丙型肝炎病人抗丙型肝炎病毒IgM检测的临床应用

丙型肝炎病人抗丙型肝炎病毒ＩｇＭ检测的临床应用王业东，朱传琳，姚家，程云，王海清，耿业丽，李跃旗（中国人民解放军３０２医院，北京１０００３９）在丙型肝炎病人中检测抗丙型肝炎病毒ＩｇＭ抗体国内外已见报道［１－３］。其临床意义如何，各家观点多有共识也略有...     

乙型肝炎病毒表面抗原单链抗体细胞内免疫抗乙型肝炎病毒基因治疗研究

目的 :研究乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)人源单链可变区抗体 (ScFv)细胞内免疫抗乙型肝炎病毒(HBV)基因治疗的作用。方法 :用噬菌体表面展示技术筛选特异性的HBsAg人源单链可变区抗体 ,聚合酶链反应(PCR)法扩增HBsAg单链抗体基因 ,并构建表达HBsAgScFv基因的重组逆转录病毒载体pLXSN HBsAgScFv,转染PA317细胞 ,将转染细胞分泌的假病毒颗粒感染 2 2 15细胞 ,酶联免疫吸附法 (ELISA)检测其上清HBsAg和HBeAg ,定量检测HBVDNA。结果 :成功筛选出HBsAgScFv ,PCR扩增出 75 0bp的全基因 ,构建HBsAgScFv基因的逆转录病毒载体 ,转染PA317细胞 ,在上清中检测出含HBsAgScFv假病毒颗粒的存在 ,上清感染 2 2 15细胞后第 3、5、7、14天 ,HBsAg、HBeAg逐渐下降 ,到第 14天时HBsAg已变为阴性 ,DNA定量检测无明显变化。结论 :HBsAgScFv能成功地在逆转录病毒载体中表达 ,并有抑制HBsAg、HBeAg表达的作用     

实现医疗保障“零障碍”

医疗工作是医院的中心工作 ,为保障医疗工作的顺利进行 ,在创建“绿色医院”的过程中 ,院党委把实现医疗保障“零障碍”作为一项重要的奋斗目标提了出来。一、医疗保障“零障碍”在“绿色医院”中的地位和作用医疗保障“零障碍” ,是指医院为满足病人“生理需求”和“心理需求”而及时、顺畅、快捷、高效地提供服务保障的最佳状态。它至少应具备以下四个特征 :一是保障内容的全面性 ,即强调齐全配套、缺一不可 ;二是保障时间的及时性 ,即强调“第一时间”随叫随到 ;三是保障过程的通畅性 ,即强调“一路绿灯” ,畅通无阻 ;四是保障效果的高效…     

急性乙型肝炎患者的抗-HIV

丹麦自1981年首次报道艾滋病病例以来,到1986年底已有124例患者。本文报告在病毒性肝炎患者的病程中人免疫缺陷病毒(HIV)的感染情况及后者对乙型肝炎的影响。1975年1月～1984年12月在哥本哈根某医疗单位收治了331例急性乙型肝炎患者,用ELISA 方法初筛这些患者的血清抗-HIV,阳性患者再用 Western 印迹技术进一步确诊。结果表明,在331例急性乙型肝炎患者中,97例女性患者抗-HIV 全部阴性,234例男性患者中5例阳性(阳性率2%)。这一结果证明了急性乙型肝炎患者感染 HIV 更为普遍的推测。本组5例急性乙型肝炎同时     

人胚肝单层细胞培养物中成纤维细胞抑制的初步研究

在人胚肝单层细胞的培养中,主要困难是成纤维细胞迅速大量增殖,使上皮样肝细胞的生长受到竞争性抑制。对此,国内、外还未找到一种满意的解决办法。近两年来,我们作了一些探索和研究,现将结果报道如下。 材料和方法 一、材料 1.0.1％胰蛋白酶(1:250):用Hank氏溶液配制成0.3％浓溶液,冻存于-30℃中,用     

军队合理医疗应注意的问题

军队医院的合理医疗，是军队医疗保障水平的重要标志。与地方医院相比，它具有自身的特殊性，除参与市场竞争外，还有一些应注意的问题。本文着重从坚持为军队服务。坚持以医疗质量为核心，坚持以伤病员为中心，坚持医疗保险和医疗服务协调发展，重视经济管理、加强成本核算、控制医疗费用不合理增长，适当创收、弥补经济补偿不足、坚持高效低耗的路子等方面，对军队医院合理医疗的要求与注意事项进行了讨论，以期真正达到合理医疗的目的。     

