盐酸埃他卡林对[~3H]格列本脲与动脉平滑肌K_(ATP)结合和解离动力学过程的影响以及与核苷酸的交互作用

目的　研究盐酸埃他卡林 (Iptakalimhydrochloride,Ipt)对 [3 H]格列本脲 (glibenclamide,Gli)与大鼠血管平滑肌ATP敏感性钾通道 (ATP sensitivepotassiumchannel,KATP)的硫脲受体(Sulfonylureareceptor,SUR2B)结合和解离动力学过程的影响 ,并比较其作用特点与核苷酸类物质的异同点及它们之间的交互效应。方法　KATP拮抗剂 [3 H]Gli与大鼠去内皮主动脉平滑肌特异性结合与解离的动力学试验。结果　 (1 )在浓度为 1 0pmol·L-1 ～ 0 5mmol·L-1 范围内 ,Ipt不能取代SUR2B与 [3 H]Gli2 0 0 3 0 616收稿 ,2 0 0 3 112 5修回 国家新药研究与发展重点项目 ,No 9690 10 10 1;国家“863”计划重大专项 ,No 2 0 0 2AA2Z3 13 7作者简介 :何华美 ,男 ,3 6岁 ,博士 ,副教授。研究方向 :心血管药理学。E mail:longchaoliang @sohu .com ;汪　海 ,男 ,40岁 ,研究员 ,博士生导师。研究方向 :心血管药理和新药。通讯作者。Tel :86 10 6693 2 65 1,Fax:86 10 682 1165 6,E mail:wh @nic.bmi.ac .cn之间的特异性结合。Ipt 1 0 0 μmol·L-1 调节 [3 H]Gli与SUR2B特异性结合的动力学过程的特征为抑制其结合动力学过程 ,使其结合速率减慢 ,结合幅度降低 ;促进其解离动力学过程 ,使其解离速率加快 ,解离幅度增加。 (2 )ATP     

食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛甲基化的意义

目的研究食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛甲基化与其mRNA表达的关系。方法选取4种食管癌细胞系OE21，OE19，OE33和TE7，经重亚硫酸钠处理后，采用限制性酶切图谱分析(COBRA)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术，在DNA甲基转移酶抑制剂5-氮2^ -脱氧胞苷(5-aza-CdR)处理前后，对其MT-3基因CpG岛的甲基化情况及mRNA的表达情况进行对比研究。结果4种食管癌细胞系的MT-3基因均存在不同程度的CpG岛超甲基化。经5-aza-CdR处理后，超甲基化状态解除，mRNA的表达水平也较处理前明显提高(P=0.002)。结论食管癌细胞系中MT-3基因CpG岛的超甲基化可抑制其mRNA表达。当其超甲基化解除后，MT-3基因的mRNA表达水平也会相应升高。     

建立5'-核苷酸实验室参考值范围必要性的探讨

5’-核苷酸（5＇-nucleotidase，5’-NT）是一种特殊的磷酸脂水解酶，能特异水解5’-核苷链于戊糖的5’-磷酸，生成核苷和无机磷酸，主要存在于肝脏中，最适pH值为6．6～7．0。受锰离子激活，但受镍离子抑制，长期以来作为一种检测肝胆疾病的指标应用于临床。我们在实际工作中发现，本实验室5’-NT的参考值范围与试剂厂家提供的参考值范围存在较大差异，因此必须建立实验室的参考值范围。本研究了上述两个参考值范围对血清5’-NT测定值阳性率的影响，现报告如下。     

补锌对急性冷应激大鼠解偶联蛋白水平的影响

目的　研究补锌对大鼠耐寒力的影响及其可能机制。方法　雄性SD大鼠 6 0只 ,随机分为 4组 ,1、3组正常进水进食 ,2、4组给予正常饲料 ,饮高锌水 [补锌 1mg (kg·d) ],5d后 ,3,4组大鼠于 - 15℃的冷室中暴露 2h ,测各组直肠温度后与 1,2组一同宰杀 ,测定血浆和组织中的锌含量 ;用3 H标记的鸟嘌呤核苷酸 (3 H GTP)与线粒体上解偶联蛋白 (UCP)相结合 ,用液体闪烁仪测定其放射性活性 ,经ScatchardPlot测定出两者结合的解离常数 (Kd)和最大结合量 (Bmax)。结果　未补锌组和补锌组直肠温度下降的幅度分别为 - 2 95± 0 6 1和 - 1 16± 0 39℃ (P <0 0 5 ) ;冷暴露可以增加组织的锌水平 ;补锌组、冷暴露组与对照组相比Bmax增加 ,Kd值无明显差别。结论　适量补锌可以通过增加棕色脂肪组织线粒体中UCP含量提高机体的耐寒力。     

