Sociality and the telencephalic distribution of corticotrophin‐releasing factor,urocortin 3, and binding sites for CRF type 1 and type 2 receptors: A comparative study of eusocial naked mole‐rats and solitary Cape mole‐rats

Various aspects of social behavior are influenced by the highly conserved corticotrophin‐releasing factor (CRF) family of peptides and receptors in the mammalian telencephalon. This study has mapped and compared the telencephalic distribution of the CRF receptors, CRF₁ and CRF₂, and two of their ligands, CRF and urocortin 3, respectively, in African mole‐rat species with diametrically opposed social behavior. Naked mole‐rats live in large eusocial colonies that are characterized by exceptional levels of social cohesion, tolerance, and cooperation in burrowing, foraging, defense, and alloparental care for the offspring of the single reproductive female. Cape mole‐rats are solitary; they tolerate conspecifics only fleetingly during the breeding season. The telencephalic sites at which the level of CRF₁ binding in naked mole‐rats exceeds that in Cape mole‐rats include the basolateral amygdaloid nucleus, hippocampal CA3 subfield, and dentate gyrus; in contrast, the level is greater in Cape mole‐rats in the shell of the nucleus accumbens and medial habenular nucleus. For CRF₂ binding, the sites with a greater level in naked mole‐rats include the basolateral amygdaloid nucleus and dentate gyrus, but the septohippocampal nucleus, lateral septal nuclei, amygdalostriatal transition area, bed nucleus of the stria terminalis, and medial habenular nucleus display a greater level in Cape mole‐rats. The results are discussed with reference to neuroanatomical and behavioral studies of various species, including monogamous and promiscuous voles. By analogy with findings in those species, we speculate that the abundance of CRF₁ binding in the nucleus accumbens of Cape mole‐rats reflects their lack of affiliative behavior. J. Comp. Neurol. 523:2344–2371, 2015. © 2015 Wiley Periodicals, Inc.     

大黄对雌性幼年大鼠血清GnRH、LH、FSH、P、E2水平的影响

目的：：观察大黄水提物对雌性幼年大鼠血清促性腺激素释放激素(GnRH)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、孕酮(P)、雌二醇(E2)水平的影响。方法：4周龄雌性SD大鼠20只,随机分为正常对照组和大黄水提物2.0g/kg组,每组10只,连续灌胃给药30天。采用ELISA法检测各组大鼠血清GnRH、LH、FSH、P、E2的水平。结果：与正常对照组大鼠比较,大黄水提物2.0g/kg组大鼠GnRH、P、E2激素水平明显降低(P＜0.05),LH、FSH激素水平明显升高(P＜0.05)。结论：大黄水提物可明显影响雌性幼年大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的激素水平。     

补阳还五汤对急性脊髓损伤模型大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察补阳还五汤对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)的治疗作用及其机制。方法 SD大鼠随机分为空白组、损伤对照组、补阳还五汤组,各10只。采用Allen’s打击法建立急性脊髓损伤模型,空白组和损伤对照组造模后予蒸馏水1m L灌胃,补阳还五汤组造模后予补阳还五汤1m L灌胃,均1天1次,连续3天。各组分别于术后1、7、14天观察其行为学BBB评分,14天通过免疫组化的方法观察脊髓损伤部位神经细胞凋亡(caspase-3p20、Bcl-2与Bax)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平。结果 1行为学观察评分:术后7、14天补阳还五汤组与损伤对照组下肢功能均有恢复(P0.05),且补阳还五汤组较损伤对照组恢复更明显[(9.05±0.95)分比(5.75±1.97)分,(12.6±1.55)分比(8.80±3.34)分,P0.05]。2免疫组化检测:补阳还五汤组caspsase-3p20阳性细胞数表达较损伤对照组少[(16.70±2.21)个比(20.30±4.13)个,P0.05];补阳还五汤组Bcl-2阳性细胞的表达较损伤对照组增加[(10.57±0.97)个比(6.42±3.20)个,P0.05];补阳还五汤组Bax阳性细胞的表达较损伤对照组少[(18.29±2.21)个比(21.14±2.41)个,P0.05];补阳还五汤组VEGF阳性细胞的表达较损伤对照组多[(11.75±1.03)个比(9.50±1.30)个,P0.05]。结论补阳还五汤可提高脊髓损伤部位VEGF的表达,使细胞凋亡明显减少,促进骨髓功能的恢复。     