建立一种PCR产物直接测序检测HBVYMDD突变的方法

目的 建立检测HBV YMDD变异的PCR产物直接测序法,并与传统实时荧光PCR检测YMDD突变的结果进行比较分析.方法 选取103份慢性乙型肝炎患者血清标本,提取血清HBVDNA.用实时荧光PCR检测YMDD突变;用巢式pcR扩增HBV逆转录酶基因,对PCR产物进行DNA双向测序,NTI软件比对结果.采用Kappa一致性检验对DNA测序法检测的rt204位点突变与实时荧光PCR检测的YMDD突变结果进行比较.结果 PCR产物直接测序法可有效检测低病毒载量标本(500拷贝/ml)和高病毒载量(1010拷贝/ml)标本,同时可以避免高病毒载量标本的抑制效应.与实时荧光PCR相比较,YIDD突变检测符合率为100%,YVDD突变检测符合率97.1%,YIDD与YVDD共生突变符合率76.2%(Kappa=0.853,P<0.01).结论 本研究建立的PCR产物直接测序法检测HBV耐药相关基因突变,灵敏度高,检测范围宽,与实时荧光PCR检测结果有较高的符合率,并可同时检出YMDD、YIDD和YVDD.     

三例艾滋病患者的人类免疫缺陷病毒易感基因型分析

近年来的研究表明 ,人类免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)易感基因ＣＣＲ5、ＣＣＲ2和ＳＤＦ1等基因位点的突变可干扰艾滋病的发病进程[1,2 ] 。其中ＣＣＲ5 △ 32基因突变似乎是最重要的因素 ,它的纯合子突变可降低ＨＩＶ传播的危险性 ,杂合子突变可以延缓艾滋病的发病进程 ,ＣＣＲ2 6 4Ｉ和ＳＤＦ1 3′Ａ基因突变也可延缓艾滋病的发病 ;而甘露糖结合蛋白 (ｍａｎｎｏｓｅ ｂｉｎｄｉｎｇｌｅｃｔｉｎ ,ＭＢＬ)的纯合子突变则增加个体对ＨＩＶ的易感性。因此 ,有关ＨＩＶ易感基因的研究成为艾滋病领域中的热点课题。我们在以往研究[3 ,4 ] 的基础上…     

新型免疫活性细胞CIK体外对肝癌细胞的杀伤

目的 观察人体CIK(cytokine-induced killer)细胞的体外增殖力及杀伤肝癌细胞活性.方法 采取健康自愿者的成分血,用淋巴细胞分离液分离获得外周血单个核细胞(PBMC),在体外培养条件下,通过加入不同细胞因子(如IFN-γ,IL-1,IL-2,CD3 mAb)培养诱导成CIK细胞和LAK细胞,观察不同培养细胞的增殖能力;用流式细胞仪对培养细胞做细胞表型动态分析,观察培养细胞的表面标志;与LAK细胞作对比,用MTT法测定并比较不同效应细胞的体外抗肝癌细胞活性.结果 CIK细胞在培养14 d后开始大量增殖且在含人血清的培养基中增殖数量最多,可达500多倍.经表型分析表明,CIK细胞属于异质细胞群,在培养过程中,CD3+CD56+双阳性细胞的绝对数量获得了大量增殖,至56 d时可占细胞总数的51.26%,是CIK主要的效应细胞;实验表明,CIK细胞体外杀伤肝癌细胞的活性明显优于LAK细胞.结论 CIK细胞是一种具有较强杀伤肝癌细胞的免疫活性细胞,有可能应用于抗肿瘤的生物治疗.     

纤维连接蛋白降解片段（MAD2）单抗的制备及肝细胞癌患者血浆含量检测

应用杂交瘤技术制备了纤维连接蛋白（FN）降解片段MAD2的单克隆抗体（McAb)；建立了ＭＡＤ２检测的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法；对２２７例肝细胞癌（ＨＣＣ）、７６例肝转移癌（ＨＭＣ）、９８例消化道癌（ＡＣＣ）、１５６例慢性肝病（ＣＬＤ）患者和４８例健康人体血浆ＭＡＤ２含量进行测定。结果显示，制备的ＭＡＤ２ ＭcAb属ＩgG1，与ＦＮ无交叉反应；ＨＣＣ组血浆ＭＡＤ２含量均值与ＣＬＤ组、ＨＭＣ组、ＡＣＣ组和正常对照组比较差异有显著性意义（分别Ｐ＜0.01）,以HCC患者的最低MAD2值作临界值时，仅13.5%CLD、6.6%HMC和4.1?C超过此值，而健康人体血浆MAD2含量均低于临界值；65例血清AFP正常的HCC患者其血浆平均MAD2值仍明显高于非HCC肿瘤、CLD患者和正常对照。结合以前的结果，进一步表明，血浆MAD2检测可作为HCC诊断的新标志物，并可与AFP相互补充；ＭＡＤ２ ＭcAb的制备使MAD2的检测变得易行。