非小细胞肺癌组织中EMIA—ALK融合基因与TYMSmRNA表达的关系

目的探讨非小细胞肺癌（nonsmall-celllungcancer,NSCLC）组织中棘皮动物微管样蛋白4-间变淋巴瘤激酶（echinodcriBmicrotubuleassociatedproteinlike4-anaplasticLymphomakinase．EMIA．ALK）融合基因与胸苷酸合成酶（Thymidylatesynthase,TYMS）mRNA表达的关系。方法应用实时荧光定量PCR方法检测257例NSCLC组织中EML4-ALK融合基因、TYMSmRNA的表达。结果非小细胞肺癌组织中EMIA-ALK融合基因阳性率占4．28％（11／257）,在不吸烟患者中较高（P〈0．05）;TYMSmRNA高表达占63．42％（163／257）。与未检测到EMIA-ALK融合基因阳性的非小细胞肺癌患者比较,EMIA-ALK融合基因阳性与TYMSmRNA表达水平相关（P〈0．05）。结论非小细胞肺癌组织中EMIA-ALK融合基因阳性患者TYMS倾向低表达,可能从-线化疗药的培美曲塞中受益。     

ERCC1在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的研究剪切修复偶联因子1（ERCC1）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的临床意义。方法运用免疫组化（IHC）方法检测51例NSCLC组织、21例癌旁组织中ERCC1的表达,并分析其与肿瘤分期和患者生存期之间的关系。结果ERCC1在肿瘤组织阳性率明显高于癌旁组织（P〈0．05）,临床Ⅲ＋Ⅳ期及N1-2期患者ERCC1表达率分别高于Ⅰ＋Ⅱ期和N0期患者（P均〈0．05）。生存曲线提示ERCC1阴性者5a生存率显著高于阳性者（P〈0．05）,但复发转移曲线未见统计学差异。结论ERCC1可能在判断NSCLC进展和预后方面起重要作用。     

老年非小细胞肺癌组织中表皮生长因子受体基因突变情况及其与切割修复交叉互补基因1表达的相关性

目的探讨老年非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变情况及其与切割修复交叉互补基因(ERCC)1表达的关系。方法选择老年NSCLC患者150例作为研究对象,采用PCR技术检测老年NSCLC组织中EGFR基因突变和ERCC1基因表达水平。结果 150例老年NSCLC组织中EGFR基因突变62例,突变率为41.3%,外显子21和外显子19突变率分别为18.7%和18.0%。老年NSCLC组织中,男性EGFR基因突变率低于女性(P0.05),吸烟患者EGFR基因突变率低于非吸烟患者(P0.05),腺癌患者EGFR基因突变率高于非腺癌患者(P0.05),有肿瘤家族史患者EGFR基因突变率高于无肿瘤家族史患者(P0.05),不同TNM分期患者EGFR基因突变率比较有差异(P0.05)。EGFR基因突变型ERCC1高表达率低于EGFR基因野生型(P0.05)。结论老年NSCLC患者EGFR基因突变以外显子21和外显子19突变为主,性别、吸烟、腺癌、肿瘤家族史、TNM分期为EGFR基因突变的影响因素,EGFR基因突变者ERCC1基因表达量低。     

hENT1蛋白和RRM1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨人类平衡型核苷转运载体1（hENT1）及核糖核苷酸还原酶M1（RRM1）在非小细胞肺癌（NSCLC）发病、预后中的作用及机制。方法应用免疫组化方法检测54份NSCLC组织及癌旁正常组织中bENT1、RRM1蛋白表达情况,并分析其与NSCLC临床病理特征及接受含吉西他滨方案化疗患者生存时间的相关性。结果bENT1蛋白及RRM1蛋白在NSCLC组织中的阳性表达率均显著高于癌旁正常肺组织（P〈0．05）,但均与年龄、性别、生存时间等临床特征无显著相关性;bENT1蛋白阳性表达、RRM1蛋白阴性表达者生存时间显著高于RRM1蛋白表达阴性、bENT1蛋白表达阳性者（P〈0．05）。结论bENT1蛋白和RRM1蛋白在NSCLC发病中具有一定作用,二者可通过调节化疗药物敏感性影响患者预后;联合检测上述两种蛋白表达有利于为患者制订个体化治疗方案。     

