肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及E-cadherin、Vimentin和TGF-β表达的影响

目的 研究肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及癌、癌旁组织中上皮-间质转化(EMT)相关因子E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响.方法 40只小鼠随机分为肺复康组(17.2 g生药/kg)、5-Fu组(25 mg/kg)、Lewis肺癌模型组、正常组.检测肿瘤体积、肿瘤质量以及癌、癌旁组织中E-cadherin、Vimentin和TGF-β的蛋白表达情况.结果 与模型组相比,肺复康组肿瘤体积减小(P＜0.01),肿瘤质量降低(P＜0.01);肺复康组抑瘤率为36％.与正常组比较,模型组癌及癌旁组织E-cadherin表达降低(P＜0.01),Vimentin、TGF-β表达升高(P＜0.01);与模型组癌及癌旁组织相比,肺复康组癌及癌旁组织E-cadherin表达升高(P＜0.01),而Vimentin、TGF-β无显著性差异(P＞0.05).结论 肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤的生长具有一定的抑制作用;并能上调E-cadherin的表达,从而促进肿瘤细胞间的同质粘附而抑制肿瘤的侵袭、转移.     

α平滑肌肌动蛋白、波形蛋白与陷窝蛋白1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的观察α平滑肌肌动蛋白、波形蛋白与陷窝蛋白1在乳腺癌间质和正常乳腺组织中的表达变化。方法收集2012年1月至2013年3月在沧州市人民医院手术治疗并经病理证实的女性乳腺癌患者60例纳入病例组,选择同期乳腺活检的女性正常乳腺组织30例纳入对照组。采用免疫组织化学的方法检测两组间α平滑肌肌动蛋白、波形蛋白与陷窝蛋白的表达变化。结果α平滑肌肌动蛋白、波形蛋白与陷窝蛋白1在正常乳腺组织及乳腺癌间质中阳性表达率分别为:0 vs73.4%、10.0%vs 61.2%、76.7%vs 60.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);三种标志物在不同年龄、组织学分型、临床分期及有无淋巴结转移的患者中表达水平均有不同,差异有统计学意义。结论α平滑肌肌动蛋白、波形蛋白在乳腺癌进展过程中表达逐渐增高,而陷窝蛋白1则呈现负性表达的趋势,提示三者在乳腺癌浸润和转移过程中起重要作用。早期乳腺癌监测此三项指标有助于乳腺癌危险度分级。     

人羊膜上皮细胞有向心肌样细胞分化的特性

目的:通过体外诱导分化实验,评价人羊膜上皮细胞向心肌样细胞分化的能力.方法:实验于2005-09/2006-12在贵州省细胞工程重点实验室完成.①对象:经产妇知情同意,无菌采集健康足月剖宫产胎盘6份,实验经医院医学伦理委员会批准.②实验方法:采用机械法将羊膜从胎盘组织上剥离,D-Hank's液冲洗后剪成碎片,加入含有0.2 g/L乙二胺四乙酸的0.5 g/L胰蛋白酶溶液,离心、消化、过滤,收集滤液,加入胎牛血清终止消化,重复消化2次.合并3次消化所得的细胞悬液,离心后将细胞沉淀悬浮于L-DMEM培养基中,按1.25×108 L-1密度接种,常规培养3 d后更换培养基,待细胞达80%~90%融合后用胰蛋白酶 乙二胺四乙酸联合消化,终止后离心弃上清,细胞沉淀用培养基重新悬浮,按1×107 L-1密度传代.③实验评估:用流式细胞仪鉴定人羊膜上皮细胞表型;使用10 μmol/L 5-氮杂胞苷和1 mmol/L抗坏血酸磷酸盐诱导第2代人羊膜上皮细胞,免疫荧光染色法检测诱导后细胞中特异蛋白结蛋白和α-辅肌动蛋白的表达,RT-PCR检测心肌特异性转录因子Nkx2.5、GATA-4和心肌特异性收缩蛋白α-肌球蛋白重链mRNA的表达.结果:①人羊膜上皮细胞的免疫组化特征:人羊膜上皮细胞几乎不表达CD44,不表达波形蛋白,表达角蛋白19.②人羊膜上皮细胞α-辅肌动蛋白和结蛋白的表达:人羊膜上皮细胞经诱导分化后,表达肌系细胞标志α-辅肌动蛋白和结蛋白.③人羊膜上皮细胞Nkx2.5、GATA-4和α-肌球蛋白重链mRNA的表达:人羊膜上皮细胞经诱导分化后,表达心肌特异性转录因子Nkx2.5 mRNA和GATA-4 mRNA，心肌特异的可收缩蛋白α-肌球蛋白重链mRNA未见表达.结论:通过胰蛋白酶消化法分离获得的人羊膜上皮细胞具有向心肌样细胞分化的特性,可能成为细胞心肌成形术的候选供体细胞.     