超声复合微泡促进骨髓间充质干细胞归巢对大鼠前列腺炎的治疗作用

目的 研究静脉注射骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对大鼠前列腺炎的治疗作用.方法 贴壁法分离、培养、扩增BMSCs.将50只SD大鼠按随机数字表法分为慢性细菌性前列腺炎(chronic bacterial prostatitis,CBP)组、CBP+BMSCs组、CBP+超声复合微泡(microbubble-enhanced therapeutic ultrasound,MEUS)组、CBP+ MEUS+ BMSCs组和正常对照组,每组10只.在小动物超声引导下向大鼠前列腺两侧叶内注射大肠埃希菌建立前列腺炎症模型,注入细菌1～14 d为急性炎症期,4～ 12周为慢性炎症期,对照组注入等量PBS.建模28 d后经静脉单纯注入BMSCs、单纯行MEUS及行MEUS+注入BMSCs,活体成像观察BMSCs向前列腺归巢情况.观察移植BMSCs 2周后大鼠前列腺组织病理学变化并作炎症评分,RT-PCR检测炎症因子IL-1β、TNF-α mRNA,ELISA检测IL-1β、TNF-α蛋白含量,统计分析各组表达差异.结果 前列腺组织病理学提示CBP组、CBP+ BMSCs组、CBP+ MEUS组前列腺呈典型炎症病理变化,腺管上皮增生,层次增加,炎细胞浸润,纤维组织增生,而CBP+ MEUS+ BMSCs组大鼠前列腺炎症明显减轻.RT-PCR检测结果提示CBP组炎症因子IL-1β(0.282±0.067)、TNF-α(0.631 ±0.116),CBP+BMSCs组IL-1[β(0.893 ±0.117)、TNF-α(0.876 ±0.137),CBP+ MEUS组IL-1β(0.683 ±0.097)、TNF-α(0.814±0.127)高于正常对照组IL-1β(0.282±0.067)、TNF-α(0.256±0.059)和CBP+MEUS+BMSCs组IL-1β(0.322±0.086)、TNF-α(0.313 ±0.079) (P ＜0.05);ELISA检测结果显示CBP组炎症因子IL-1β[(315.14±86.08) pg/mL]、TNF-α[(86.41 ±24.32) pg/mL],CBP+BMSCs组IL-1 β[(278.87±72.04) pg/mL]、TNF-α[(67.77±16.98) pg/mL],CBP+ MEUS组IL-1 β[(321.24 ±93.12) pg/mL]、TNF-α[(79.14±19.17) pg/mL]含量均显著高于正常对照组[IL-1β(43.36±11.35) pg/mL、TNF-α(13.26±3.97) pg/mL]和CBP+MEUS+BMSCs组[IL-1 β (65.34±17.23) pg/mL、TNF-α(19.94±5.37) pg/mL],差异有统计学意义(P＜0.01),而CBP+ MEUS+ BMSCs组与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 超声复合微泡促进BMSCs向前列腺归巢,能够减轻前列腺炎症反应,可能为前列腺炎的治疗带来新策略.     

脊伤颗粒对大鼠急性脊髓损伤后运动功能及Caspase-3表达的影响

目的 研究脊伤颗粒对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后运动功能及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响.方法 随机抽取大鼠32只作为假手术组,其余118只大鼠采用改良Allen'S打击器制作大鼠SCI模型,将造模成功的96只大鼠随机分为模型组、甲基强的松龙组(下称甲强龙组)、脊伤颗粒组.分别给予假手术组、模型组生理盐水灌胃,甲强龙组尾静脉注射药物,脊伤颗粒组予以相应药物灌胃.在给药后1、3、7、14 d的4个不同时间点采用BBB行为学功能评分;再分批处死大鼠,取出SCI组织用HE染色观察其病理变化,用免疫组化染色检测Caspase-3表达阳性细胞,原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞.结果 (1)BBB运动功能评分方面,与假手术组比较,模型组评分低(P＜0.01);与模型组比较,脊伤颗粒组、甲强龙组评分高(P＜0.05);与甲强龙组比较,SCI后1、3d,脊伤颗粒组评分偏低,(P＜0.05),SCI后7、14 d脊伤颗粒组评分偏高(P＜0.05).(2)在平均积分光密度值和细胞凋亡率方面,与假手术组比较,模型组数值偏高(P＜0.01);与模型组比较,甲强龙组、脊伤颗粒组平均数值低(P＜0.05);与甲强龙组比较,SCI后1、3d,脊伤颗粒组平均数值偏高(P＜0.05),SCI后7、14 d,脊伤颗粒组平均数值偏低(P＜0.05).结论 脊伤颗粒能部分恢复SCI后模型大鼠的运动功能并可明显抑制细胞Caspase-3表达和细胞凋亡.     