非小细胞肺癌组织中EGFR基因突变与ERCC1基因表达的关系

目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与切割修复交叉互补基因1(ERCC1)表达的关系。方法收集103例NSCLC组织腊块,用实时荧光定量PCR检测ERCC1 mRNA,用直接测序法检测EGFR基因。结果 103例中EGFR突变27例,未突变76例。27例EGFR突变型中,ERCC1基因高表达10例,低表达17例;76例EGFR野生型中,ERCC1基因高表达42例,低表达34例。Mann-Whitney u检验结果显示P>0.05。结论 NSCLC组织中EGFR基因突变状态与ERCC1的表达水平无相关性。     

EGFR基因突变与酪氨酸激酶抑制剂疗效及预后之间的关系

背景与目的表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）信号通路在非小细胞肺癌的发生和发展中起重要作用。EGFR酪氟酸激酶抑制剂（EGFR tyrosine kinase inhibitors，EGFR-TKIs）是目前非小细胞肺癌（NSCLC）治疗的热点。研究表明，EGFR基因突变与TKIs的疗效及预后相关。本研究旨在了解EGFR基因突变与两种酪氨酸激酶抑制剂疗效及预后的相关性。方法共收集了34例接受gefitinib单药治疗和25例接受erlotinib单药治疗的晚期NSCLC患者的病理组织蜡块及相关临床资料。用PCR-PAGE检测EGFR199b显子突变，PCR＊RFLP检测EGFR21外显子突变，均用直接测序进行验证。结合临床进行分析。结果59例NSCLC标本中共检测出22例标本中有EGFR基因突变，突变率为37．3％。EGFR基因突变率在女性、腺癌、不吸烟患者中高（P〈0．05）。有EGFR基因突变的患者接受酪氨酸激酶抑制剂治疗的有效率高于无突变患者（50％vs18．9％，P〈0．05），疾病控制率高于无突变患者（86．4％vs54．1％，P〈0．05）。有EGFR基因突变的患者的疾病进展时间和总生存期均高于无突变患者，但是没有统计学差异（P〉0.05）。结论EGFR基因突变在女性、腺癌和不吸烟者中发生率高。有EGFR基因突变的晚期NSCLC接受EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗的有效率和疾病控制率高于无EGFR基因突变者。     

乙醛脱氢酶1在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨ALDH1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测80例NSCLC组织和20例肺良性组织中ALDH1蛋白的表达,分析ALDH1蛋白表达与临床病理因素的关系及其对NSCLC预后的影响。结果ALDH1蛋白在NSCLC组织中的表达水平为63．8％,显著高于肺良性组织的10．0％（P〈0．05）。ALDH1蛋白表达与肺癌患者的细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移密切相关（P均〈0．05）,与性别、年龄、病理类型无关（P均〉0．05）。结论ALDH1的表达在NSCLC发生、发展中具有重要作用,可能成为诊断NSCLC的新的生物标志物,可以判断其生物学行为、预测转移趋势及预后。     

非小细胞肺癌个体化治疗疗效相关基因检测分析

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者个体化治疗相关基因表达情况。方法 122例NSCLC患者的标本,以分支DNA-液相芯片法检测ERCC1、RRM1、STMN1和TYMS基因mRNA表达;以xTAG-液相芯片法检测EGFR基因体细胞突变。结果 122例标本对TYMS、STMN1、ERCC1和RRM1基因mRNA低表达率分别为47.1%、38.2%、30.1%和19.5%;对RRM1、STMN1、ERCC1和TYMS基因mRNA高表达率分别为60.2%,50.0%,27.4%和17.6%;腺癌与非腺癌组比较TYMS和RRM1基因mRNA的低、中、高表达率有显著性差异(P<0.05)。121例患者的EGFR基因突变阳性54例(44.6%);野生型67例(55.4%)。结论对NSCLC患者个体化治疗相关基因检测有利于临床医师参考相关抗癌药物的耐药情况,选择敏感的个体化化疗方案。     

