波形蛋白在子痫前期蜕膜组织中的表达及其意义

目的:探讨波形蛋白在子痫前期蜕膜组织中的表达及意义。方法:采用荧光实时定量PCR(SYBR GREEN I assay)、Western blotting和免疫组织化学技术分别对晚发型重度子痫前期(A组)及早发型重度子痫前期(B组)和正常足月妊娠妇女(对照组,C组)各10例的波形蛋白mRNA及蛋白进行测定。结果:波形蛋白主要表达于蜕膜细胞的胞膜、胞浆及间质。荧光实时定量PCR,Western blotting和免疫组化表达等各方法验证结果显示:波形蛋白mRNA及蛋白在C组蜕膜组织中表达最高;B组中次之;A组中最低,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:波形蛋白表达下调可能参与子痫前期的病理过程,并且波形蛋白下调的程度同子痫前期发病的早晚有关。     

卵圆细胞对肝损伤的修复作用及机制探讨

目的研究卵圆细胞在肝损伤中的修复作用,并对其可能的作用机制进行初步探讨。方法清洁级SD大鼠50只随机分为正常对照组(20只)和模型组(30只),两组均于实验第5周取肝组织进行常规病理、透射电镜,免疫组化检测波形蛋白(vimentin)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达,半定量RT-PCR方法检测Notch1、RBP-Jκ、HES1mRNA表达。结果正常对照组大鼠肝组织学形态正常,偶见vimentin和PCNA阳性细胞,Notch1、RBP-Jκ、HES1mRNA低表达;模型组主要于汇管区发现大量卵圆细胞,电镜下可见卵圆细胞的特征性表现张力微丝和桥粒连接,免疫组化示vimentin和PCNA阳性细胞明显增加(P<0.01),Notch1、RBP-Jκ、HES1 mRNA表达显著上调(P<0.01)。结论卵圆细胞在肝损伤修复中可能发挥重要作用,其作用机制与Notch家族有关。     

联合注射外源性IFNγ和IGF-1治疗小鼠骨骼肌损伤

目的：观察局部联合注射外源性人胰岛素样生长因子-1（human insulin-like growth factor-1，hlGF-1）和人γ干扰素（human interferon γ，hIFNγ）对于小鼠急性钝挫伤骨骼肌修复过程中再生和纤维化的影响。方法：64只8周龄雄性C3H小鼠，制作右侧腓肠肌钝挫伤动物模型，随机分为4组，即A组（注射hIFNγ）、B组（注射hIGF-1）、C组（联合注射hIFNγ和hIGF-1）、D组（注射生理盐水）。挫伤后第10天，A、B、C、D组小鼠，腓肠肌损伤处分别注射不同药物进行干预。于干预前（伤后7d），和干预后4、18、32d，各组随机抽取4只小鼠进行损伤腓肠肌取材，以荧光定量PCR和免疫荧光化学染色方法检测不同时点Ⅱb型肌球蛋白重链（myosin heavy chain—Ⅱb，MHC—Ⅱb）及波形蛋白（Vimentin）的表达。结果：④干预后各时点，B、C组小鼠损伤骨骼肌局部MHC—Ⅱb表达较A、D组明显高；（爹干预后各时间点A、B、C组小鼠损伤骨骼肌局部Vimentin表达较D组低，其中以A组和B组更明显。结论：④骨骼肌急性损伤后，局部注射hIGF-1有明显促进骨骼肌纤维再生，和一定程度抑制纤维化的作用。②局部注射hIFN3,仅表现出抑制纤维化的作用，且比hlGF-1更加明显。⑧联合应用hlGF-1和hIFNγ，能够同时促进骨骼肌再生和抑制纤维化，有效地促进损伤骨骼肌的愈合。     

抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体在类风湿关节炎中的诊断价值

目的 通过与类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的比较,探讨抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体对类风湿关节炎(RA)的诊断价值,方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测177例RA患者、46例其他风湿性疾病患者及48名健康对照者血清中抗MCV水平,并同时测定血清中抗CCP抗体、RF水平.采用t检验和χ2检验.结果 抗MCV抗体在RA组、疾病对照组及健康对照组的抗体平均滴度依次为(523±376)、(96±55)、(34±18)U/ml;此外,通过ROC曲线计算曲线下面积来确定最佳阳性阈值(分别以20、40、60、80、100、120、140 U/ml),结果为0.521、0.706、0.769、0.791、0.816、0.826、0.822.其中以抗MCV抗体≥120 U/ml为阳性阈值临床诊断效能最大.所以本研究以抗MCV抗体≥120U/ml为阳性阈值,对RA诊断的敏感性为78.0%,特异性为87.2%,阳件预测值及阴性预测值分别为92.0%和67.8%;抗MCV抗体对RA诊断的特异性与抗CCP抗体相当,但敏感性高于抗CCP抗体;与RF相比较,抗MCV抗体的敏感性和特异性均高于前者.抗MCV抗体联合抗CCP抗体或RF或三者联合检测对诊断RA的特异性提高到95.7%;此外,67例抗CCP抗体阴性的RA患者中有32例抗MCV抗体阳性,占55.2%,59例RF阴性的RA患者中有31例抗MCV抗体阳性,占52.5%.结论 抗MCV抗体可以作为RA的临床诊断血清学指标之一,与抗CCP抗体、RF联合柃测可提高对RA诊断的特异性.     