建瓴汤联合卡托普利对大鼠高血压及肾脏的影响

目的研究建瓴汤联合卡托普利对高血压大鼠的降压效应及肾脏保护作用。方法将60只SPF级雄性SD大鼠随机分出10只作为正常组予常规饮食;余50只大鼠予高盐饮食10周,建立高血压模型,造模成功后,将大鼠分为中药组(建瓴汤)、西药组(卡托普利)、西联组(卡托普利和氢氯噻嗪)、中西组(卡托普利和建瓴汤)、模型组(生理盐水),用药3月。分别在用药前、用药1月及3月时测量大鼠尾动脉血压,用药3月后检测各组大鼠尿微量白蛋白(m ALB)及尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG酶)浓度,光镜下观察肾脏病理形态学变化。结果 (1)血压:用药1月后,除中药组外各用药组血压与正常组比较无差异,与模型组比较均下降(P<0.01);用药3月后,与正常组比较,各用药组均无差异。(2)尿m ALB和尿NAG酶:与正常组比较,各组大鼠两指标均升高(P<0.01);与模型组比较,西药组两指标升高(P<0.01);与西药组比较,中药组、中西组均降低(P<0.01)。(3)肾病理形态学变化:中药组、中西组较西药组、西联组肾脏病变程度轻。结论建瓴汤单用有显著降压效应,与卡托普利联用时无协同降压作用,但能拮抗后者对高血压大鼠的肾脏损害作用。     

长期压力超负荷大鼠心脏交感神经NET、NGF及其受体表达变化

目的 检测长期心脏压力超负荷(pressure overload,POL)大鼠心脏交感神经去甲肾上腺素转运蛋白(norepinephrine transporter NET)、心肌神经生长因子(nerve growth factor NGF)及受体TrkA表达变化,探讨心脏压力超负荷导致交感神经重塑的机制.方法 40只雄性Wistar大鼠分为假手术对照组(n=10)和POL组(n=30).建立腹主动脉缩窄大鼠心脏POL模型,术后8周,用超声心动图评价大鼠心脏功能,用免疫组化荧光方法检测左心室心肌NGF蛋白表达,实时荧光定量PCR检测心脏交感神经节NET及左室心肌GAP43(growth associated factor,GAP43)、TrkA mRNA表达变化.结果 与假手术组比较,POL大鼠心室间隔舒张期厚度(interventricularseptal thickness during diastole,IVSd)、收缩期心室间隔厚度(interventricularseptal thickness during systole,LVSs)、舒张期左室后壁厚度(diastolic LV posterior wall thickness,LVPWd)显著增厚,左室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)升高33.23％(P＜0.05);心功能(EF、FS％)增强(P＜0.05),表明大鼠心功能代偿.POL组心肌NGF蛋白表达增加(P＜0.05),但心肌GAP43、心脏NET mRNA水平未见变化(P＞0.05),TrkA mRNA表达下降(P＜0.05).结论 POL后心肌TrkA mRNA低表达可能是限制心肌NGF蛋白促交感神经生长的原因,心脏NET mRNA转录后异常或内化可能是POL后NET功能异常原因.     