RASSF1A和p16 mRNA在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的探讨RASSF1A和p16 mRNA在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中表达的意义。方法采用RT—PCR检测96例NSCLC患者癌组织及相应的远癌正常肺组织中RASSF1A和p16 mRNA。结果①RASSF1A和p16 mRNA在远癌正常肺组织中均正常表达;在NSCLC组织中，RASSF1A mRNA表达下调或缺失率达53．12％（51／96）．P16 mRNA达36．46％（35／96）。②RASSF1A mRNA下调或缺失与NSCLC病理分期和淋巴结转移有关。⑧p16 mRNA表达下调或缺失率女性（52．38％）高于男性（24．07％），50岁以上组（44．93％）高于50岁以下组（14．81％），腺癌（48．15％）高于鳞癌（21．43％），Ⅲ～Ⅳ期NSCLC下调或缺失率（45．61％）高于Ⅰ～Ⅱ期（23．08％），有淋巴结转移组（50．00％）高于无淋巴结转移组（13．89％），P均＜0．05。④NSCLC组织中RASSF1A和p16 mRNA表达呈正相关（ra=0．278，P＜0．05）。结论RASSF1A和p16 mRNA在NSCLC中表达下调或缺失率较高，二者可能参与调控NSCLC的发生和发展。     

ERCC1、MMP7和Livin在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的探讨核苷酸切除修复交叉组1（ERCC1）、基质金属蛋白酶7（MMP7）和凋亡抑制蛋白Lvin在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及意义。方法应用免疫组化二步法检测30例NSCLC患者癌组织及其癌旁正常肺组织中的ERCC1、MMP7和Livin表达。结果癌组织ERCC1、MMP7、Livin阳性表达率分别为53．3％、80．0％、70．0％,与癌旁组织比较,ERCC1表达无统计学差异;MMP7、Livin表达明显升高（P均〈0．05）;ERCC1和Livin表达与病理类型、淋巴结转移密切相关,MMP7表达与淋巴结转移及临床分期密切相关。结论NSCLC组织中的ERCC1、MMP7、Livin表达与肿瘤的发展、浸润、转移有关,可作为判断肺癌进展的生物学指标,有助于判断预后。     

参照ERCCl、RRMl表达对非小细胞肺癌实施个体化治疗的疗效分析

目的分析ERCC1、RRM1表达对非小细胞肺癌实施个体化治疗的疗效影响。方法选择2007年6月到2012年6月期间在我院接受化疗的150名非小细胞肺癌患者作为研究对象,根据化疗方案不同分为顺铂治疗的78例、健择（吉西他滨）化疗的72例,比较各组不同化疗效果患者的ERCC1、RRM1表达情况。结果顺铂无效组患者ERCC1的mRNA水平、蛋白水平,均明显高于顺铂有效组（P〈0.05）;RRM1的mRNA水平、蛋白水平,与顺铂有效组无差异（P〉0.05）;健择无效组患者RRM1的mRNA水平、蛋白水平,均明显高于健择有效组（P〈0.05）;ERCC1的mRNA水平、蛋白水平,与健择有效组无差异（P〉0.05）。结论对于ERCC1表达水平与铂类药物化疗效果成反比,RRM1表达水平与健择化疗效果呈反比,ERCC1、RRM1表达可以指导非小细胞肺癌患者的化疗药物使用。     

非小细胞肺癌患者外周血CCNB1IP1及c-Cbl基因突变研究

目的检测NSCLC患者外周血c-Cbl和CCNB1IP1基因突变情况。方法收集20例健康人、20例肺结核和40例NSCLC患者外周血标本,采用RT-PCR和基因测序方法,检测c-Cbl和CCNB1IP1基因突变。结果所有标本中均未检测出CC-NB1IP1基因突变;而仅在NSCLC患者外周血检测到4种c-Cbl基因突变,突变率为20%;突变率与患者的性别、年龄及病理学分型均无相关性(P>0.05);而不同临床分期间突变率不同,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NSCLC患者外周血中检测到c-Cbl基因突变,且不同临床分期间突变率不同。     

