPC的增殖、分化等作用,并未讨论雌激素其他方面的效应.本文从多个方面讨论雌激素与EPC之间的关系,除了增加EPC动员、增殖、分化等作用之外,也着力讨论了雌激素的其他作用.因此本文主要总结雌激素在不同情况下表现出的不同作用及推测其作用机制.     

利钠肽系统的调节及其在心力衰竭时的变化

利钠肽是心血管系统分泌的肽类,这一系统通过利尿利钠调节体液平衡,舒张血管,降低心脏后负荷;同时通过旁分泌/自分泌方式抑制心肌细胞肥大,减缓心室重构.利钠肽系统的激活是心力衰竭时心血管系统重要的代偿机制之一.重组人B型利钠肽(rhBNP)已用于治疗急性失代偿性心力衰竭,并能够迅速改善心力衰竭患者的临床症状.但是,rhBNP在临床使用过程中,除了药物的安全性曾引起较大的疑虑外,肾脏、血管等器官对利钠肽存在低反应性;而且在大规模的临床试验中,rhBNP也未能增加心力衰竭患者的生存率.因此,对利钠肽系统在心力衰竭时的调节研究,有助于对疾病的认识.     

利钠肽系统的调节及其在心力衰竭时的变化

利钠肽是心血管系统分泌的肽类,这一系统通过利尿利钠调节体液平衡,舒张血管,降低心脏后负荷;同时通过旁分泌／自分泌方式抑制心肌细胞肥大,减缓心室重构。利钠肽系统的激活是心力衰竭时心血管系统重要的代偿机制之一。重组人B型利钠肽（rhBNP）已用于治疗急性失代偿性心力衰竭,并能够迅速改善心力衰竭患者的临床症状。但是,rhBNP在临床使用过程中,除了药物的安全性曾引起较大的疑虑外,肾脏、血管等器官对利钠肽存在低反应性;而且在大规模的临床试验中,rhBNP也未能增加心力衰竭患者的生存率。因此,对利钠肽系统在心力衰竭时的调节研究,有助于对疾病的认识。     

氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞内源性大麻素系统激活

目的 探讨氧化型低密度脂蛋白刺激能否诱导巨噬细胞内源性大麻素系统激活.方法 体外常规培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,加入氧化型低密度脂蛋白或溶媒孵育24 h,用高效液相色谱分析技术检测巨噬细胞内源性大麻素Anandamide和2-arachidonoylglycerol水平,以实时定量PCR技术和免疫印迹法对大麻素CB1、CB2受体和血小板活化因子受体mRNA和蛋白的表达进行分析.结果 内源性大麻素2-arachidonoylglycerol水平在6mg/L和12 mg/L氧化型低密度脂蛋白刺激时分别升高了2.4倍和4.8倍,而Anandamide水平无明显变化.3～12mg/L氧化型低密度脂蛋白刺激时,RAW264.7巨噬细胞大麻素CB1和CB2受体及血小板活化因子受体mRNA和蛋白的表达均明显上调(P＜0.01).结论 首次证实氧化型低密度脂蛋白通过激活血小板活化因子受体诱导巨噬细胞内源性大麻素系统激活,提示氧化型低密度脂蛋白致动脉粥样硬化过程中可能涉及该系统的激活.     

铁离子螯合剂去铁胺对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达的影响

目的:观察铁负荷过低对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)表达的影响。方法: 体外诱导THP-1单核细胞转化为巨噬细胞、泡沫细胞。实验细胞分为3组:对照组（正常巨噬细胞、泡沫细胞）、铁离子螯合剂去铁胺(DFO)刺激组、柠檬酸铁和DFO共刺激组。应用RT-PCR和Western blot测定巨噬细胞、泡沫细胞中EMMPRIN基因和蛋白的表达。用Western blot测定MMP-9蛋白的表达。用明胶酶谱法测定MMP-9的活性。结果: DFO刺激组中EMMPRIN基因及蛋白的水平、MMP-9蛋白表达的水平及活性均明显高于对照组（P<0.05,P<0.01）。柠檬酸铁逆转了DFO对EMMPRIN表达的上调作用。结论: 铁负荷过低可增加巨噬细胞及泡沫细胞中炎症因子的表达及活性,可能会促进心血管事件的发生。     