自噬相关蛋白LC3和E-钙黏蛋白、波形蛋白 在子宫内膜异位症中的表达

目的 研究自噬相关蛋白(LC3)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)在子宫内膜异位症病人中的表达情况,探讨其与子宫内膜异位症发生发展的相关性。方法 选取2018年1—11月在武汉市第三医院行全子宫切除术的子宫内膜异位症41例,留取41例病人的异位子宫内膜(异位内膜组)及在位子宫内膜(在位内膜组),另外留取同期的38例因子宫肌瘤行全子宫或次全子宫切除术病人的正常子宫内膜(正常内膜组),采用免疫组化SP法检测留取标本中LC3,E-cadherin,Vimentin表达。结果 异位内膜组中LC3的阳性表达率(78.049%)明显高于正常内膜组(21.053%)和在位内膜组(31.707%)(P＜0.05),LC3的阳性表达率在正常内膜组和在位内膜组中差异无统计学意义(P＞0.05),异位内膜组和在位内膜组中E-cadherin阳性表达率(19.512%、39.024%)均低于正常内膜组(73.684%)(P＜0.05);异位内膜组和在位内膜组中Vimentin阳性表达率(73.171%、53.659%)均高于正常内膜组(18.421%)(P＜0.05)。异位内膜组LC3与E-cadherin、Vimentin表达有相关性(P＜0.05);在位内膜组LC3与E-cadherin、Vimentin表达无相关性(P＞0.05);E-cadherin与Vimentin在异位内膜组和在位内膜组中表达呈负相关(P＜0.05);正常子宫内膜中三者无相关性(P＞0.05)。结论 在异位子宫内膜组织中,自噬表达水平上调伴有EMT现象的发生,推测自噬可能参与EMT发生,导致异位病灶的形成发展。     

MEK抑制剂对脊髓损伤后胶质瘢痕形成的影响

目的:观察MEK(mitogen-activated ERK-regulating kinase,丝裂原活化的细胞外信号调节激酶之调节激酶)抑制剂对脊髓损伤后胶质瘢痕形成的影响,并探讨胶质瘢痕形成的机制。方法:36只SD大鼠随机分为3组。Ⅰ组为假手术组,只打开椎板,不打击脊髓;Ⅱ组及Ⅲ组分别为脊髓损伤组及脊髓损伤后干预组,均造成T12脊髓损伤,Ⅲ组每天给予腹腔注射MEK抑制剂(U0126)共9d,其余组给予腹腔注射等量的二甲基亚砜(DMSO)。在术后当天、1d、3d、5d、7d、14d、21d、28d时对每组大鼠行BBB评分;术前及术后当天、14d及28d时对大鼠行体感诱发电位检测;术后14d及28d时分别处死大鼠,灌注固定,取原打击处脊髓标本行HE染色、神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)及波形蛋白(Vim)免疫组化染色并光镜下进行观察,计算阳性细胞数。结果:Ⅰ组各时间点BBB评分及其他指标均无明显变化。脊髓损伤后,Ⅱ组及Ⅲ组大鼠双后肢运动功能均表现出不同程度的恢复,术后28d时Ⅱ组BBB评分为12.00±1.70分,Ⅲ组为16.5±1.08分,Ⅲ组恢复速度较Ⅱ组更快(P<0.05)。脊髓损伤后,大鼠双后肢感觉诱发电位潜伏期明显延长,波幅明显降低;术后观察,Ⅲ组潜伏期及波幅恢复较Ⅱ组明显增快(P<0.05),Ⅲ组在28d时可达到潜伏期16.86±0.55ms、波幅4.19±0.11μV。脊髓损伤后,HE染色可看到胶质细胞明显增多,胶质瘢痕形成,28d时Ⅲ组较Ⅱ组瘢痕范围小;损伤后星形胶质细胞明显活化增殖,GFAP及Vim的镜下表达数量明显增多。Ⅱ组、Ⅲ组损伤后14d时GFAP的表达分别为143.56±1.09和133.56±3.31,Vim的表达分别为93.82±4.48和89.32±6.50;28d时两组的GFAP表达分别为110.68±9.41和102.44±6.93,Vim的表达分别为72.96±4.16和66.44±4.46,干预后明显下调了GFAP及Vim的表达(P<0.05)。结论:MEK抑制剂能通过抑制星形胶质细胞的增殖,下调GFAP及Vim的表达,减少胶质瘢痕形成;同时可促进脊髓损伤后大鼠双后肢行为学及神经功能的恢复。     

Twist、E—cadherin及Vimentin在表达及意义宫颈鳞状上皮癌变的

目的探讨宫颈鳞状上皮癌变过程中Twist、E-cadherin、Vimentin的表达规律及临床意义。方法以慢性宫颈炎为对照,检测宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈鳞状细胞癌组织标本中Twist（原位杂交）、E-cadherin、Vimentin（SABC免疫组化法）的表达情况,分析其相关性。结果（1）慢性宫颈炎、CINI、CINII、CINIU及宫颈癌组中：Twist的阳性率分别为10．O％、28．1％、29．6％、42．9％、64．3％,其中Twist在宫颈鳞癌的表达均明显高于其他组（P〈0．05）。E-cadherin、Vimentin的阳性率分别为80．O％、68．8％、55．6％、51．4％、39．3％和0、6．3％、7．4％、31．4％、32．1％,其中两者在宫颈鳞癌组、CINⅢ组中的表达与慢性宫颈炎组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）,（2）分析全部CIN及宫颈癌病例,Twist的表达与E-cadherin呈负相关（r=-0．37,P〈0．01）,与Vimentin呈正相关（r：0．23,P〈0．05）。结论宫颈组织中Twist的异常表达与宫颈鳞状上皮癌变发生关系密切,Twist可能通过调控E-cadherin、Vimentin的表达参与宫颈鳞状细胞癌的发生。     

