骨髓间充质干细胞在IgA肾病大鼠肾脏中的定位与分布

背景：由于骨髓间充质干细胞缺乏特异性表面抗原,常根据其贴壁生长、成骨成脂分化等生物学特点来鉴定。 目的：观察骨髓间充质干细胞在IgA肾病大鼠肾脏中的定位与分布情况。 方法：以牛血清白蛋白+葡萄球菌肠毒素B+皮下注射四氯化碳的改良法建立SD大鼠IgA肾病模型。造模成功分别经尾静脉移植大鼠骨髓间充质干细胞或生理盐水,并设立不造模的正常对照组。移植后1,4周观察各组大鼠的尿蛋白、肾功能、肾脏病理变化、IgA荧光沉积变化,并通过免疫组织化学观察BrdU标记的骨髓间充质干细胞在肾组织中的分布情况。 结果与结论：移植后1周,骨髓间充质干细胞组尿蛋白、血肌酐明显低于生理盐水组;移植后4周,骨髓间充质干细胞组肾脏病理变化、IgA荧光沉积与生理盐水组比较差异有显著性意义。提示骨髓间充质干细胞输注可促进大鼠IgA肾病的修复,并可定位于肾小球系膜区及少数肾小管间质区,但随时间延长,BrdU标记的髓间充质干细胞在肾组织中分布却逐渐减少。     

热消融联合消融灶周边注射CpG ODN抑制小鼠肝癌生长的研究

目的 探讨热消融联合消融灶周边注射CpG ODN治疗对小鼠肝癌的影响及继发免疫效应的抗肿瘤效果.方法 建立Hepa1-6小鼠皮下肝癌动物模型32只,随机分为热消融治疗组、热消融联合CpG ODN治疗组、CpG ODN治疗组和对照组,每组8只.每组各6只接种肿瘤细胞后第7天、第14天给予治疗,测量小鼠肿瘤体积,观察荷瘤小鼠存活率及消融灶内淋巴细胞和HSP70变化,另8只第7天给予治疗,30 d后对侧接种等量肿瘤细胞,1个月后处死,观察小鼠生存状况及对侧肿瘤生长情况.结果 （1）各实验组小鼠观察期内死亡率均低于对照组（P＜0.05）,各实验组对侧均无肿瘤生长,对照组再接种肿瘤生长率为100%（3/3）,两者相比差异有统计学意义（P＜0.05）;（2）各实验组小鼠与对照组相比,肿瘤体积显著缩小（P＜0.05）,联合治疗组肿瘤缩小更显著;（3）各实验组较对照组有较多淋巴细胞浸润（P＜0.05）,联合治疗组数量最多;（4）各实验组与对照组相比有更多HSP70表达（P＜0.05）,联合治疗组HSP70表达最多,与其余实验组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 CpG ODN对荷瘤小鼠具有明显的免疫增强作用,CpG ODN联合热消融治疗小鼠肝癌有效,且能减少复发.     

非小细胞肺癌组织中表皮生长因子受体基因突变与ERCC1和RRM1mRNA表达的关系

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中人表皮生长因子受体（EGFR）基因突变与切除修复交叉互补蛋白1（ERCC1）和核苷酸还原酶亚单位M1（RRM1）mRNA表达的关系。方法应用实时荧光定量PCR方法检测257例NSCLC组织中EGFR基因突变、ERCC1和RRM1mRNA的表达。结果NSCLC组织中EGFR基因突变率占49．03％（126／257）,在女性和不吸烟患者中较高（P〈0．05）;ERCC1mRNA高表达占47．47％（122／257）,RRM1mRNA高表达占61．87％（159／257）。与未检测到EGFR基因突变的NSCLC患者比较,EGFR基因突变中ERCC1mRNA低表达者多见（P〈0．05）;NSCLC组织中,EGFR基因突变与RRM1mRNA表达水平无关（P〉0．05）;ERCC1mRNA表达水平与RRM1mRNA表达水平无关（P〈0．05）。结论NSCLC组织中EGFR基因突变患者ERCC1倾向低表达,可能受益于以铂类药物为基础的化疗。     

NOX4是肺纤维化的潜在治疗靶点

肺纤维是一种高致死率的难治性疾病,TGF-β1可激活并上调NOX4 mRNA的表达,继而诱导机体产生大量ROS,而ROS可进一步激活Smad,参与介导TGF-β1/Smad信号通路,最终促使肺纤维化的发生。而通过各种技术手段阻断NOX4基因表达可干扰TGF-β1/Smad信号通路从而阻断肺纤维化,所以NOX4可能是肺纤维化进程中最具有前景的治疗靶点。     

胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸-脱氧寡核苷酸抑制疟原虫红前期发育

目的 观察胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸-脱氧寡核苷酸（cytidine-phosphate-guanosine oligodeoxynucleotide,CpG ODN）对疟原虫红前期发育的影响。 方法 通过构建约氏疟原虫BY265株18S rRNA外标准品质粒,与小鼠三磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）内标准品共同组成TaqMan RT-PCR分析模型。用不同剂量（0.05×10⁵ 、0.1×10⁵、0.5×10⁵、1×10⁵和2×10⁵个）约氏疟原虫唾液腺子孢子感染BALB/c小鼠,42 h后处死小鼠取其肝脏,制备约氏疟原虫cDNA进行TaqMan RT-PCR反应,以小鼠肝脏虫荷指标检验模型的有效性。将12只BALB/c小鼠随机均分为CpG组、CpG对照组和PBS对照组,CpG组和CpG对照组小鼠分别尾静脉注射脱氧寡核苷酸1826（ODN1826）及其对照（ODN1826 control）各30 μg,PBS对照组注射0.01 mol/L PBS溶液 200 μl。24 h后各组每鼠感染100个子孢子,于感染后42 h处死小鼠取肝脏,制备约氏疟原虫cDNA进行TaqMan RT-PCR,定量分析感染疟原虫24 h前CpG ODN预处理小鼠肝脏虫荷的变化。 结果 构建的约氏疟原虫外标准品质粒所插入的BY265株18S rRNA基因与17XNL株18S rRNA基因相似性为98%,它与小鼠GAPDH内标准品共同组成的TaqMan RT-PCR分析模型能够正确反映小鼠肝脏虫荷与唾液腺子孢子感染量的正比关系。感染疟原虫24 h前给予CpG ODN处理,CpG组小鼠肝脏虫荷为CPG对照组的1/5（0.28/1.33）,两者差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 本实验建立的TaqMan RT-PCR分析模型适用于红前期疟原虫（肝脏）虫荷指标的研究。CpG ODN能显著抑制红前期疟原虫的发育。     

白细胞介素-18反义寡脱氧核苷酸对同种异体部分移植肝再生的促进作用

目的 探讨白细胞介素(IL)-18硫代修饰反义寡脱氧核苷酸(ASPODN)对同种异体部分移植肝再生的促进作用。 方法 将供体SD大鼠与受体LEW大鼠随机分为50％部分肝移植组(PLT组)、部分肝移植IL-18 ASPODN治疗组(IL-18 ASPODN组)及部分肝移植IL-18硫代修饰正义寡脱氧核苷酸治疗组(IL-18 SPODN组),每组供、受体大鼠各30只。检测移植肝肝细胞BrdU标记变化;检测移植肝IL-18蛋白和γ干扰素(INF-γ)mRNA表达以及受体血清IFN-γ水平。 结果 移植术后72 h,3组移植肝肝细胞再生均达到高峰。IL-18 ASPODN组移植肝肝细胞BrdU高峰标记指数(58.3％±7.5％)明显高于PLT组(31.6％±6.7％)及IL-18 SPODN组[(33.4±5.5％),t=6.503、6.558,P<0.001];移植术后48、72和96 hIL-18 ASPODN组移植肝内IL-18蛋白和IFN-γ mRNA表达量以及受体血清IFN-γ水平均明显低于PLT组(IL-18蛋白比较:t=2.950,P<0.05;t=5.916、7.947,P<0.001;INF—γ mRNA比较:t=2.558,P<0.05;t=6.292、8.925,P<0.001;IEN-γ水平比较:t=16.998、15.483、54.723,P<0.001)和IL-18SPODN组(IL-18蛋白比较:t=2.845,P<0.05;t=6.062、6.973,P<0.001;INF-γ mRNA比较:t=3.117,P<0.05;t=6.154、8.738,P<0.001;IFN-γ水平比较:t=14.531、18.139、46.924,P<0.001)。结论 IL-18 AS     