冠状动脉内应用维拉帕米对急性心肌梗死急诊介入治疗后冠状动脉灌注、心肌灌注和临床预后的影响

目的探讨急性ST段抬高性心肌梗死（STEMI）急诊经皮冠状动脉介入治疗（PCI）时冠状动脉内应用维拉帕米对冠状动脉灌注、心肌灌注及临床预后的影响。方法本研究为前瞻性、随机、双盲、对照性临床研究。连续性入选99例STEMI拟行急诊PCI的患者,随机分为维拉帕米组与对照组。在支架释放后即刻,维拉帕米组在靶血管内注入维拉帕米200μg,对照组在靶血管内注入肝素生理盐水,比较两组PCI术前、术后和冠状动脉内注药后的冠状动脉灌注和心肌灌注的差别。冠状动脉灌注以心外膜TIMI血流（TFG）和校正的TIMI血流帧数计数（CTFC）来评价。心肌灌注以TIMI心肌灌注分级（TMPG）和心肌灌注显影（MBG）来评价。并比较两组在PCI术后1周心脏彩色超声结果、住院期间以及随访期间主要心脏不良事件（MACE）发生率上的差别。结果最终91例患者有完整资料,其中维拉帕米组47例,对照组44例,两组临床基本特征和造影特征相仿。维拉帕米组和对照组在术前和支架释放后即刻冠状动脉灌注和心肌灌注各指标差异均无统计学意义（P〉0.05）。冠状动脉内注入维拉帕米后,维拉帕米组的CTFC、TFG、MBG、TMPG均较对照组有显著改善,分别为CTFC：27.1±14.2比39.0±23.8,P=0.011;TFG≥2级：100%比90.9%,P=0.035;MBG≥2级：91.5%%比75.5%,P=0.034;TMPG≥2级：89.4%比72.7%,P=0.042。维拉帕米组和对照组PCI术后1周时左室射血分数（63.4%±8.2%比63.5%±10.3%,P=0.578）、院内MACE发生率（4.3%比9.1%,P=0.613）和3个月MACE发生率（23.9%比22.7%,P=0.894）差异均无统计学意义。结论STEMI患者急诊行PCI治疗时,冠状动脉内应用维拉帕米可显著改善冠状动脉灌注和心肌灌注水平,但未观察到其对急诊PCI术后心室重构和短期临床预后的显著影响。     

EMMPRIN基因沉默对巨噬/泡沫细胞中MMP-9表达及单核细胞迁移能力的影响

目的:观察细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)基因沉默对巨噬/泡沫细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达以及单核细胞迁移能力的影响。方法:根据RNA干扰原理,设计合成EMMPRIN-siR-NA。通过荧光定量PCR和Western blotting观察巨噬、泡沫细胞中EMMPRIN基因和蛋白被抑制情况。采用West-ern blotting观察特异性抑制EMMPRIN表达对巨噬、泡沫细胞中MMP-9蛋白表达的影响,通过迁移实验观察特异性抑制EMMPRIN表达对单核细胞迁移能力的影响。结果:采用EMMPRIN-siRNA转染巨噬、泡沫细胞,抑制细胞内EMMPRIN的基因和蛋白表达(P0.01)后使巨噬、泡沫细胞中MMP-9的蛋白表达减少了50%和40%。此外特异性抑制EMMPRIN表达使单核细胞在趋化因子MCP-1、VEGF趋化诱导下迁移能力明显减弱(P0.05)。结论:EMMPRIN基因沉默使巨噬、泡沫细胞中MMP-9的蛋白表达明显减少、活性明显减弱同时使单核细胞的趋化迁移能力降低。由此可见EMMPRIN在MMP的表达、活化及单核细胞迁移中扮演重要角色,可能成为防治动脉粥样硬化新的治疗靶点。     