抗突变型瓜氨酸化波形蛋白抗体检测在类风湿关节炎中的意义

目的 评价抗突变型瓜氨酸化波形蛋白（MCV）抗体在类风湿关节炎（RA）诊断中的价值。方法 检测136例RA患者，80例其他结缔组织病患者以及19名正常对照血清中抗MCV抗体的分布，比较抗MCV抗体与类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体和抗角蛋白抗体（AKA）的相关性，并分析上述抗体在RA诊断中的意义。结果 136例RA患者抗MCV抗体敏感性和特异性分别为95．6％和80．8％．与非RA对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。抗MCV抗体与抗CCP抗体、AKA和RF的重叠阳性率分别为91．9％、52．8％和76．5％。经统计学分析，抗MCV抗体与抗CCP抗体、AKA和RF之间存在相关性。结论 抗MCV抗体对RA有较高的诊断价值，可视为RA新的血清学诊断指标．能提高RA的早期诊断率。     

Solitary fibrous tumor of the liver expressing CD34 and vimentin： A case report

A case of a successfully treated solitary fibrous tumor （SFT） of the liver is reported. An 82-year-old female presented with left upper abdominal discomfort, a firm mass on palpation, and imaging studies revealed a large tumor, 15 cm in diameter, arising from the left lobe of the liver. A formal left hepatectomy was performed. Microscopic evaluation showed spindle and fibroblast-like cells within the collagenous stroma. Immunohistochemistry disclosed diffuse CD34 and positive vimentin, supporting the diagnosis of a benign SFT. The patient remained well 21 months after surgery. SFT of the liver is a very rare neoplasm of mesenchymal origin. In most cases it is a benign lesion, although some may have malignant histological features and recur locally or metastasize. With less than 30 reported cases in the literature, little can be said regarding its natural history or the benefitsof adjuvant radiochemotherapy. Complete surgical resection remains the cornerstone of its treatment.     

异黏蛋白及波形蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其预后的关系

目的分析食管鳞状细胞癌(ESCC)患者异黏蛋白(MTDH)的表达水平,分析与上皮-间质转化(EMT)有关联的指标波形蛋白(Vimentin)的表达水平与ESCC预后的关系。方法采用组织芯片进行免疫组织化学染色,芯片中包含75对食管鳞癌癌组织标本,另含有与食管癌组织相对应的配对癌旁正常食管组织,以距离病灶3 cm为标准,另有30例食管癌组织为不成对的食管癌组织,所有食管癌组织和正常食管组织均来源于组织芯片。采用免疫组织化学SP法分别检测MTDH、Vimentin的表达情况,并且分析MTDH、Vimentin的表达与ESCC临床病理的关系,采用Kaplan-Meier法对MTDH与Vimentin不同表达水平的患者术后生存率的差异进行比较。用Spearman相关性分析MTDH与Vimentin表达水平之间的关系。结果在食管癌细胞中,MTDH的表达明显增多,正常食管上皮细胞中也有少量表达。阳性细胞大部分在胞质表达,在细胞核也有少量的表达,MTDH的阳性表达主要呈浅黄、棕黄色或褐色颗粒。经统计学分析后,MTDH在食管癌组织中的阳性表达率要明显高于配对癌旁正常食管上皮组织中的阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05)。MTDH的表达与临床病理参数关系显示,MTDH在食管癌中的表达与N分期(P=0.016)有关,具体体现在N 1~N 3分期MTDH阳性表达率明显高于N 0分期的患者。Vimentin在食管癌细胞中的表达较多,同时也可表达于少量正常食管上皮细胞,阳性细胞主要为胞质表达,呈褐色、棕黄色或浅黄颗粒。Vimentin在食管癌组织中的表达要明显高于配对癌旁正常食管组织,差异有统计学意义(P<0.05)。另外通过统计Vimentin与食管癌病理特征的关系显示,Vimentin在食管癌组织中的表达与T分期(P=0.019)及肿瘤的体积(P=0.040)有关。Kaplan-Meier法分析显示,MTDH高表达的患者生存时间越短,差异有统计学意义(P<0.05),而高表达Vimentin患者和低表达Vimentin患者二者生存率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关性分析结果显示,MTDH与Vimentin在ESCC组织中表达水平呈正相关(r=0.218,P=0.019)。结论MTDH和Vimentin的表达增加可能与食管癌的发生、发展及肿瘤细胞浸润转移密切相关。MTDH对食管癌术后患者判断预后,可能有一定的作用。