MG53在下肢远程缺血预适应保护肺缺血再灌注损伤中的作用

目的 研究MG53在下肢远程缺血预适应保护肺组织缺血再灌注损伤中的作用.方法 肺缺血再灌注损伤模型通过开胸阻断左侧肺门进行缺血1h后再灌注1h建立.下肢远程缺血预适应模型是在进行肺缺血再灌注损伤前0.5h阻断左侧股动脉血流5 min,然后再灌注5 min,重复3个循环来实现的.将60只10 ～ 12周龄SD大鼠[雌雄各半,体质量(235±15)g]采用完全随机分组方法分为3组(n=20):假手术组(sham组)、肺缺血再灌注损伤组(IR组)、下肢远程缺血预适应+肺缺血再灌注损伤组(RIP组).将24只8～12周龄MG53敲除小鼠[雌雄各半,体质量(27.5±2.5)g]采用完全随机分组方法分为2组(n=12),即肺缺血再灌注损伤组(IR组)、下肢远程缺血预适应+肺缺血再灌注损伤组(RIP组).在缺血及再灌注时间结束后,观察动脉氧分压、计算肺组织湿干比(W/D),通过Western blot检测3组之间肺组织上MG53蛋白表达量的改变,并记录其生存情况.结果 对SD大鼠,在进行肺缺血再灌注损伤后其血氧分压降低到(46.60±5.94) mmHg,而下肢远程缺血预适应能显著改善肺组织的缺血再灌注损伤,使其血氧分压恢复至(73.40 ±5.94)mmHg(P ＜0.05),同时对反映肺组织水肿程度的W/D值、生存情况都有显著的改善,通过Western blot方法检测到RIP组肺组织上MG53蛋白的表达量(2.03 50.53)较IR组(0.79±0.17)显著增加(P＜0.05).在MG53敲除小鼠上,下肢远程缺血预适应组的血氧分压(48.20±12.15) mmHg较肺缺血再灌注损伤组(45.60±10.53) mmHg并未得到改善,同时也不能改善肺组织的水肿情况.结论 MG53参与了下肢远程缺血预适应对肺组织缺血再灌注损伤的保护作用.     

垂体中叶素对脓毒症大鼠心脏功能的影响

目的 探讨垂体中叶素(intermedin,IMD)对脓毒症大鼠心脏功能的影响.方法 采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)复制大鼠脓毒症模型,分为5组,分别为假手术组、CLP组、CLP+常规治疗组(CLP+ CT)、CLP+ CT+ E-IMD早期治疗组、CLP+ CT+ L-IMD晚期治疗组,观察早期(CLP结束时)或晚期(CLP 12 h)给予IMD后大鼠心脏功能、心输出量、心脏指数、每搏指数、氧供、氧耗、血气及动物存活时间、存活率的变化.结果 与假手术组比较,脓毒症后大鼠的心脏功能明显降低;采用常规治疗(包括输液、抗感染以及使用血管活性药物),尽管可以提高动脉血压和中心静脉压,但大鼠的心脏功能无明显改善;早期和晚期给予IMD可明显改善心脏功能;氧供和氧耗明显升高,其中早期给予IMD效果更好,与脓毒症大鼠相比,早期给予IMD后,氧供和氧耗分别升高了148.9％和172.2％;72 h内死亡大鼠的平均存活时间达到23.15 h,72 h存活率为31.2％ (5/16).结论 IMD对脓毒症大鼠的心脏功能有较好的治疗作用.     

心理应激致孕鼠乳腺发育不良及雌/孕激素和受体水平异常

目的 研究心理应激对孕鼠乳腺发育的影响,评价相关激素及其受体的表达水平。方法 妊娠期Wistar大鼠随机分为对照组和试验组,试验组大鼠15d内随机施加噪音、束缚、昼夜颠倒、冰水游泳和夹尾致痛5种不可预见性应激刺激。观察大鼠乳房外观变化,测量乳头直径和高度并计算乳房系数,光密度法测定乳腺组织DNA和RNA水平,放射免疫法测定血浆和乳腺组织雌激素（E2）、孕酮（P）、生长激素（GH）及催乳素（PRL）水平,放射配基结合分析法测定雌二醇、孕酮受体的最大结合容量（Bmax）和解离常数(Kd),乳房组织H-E染色,光镜下观察组织形态变化。结果 与对照组比较,试验组大鼠乳头直径和高度减小、乳房重量减轻、乳房系数减小（P<0.05,P<0.01）,乳房组织DNA、RNA及RNA/DNA均明显减小（P<0.05,P<0.01）,血浆E2、P和GH水平明显下降（P<0.05,P<0.01）,组织匀浆E2和GH水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,E2受体和P受体Bmax明显降低、Kd均明显升高（P<0.05,P<0.01）;乳腺小叶、小叶腺泡数目减少、腺泡直径明显降低（P<0.05）。结论 心理应激能导致孕鼠乳腺发育不良,引起雌、孕激素水平及其受体表达异常。