Racl在小鼠中性粒细胞抗白假丝酵母菌感染中的作用

目的 评价Racl基因在小鼠抗白假丝酵母菌感染中的作用.方法 (1)β-actin作为内参,Western blot半定量法检测两种小鼠中性粒细胞Rael蛋白表达量;(2)趋化实验用Zigmond法经甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(fMLP)诱导中性粒细胞移动,延时显微镜观察中性粒细胞移动并拍照,细胞追踪软件分析小鼠中性粒细胞趋化功能;(3)fMLP诱导小鼠中性粒细胞过氧化物的产生应用异氨基苯二酰肼化学发光分析法通过微孔板发光检测仪检测过氧化物酶含量,采用细胞色素c还原法分析豆蔻酸-佛波醇-乙酸酯(PMA)引发中性粒细胞产生的过氧化物.结果 假丝酵母菌耐受BALB/c小鼠中性粒细胞Racl蛋白表达量高于假丝酵母菌易感CBA/CaH小鼠:BALB/c小鼠中性粒细胞趋化运动功能较CBA/CaH小鼠强(P<0.05):经fMLP和PMA诱导后,BALB/c小鼠中性粒细胞过氧化物的产生量高于CBA/CaH小鼠(P<0.05).结论 在小鼠中性粒细胞抗白假丝酵母菌感染过程中,Racl能增强小鼠中性粒细胞的杀伤能力.     

索拉菲尼对骨肉瘤细胞的抑制作用及分子机制研究北大核心CSCD

目的研究索拉菲尼对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的作用及其分子机制。方法将人骨肉瘤细胞(HOS细胞)分为对照组及索拉菲尼组,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法观察索拉菲尼对HOS细胞活力的影响,用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白变化,用Real-time PCR检测let-7d变化情况。结果索拉菲尼可抑制HOS细胞活力,并呈剂量和浓度依赖性;同时,索拉菲尼可以抑制Lin28表达,同时促进let-7d表达;过表达Lin28可以逆转索拉菲尼的促凋亡作用。结论索拉菲尼通过调控Lin28/le-7d环路来促进骨肉瘤细胞凋亡。     

ERCC1、TS在胃癌组织中的表达与术后辅助化疗预后的关系

目的：探讨胃癌术后患者核苷酸切除修复交叉互补基因1（ERCC1）、胸苷酸合成酶（ TS）表达与术后辅助化疗预后的关系。方法选取86例初次诊断为胃癌行胃癌根治术、术后病理诊断为Ⅱ～Ⅲ期的患者,术后均采用XELOX辅助化疗方案化疗,并进行4年以上随访。运用免疫组化方法检测患者癌组织中ERCC1、 TS蛋白表达情况,分析ERCC1、TS表达与术后辅助化疗预后的关系。结果86例胃癌患者癌组织中ERCC1和TS的阳性表达率分别为40％和36％。 ERCC1和TS阳性表达率与肿瘤的分化程度相关。 ERCC1阴性表达者和TS阴性表达者平均生存期均明显长于阳性表达者（ P均＜0．05）。多因素COX回归分析表明,ERCC1、TS阳性表达者术后辅助化疗预后差[HR＝0．29,95％CI（0．12,0．69）,P ＝0．006;HR＝0．49,95％CI（0．20,0．87）,P＝0．010]。结论 ERCC1与TS表达情况可以作为预测胃癌术后辅助化疗预后的分子标志物。     

Rac1在小鼠中性粒细胞抗白假丝酵母菌感染中的作用

目的评价Rac1基因在小鼠抗白假丝酵母菌感染中的作用。方法 (1)β-actin作为内参,Western blot半定量法检测两种小鼠中性粒细胞Rac1蛋白表达量;(2)趋化实验用Zigmond法经甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(fMLP)诱导中性粒细胞移动,延时显微镜观察中性粒细胞移动并拍照,细胞追踪软件分析小鼠中性粒细胞趋化功能;(3)fMLP诱导小鼠中性粒细胞过氧化物的产生应用异氨基苯二酰肼化学发光分析法通过微孔板发光检测仪检测过氧化物酶含量,采用细胞色素c还原法分析豆蔻酸-佛波醇-乙酸酯(PMA)引发中性粒细胞产生的过氧化物。结果假丝酵母菌耐受BALB/c小鼠中性粒细胞Rac1蛋白表达量高于假丝酵母菌易感CBA/CaH小鼠;BALB/c小鼠中性粒细胞趋化运动功能较CBA/CaH小鼠强(P<0.05);经fMLP和PMA诱导后,BALB/c小鼠中性粒细胞过氧化物的产生量高于CBA/CaH小鼠(P<0.05)。结论在小鼠中性粒细胞抗白假丝酵母菌感染过程中,Rac1能增强小鼠中性粒细胞的杀伤能力。