老年梗阻性肥厚型心肌病患者经皮室间隔化学消融术有效性和安全性分析

目的评估经皮室间隔化学消融术(PTSMA)在老年药物难治性梗阻性肥厚型心肌病患者中的有效性和安全性。方法连续收录上海交通大学附属胸科医院2001年4月至2019年1月行PTSMA治疗的梗阻性肥厚型心肌病患者,按照年龄分成青年组(年龄<55岁)和老年组(年龄≥55岁)。通过查阅病历记录患者的一般资料、临床病史、手术情况及住院期间并发症发生情况,以及通过电话或门诊随访所记录患者的生命状态、临床表现和心功能情况,应用Kaplan-Meier法分析两组生存曲线。结果共111例患者纳入本研究,中位年龄为56.0(15.0,82.0)岁,女性共42例(37.8%),其中青年组中位年龄43.5(15.0,54.0)岁,老年组中位年龄为63.0(55.0,82.0)岁。总体消融成功率为68.5%,青年组、老年组分别为66.7%、70.0%。术中无水酒精中位注射量为2.0(1.0,5.0)ml,青年组和老年组分别为2.1(1.0,5.0)ml和2.0(1.0,5.0)ml,两组比较差异无统计学意义(P=0.728)。房室传导阻滞、室性心律失常、低血压为手术常见并发症,2例患者(均≥55岁)因持续高度房室传导阻滞需植入永久起搏器,1例患者(66岁)因术后心室颤动、心原性休克经抢救无效死亡。老年组患者围术期主要不良心血管事件(包括心原性死亡,高度房室传导阻滞需植入永久起搏器,由于心室颤动或室性心动过速引起的心搏骤停复苏等)发生率较青年组高(P=0.060)。111例患者除外1例围术期死亡,对其余110例患者进行了长期随访,随访时间为3~212(35.5±48.5)个月,随访率为86.4%(95/110),全因死亡11例,总死亡率为10.0%(11/110),除外1例因肺部感染死亡,其余10例为肥厚型心肌病相关死亡,包括6例心原性猝死,3例因心房颤动、急性脑梗死致死,1例心力衰竭致死。梗阻性肥厚型心肌病患者PTSMA后1年、5年和10年的总生存率分别为96.9%、93.4%和81.1%。青年组和老年组1年、5年、10年总生存率分别97.7%、97.7%、91.6%和96.2%、89.7%、66.4%(P=0.068)。结论老年梗阻性肥厚型心肌病患者PTSMA的效果与青年患者相当,但手术相关的主要不良心血管事件风险可能增加,术后长期总生存率略低于青年组患者。     

脂多糖诱导激活人脐静脉内皮细胞Notch信号通路

目的：探讨脂多糖刺激能否诱导原代人脐静脉内皮细胞Notch信号通路的激活。方法：体外培养原代人脐静脉内皮细胞,加入脂多糖或溶媒孵育诱导炎性反应,以实时荧光定量PCR方法检测Notch信号通路靶基因HES1 mRNA的表达。予Notch信号通路阻断剂DAPT孵育16h,再予脂多糖或溶媒刺激观察HES1 mRNA的表达。结果：脂多糖刺激诱导了Notch信号通路靶基因HES1的表达。HES1 mRNA的表达在LPS刺激后0.5h达高峰,是对照组的11倍（P〈0.01）。随着LPS浓度的增加,HES1 mRNA的表达峰值增加（P〈0.01）。给予DAPT后,LPS刺激下HES1 mRNA的表达受抑制（P〈0.01）。结论：首次在内皮细胞上证实LPS激活Notch信号通路靶基因HES1的表达,HES1的诱导表达依赖于经典的Notch信号通路,提示LPS的诱导在内皮细胞炎症中可能涉及Notch信号系统的激活。