重庆地区非小细胞肺癌表皮生长因子受体突变检测与临床病理特征分析

目的探讨重庆市地区非小细胞肺癌（NSCLC）患者表皮生长因子受体（EGFR）突变状态及其与临床病理特征的关系。方法收集55例NSCLC患者的癌组织或胸水标本,采用扩增阻滞突变系统（ARMS）检测EGFR外显子18、19、20和21突变状态。结果55例患者中,EGFR突变14例,突变率25．45％;其中,男、女突变率分别为12．50％、43．48％（P=0．013）;吸烟、不吸烟患者突变率分别为11．11％、39．29％（P=0．017）;外显子19突变8例（57．14％,8／14）,外显子21突变5例（35．71％,5／14）,外显子18、20同时突变1例（7．15％,1／14）。结论在重庆市地区NSCLC患者中,女性、非吸烟者EGFR突变率较高,EGFR基因突变以外显子19和21为主。     

肺癌患者外周血中MDR1的表达及临床意义

目的 检测多药耐药基因-1（MDR1）在肺癌患者外周血中的表达,探讨MDR1的表达水平与肺癌病理类型及临床化疗进程之间的关系.方法 应用荧光定量PCR（qRT-PCR）技术,动态监测45例肺癌患者化疗前后外周血中MDR1的表达水平,并与48例健康者进行对照比较.结果 肺癌组化疗前MDR1的阳性率28.89%（13/45）,明显高于健康对照组2.08%（1/48）,差异显著（P〈0.05）;各种病理类型的肺癌随着化疗次数的增多MDR1的表达均增强;化疗前后各期MDR1的表达程度：非小细胞肺癌（NSCLC,肺鳞癌和肺腺癌）明显高于小细胞肺癌（SCLC）,差异具有统计学意义（P〈0.05）,而肺鳞癌和肺腺癌之间MDR1的表达程度相当,无显著差异,（P＞0.05）.结论 化疗可诱导各种病理类型肺癌MDR1表达增加;病理类型不同诱导化疗耐药的机制可能不同：NSCLC可能为原发性MDR,SCLC可能为获得性MDR;动态检测肺癌患者外周血中MDR1的表达水平,有利于进行肺癌耐药的监测与评价.     

非小细胞肺癌组织中KiSS-1的表达及意义

目的探讨KiSS-1基因在非小细胞肺癌（NSCLC）发生、发展中的作用。方法采用免疫组化sP法检测61例NSCLC组织（观察g1）和20例正常肺组织（对照组）中的KiSS-1表达，并分析与NSCLC临床病理参数的关系。结果观察组中KiSS-1阳性表达率为50．8％，明显低于对照组的80．0％（P〈0．05）；KiSS-1表达与NSCLC临床分期、肿瘤体积、淋巴结转移、4a生存率密切相关。结论KiSS-1在NSCLC的发生、发展中发挥重要作用，可作为预测NSCLC发生及侵袭转移的参考指标之一。     

非小细胞肺癌患者外周血细胞中p53基因突变的研究

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血细胞中p53基因突变检测的临床意义。方法收集32例NSCLC患者和30例健康者的外周血标本,采用PCR结合DNA测序方法检测血标本中p53基因突变,然后进行统计学分析。结果①肺癌组32例患者血标本共有12例检测到p53基因突变,突变率为37．5％;健康组30例血标本没有检出p53基因突变。②肺癌患者血液p53基因突变率在（Ⅰ＋Ⅱ）期为9．1％、（Ⅲ＋Ⅳ）期为52．4％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论检测外周血中p53基因突变对于肺癌的诊断、发现远处转移和估计预后具有重要的意义。     

C-erbB-2在非小细胞肺癌中表达的研究

目的探讨c-erbB-2蛋白在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SABC法检测65例原发性NSCLC和20例正常肺组织中c-erbB-2蛋白的表达水平。结果20例正常肺组织仅2例阳性表达，阳性率为10．0％。NSCLC组阳性表达率为63．1％，两组比较差异有显著性（P〈0．05）。其中鳞癌和腺癌的阳性表达率分别为62．5％和63．6％，无显著差异（P〉0．05）。在NSCLC中，c-erbB-2在病理分级Ⅰ＋Ⅱ级和Ⅲ级的阳性率分别为57．6％和68．8％；在TNM分期Ⅰ＋Ⅱ期和Ⅲ＋Ⅳ期的阳性表达率分别为60．0％和66．7％，以上两组间比较差异均无显著性（P〉0．05）。有无淋巴结转移组的阳性表达率分别为73．7％和48．1％，两组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论c-erbB-2阳性表达与NSCLC的发生，淋巴结转移呈显著正相关，高表达者提示可能伴有淋巴结转移，临床已进入晚期。     