外源核苷酸对免疫抑制小鼠胸腺细胞DNA损伤的影响

目的:检测外源核苷酸对经环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠胸腺细胞DNA损伤的影响。方法:采用18～20 g昆明种小鼠30只,雌雄各半,随机分成阴性对照组(NEC)、阳性对照组(POC)和核苷酸组(NTG),每组10只。NEC组和POC组小鼠均饲喂半纯合无核苷酸的基础日粮,NTG组则在基础日粮中添加0.25%的核苷酸,实验期为21 d。在实验结束前18 h POC组和NTG组小鼠按照150mg/kg bw的剂量腹腔注射环磷酰胺,NEC组注射生理盐水,实验结束时测定脾脏和胸腺脏器指数,并取胸腺细胞,做单细胞凝胶电泳,观察细胞DNA损伤情况。结果:在基础日粮中添加核苷酸对小鼠免疫器官重量没有显著影响(P>0.05),但能极显著降低受损胸腺细胞百分率(P<0.01)和受损细胞DNA尾长(P<0.01)。结论:外源核苷酸能显著降低免疫抑制小鼠受损胸腺细胞百分率和损伤程度。     

MTHFR基因C677T和A1298C多肽与直肠癌的遗传易感性

目的探讨叶酸代谢中的亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因单核苷酸多肽与直肠癌风险的关系。方法以聚合酶链反应和限制性片段长度多态方法,对56例直肠癌患者和143例正常人对照的MTHFR基因C677T和A1298C基因型进行检测分析其对直肠癌风险的相关性。结果在正常对照组中,MTHFRC677TCC、CT、TT基因型频率分别为62·90%、35·08%和2·12%,而在直肠癌病人中分别为58·93%、26·77%和14·26%。A1298C与A1298C基因型在病例和对照中的分布差异无显著性意义。MTHFRA1298C基因型在病例和对照中的分布差异无显著性意义,1298变异基因型与677变异基因型之间无协同作用。结论MTHFR单核苷酸多肽不是中国人直肠癌的遗传易感性因素。     

3-AP:一种新型核糖核苷酸还原酶抑制剂

近年来高通量筛选、组合化学和基因工程等先进技术的应用加速了抗肿瘤药物的研发进程。对新靶点的药物和传统机制的更加有效的细胞毒性药物成为研究的热点。3-氨基吡啶．2-甲醛硫代缩氨基脲(3-AP)是一种新的核糖核苷酸还原酶(RR)抑制剂，属于2-杂环甲醛硫代缩氨基脲的衍生物；该类化合物是目前为止最强的RR抑制剂，     

海洛因对大鼠黄嘌呤氧化酶和血尿酸的影响

目的:检测黄嘌呤氧化酶(xanthineoxidase ,XOD)和血浆尿酸含量,研究海洛因给药对嘌呤核苷酸分解代谢的影响。方法:建立海洛因给药、停药大鼠模型,测定尿酸及XOD含量。结果:给药组尿酸及XOD含量高于对照组。与给药组比较,两个停药组尿酸含量、血浆和肝XOD含量降低;停药8d组脑顶叶XOD含量降低,脑干XOD含量略有下降趋势。但两个停药组脑干XOD含量仍高于对照组。结论:海洛因通过增加XOD的含量,使嘌呤核苷酸分解代谢增强,且脑中这一作用消除较慢。     

CpG基序增强DNA疫苗免疫原性研究进展

DNA疫苗广泛用于细菌、病毒性疾病以及肿瘤等的预防和治疗研究，但已报道的临床实验研究表明并未取得良好的免疫效果。未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotide，ODN)具有较强的免疫佐剂特性。近年来有不少学者作了关于CpG—ODN增强DNA疫苗免疫原性的研究，本文就有关研究进展作一综述。     

叶酸受体介导99mTc标记c-erbB2癌基因反义寡核苷酸的乳腺癌细胞摄取率

目的研究叶酸受体介导的99mTc标记c-erbB2癌基因反义寡核苷酸乳腺癌细胞的摄取率.方法用双功能鳌合剂次已酰双半胱氨酸(EC)连接15mer寡脱氧核苷酸(ODN)和叶酸(FA),形成ODN-EC-FA,用99mTc标记,形成99mTc-ODN-FA.同样的方法不加叶酸,形成99mTc-ODN.加2μCi的99mTc-ODN-FA和99mTc-ODN到107cell/瓶对数生长期乳腺癌细胞MDA-MB-231,分别于20、40、60、120、180、240分钟测定细胞的摄取率.结果乳腺癌细胞对99mTc-ODN-FA的摄取率明显高于99mTc-ODN.结论叶酸配体与受体的特异结合使寡核苷酸的乳腺癌细胞摄取率明显增加.