酶切富集PCR法在非小细胞肺癌患者EGFR基因突变检测中的应用

目的评价酶切富集PCR法在非小细胞肺癌患者EGFR基因突变临床检测中的可行性。方法应用酶切富集PCR及非酶切富集PCR法分析非小细胞肺癌患者EGFR基因突变状况。结果在50份肿瘤组织、55份血浆、15份血清标本中,酶切富集PCR法分别检出EGFR基因突变22例（44.0%）、29例（52.7%）、9例（60.0%）,而非酶切PCR法则仅能检出EG-FR基因突变16例（32.0%）、7例（12.7%）、2例（13.3%）,P=0.216、〈0.001和0.008;应用酶切富集PCR法检测15例配对血浆、组织标本和15例配对血浆、血清标本EGFR基因突变,其检出率无明显差异（53.3%vs 46.7%和66.7%vs 60.0%）。结论酶切富集PCR法适用标本广泛、简便易行,便于临床非小细胞肺癌患者EGFR基因突变筛查。     

犬间质来源细胞因子-1的基因克隆和体内分布及在急性心肌梗死中的表达变化

目的克隆犬间质来源细胞因子-1（Stromal derived factor-1，SDF-1）全长cDNA，并研究其在犬体内不同组织的表达分布情况及其在急性心肌梗死后的动态变化规律。方法用RT-PCR的方法克隆出犬SDF-1全长cDNA，经过双向序列测定加以确认。通过结扎冠状动脉左前降支制备犬急性心肌梗死模型。实验动物分为2组：心肌梗死组犬（MI组）和假手术组犬（S组），MI组再按观察时点随机分为2h，7d和4周，采用Real-timeRT-PCR检测SDF-1的mRNA表达情况，用HE染色观察心肌形态变化。结果（1）成功克隆犬SDF-1全长cDNA；（2）SDF-1在正常犬的心肌、脑、脾脏、肝脏、血管、肾脏、骨骼肌、睾丸和肺中均有构成性表达；（3）AMI后，心梗区的SDF．1mRNA的表达于2h开始下降，7d继续下降，4周开始回升，接近正常对照（假手术组）的水平，周围正常心肌于2h开始下降，7d开始回升，4周继续上升。心梗2h，SDF-1mRNA表达水平，心梗区高于周围正常区（P〈0．01），7d和4周时则低于周围正常区（P〈0．05）。结论SDF．1在正常的生理功能调节中具有重要的意义，它还可能与干细胞向缺血心肌的动员和归巢相关。     

上皮性卵巢癌DNA-PKcs和ERCC1表达与预后相关因素分析

目的探讨原发上皮性卵巢癌组织中DNA—PKcs和ERCC1表达与卵巢癌预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测99例上皮性卵巢癌和16例正常卵巢组织中DNA-PKcs和ERCC1的表达。结果DNA-PKcs和ERCC1在卵巢癌组织中的阳性率分别为60．61％和53．54％,均显著高于正常卵巢组织（P〈0．01）;DNA-PKcs和ERCCI表达呈显著正相关（r=0．408,P=0．000）。单因素分析显示,DNA-PKcs与ER．CCl共表达,FIGO分期、淋巴结转移、CA125半衰期、残留灶直径均与卵巢癌患者的生存时间有关（P〈0．05）。多因素分析显示,ERCC1表达、FIGO分期、淋巴结转移与残留灶直径均是影响卵巢癌预后的独立危险因素。结论DNA-PKcs和ERCC1在上皮性卵巢癌组织中表达率明显高于正常卵巢组织;联合检测DNA-PKcs与ERCC1表达可作为早期诊断及预测卵巢癌预后的指标。