胰腺癌细胞转染hSSTR2基因对下游波形蛋白表达的影响及其意义

目的 探讨生长抑素2型受体(Hsstr2)基因转染胰腺癌细胞对下游蛋白表达的影响及其意义.方法 利用腺病毒载体Ad.CMV.Hsstr2.GFP将Hsstr2全长Cdna导入胰腺癌细胞Panc-1;采用荧光差异双向凝胶电泳技术分离并筛选Hsstr2基因转染胰腺癌细胞前后差异表达蛋白;用反射式基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱鉴定差异蛋白.利用免疫印迹验证差异表达的波形蛋白;采用免疫组化检测波形蛋白在胰腺癌组织中的表达,并分析其临床意义.结果 有统计学意义的差异蛋白质点21个;选择1.3倍以上的差异点18个,经质谱鉴定得到13个蛋白质,包括翻译调节蛋白、代谢酶类、与细胞通讯信号传导相关蛋白、细胞结构蛋白、分子伴侣、具有GTPase活性的蛋白及动力蛋白等.波形蛋白在胰腺癌细胞转染Hsstr2基因后表达降低,免疫组化显示波形蛋白主要在低分化的胰腺癌细胞中高表达.结论 筛选的波形蛋白等差异蛋白可能成为新的胰腺癌敏感治疗靶点.波形蛋白也可能成为预测肿瘤恶性程度的一个指标.     

离心运动对大鼠骨骼肌细胞增殖和波形蛋白表达的时序性影响

背景：骨骼肌损伤后是通过肌卫星细胞的增殖形成新核来生长和修复的,但关于骨骼肌细胞增殖和波形蛋白表达的关系很少报道。 目的：探讨骨骼肌细胞增殖与波形蛋白表达的关系以及运动性骨骼肌微损伤后修复的机制。 设计、时间和地点：随机对照动物实验,于2007-12/2008-09在湖南师大运动人体科学实验中心完成。 材料：健康成年8周龄雄性SD大鼠50只,随机分成对照组和运动后即刻、运动后3 h、运动后24 h和运动后48 h组,每组10只大鼠。 方法：运动组大鼠进行重复3 d的力竭性离心运动,力竭模型采用跑台运动,速度为16 m/min,坡度为-16°,持续运动至力竭,对照组为正常大鼠,未做运动。 主要观察指标：运动组分别于运动后即刻,3,24,48 h取材,对照组一次性取材,免疫组织化学法检测各组大鼠肱三头肌内侧头不同恢复时相增殖细胞核抗原PCNA的表达和波形蛋白的表达。 结果：骨骼肌细胞增殖出现时序性变化,运动后即刻增殖指数显著大于对照组,运动后24 h达到峰值,运动后48 h增殖指数有所下降。骨骼肌细胞中波形蛋白表达出现时序性,而且其免疫反应分值的时序性与增殖指数出现一致性,但与增殖指数不具有相关性。 结论：3 d重复性力竭离心运动后骨骼肌细胞增殖和波形蛋白的表达出现时序性变化。波形蛋白的表达与肌细胞增殖具有一定的关系,但不是惟一的影响的因素。     

端脑腹侧的胆碱能前体细胞的胚胎来源

目的为探索胆碱能神经元的胚胎来源,验证放射状胶质细胞是否表达乙酰胆碱转移酶。方法通过对孕14天（E14）大鼠胚胎端脑冠状石蜡切片进行波形蛋白（放射状胶质细胞标志性蛋白,vimentin）和乙酰胆碱转移酶（胆碱能神经元的标志性蛋白ChAT）双重荧光免疫组织化学染色,并通过重叠同一视野内的荧光双染的图片来精确地体现放射状胶质细胞表达ChAT的位置。结果 E14大鼠端脑腹侧脑室区有部分组织呈vimentin/ChAT免疫化学双染阳性,这和资料中证实的胆碱能神经元E14天出现于第三脑室的腹背侧部的结论是一致的。结论 E14大鼠端脑内的放射状胶质细胞表达ChAT。表明放射状胶质细胞具有神经干细胞性质,它不断地进行不对称分裂,产生胆碱能表型的成神经细胞,即胆碱能前体细胞。     

血小板源性生长因子(PDGF)、血清反应因子(SRF)和波形蛋白在人脑胶质瘤中表达的临床意义

 目的 研究血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)、血清反应因子(serum response factor,SRF)和波形蛋白(vimentin)在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化染色法检测13例正常脑组织和70例人脑胶质瘤组织中PDGF-B、SRF和波形蛋白的表达并分析其临床意义。结果 PDGF B、SRF和波形蛋白在人脑胶质瘤组织中高表达,阳性表达率分别为67.14%、48.57%和81.43%,差异有统计学意义(P<0.05);三者在脑胶质瘤中的表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、肿瘤大小无关(P>0.05)。随着胶质瘤恶性程度增加,三者表达逐渐上调,其中PDGF B、波形蛋白在脑胶质瘤中的表达与肿瘤分级相关;相关性分析显示PDGF-B与SRF、波形蛋白在脑胶质瘤中的表达有相关性(P<0.05)。结论 PDGF B、SRF和波形蛋白在脑胶质瘤的发生、发展中可能起到重要的调节作用,与肿瘤恶性程度具有一定的相关性。     

类风湿关节炎六种指标联合检测的临床意义

目的评价分析抗瓜氨酸化波形蛋白(MCV)抗体、抗葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)抗体等六项指标在类风湿关节炎(RA)患者血清中的表达与疾病的相关性及应用价值。方法收集110例RA、26例SLE、23例强直性脊柱炎(OA)、20例干燥综合征(SS)患者和50名健康人血清标本,用ELISA检测血清中抗MCV、抗GPI和抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体水平,采用间接免疫荧光法检测抗角蛋白(AKA)抗体,采用散射比浊法检测类风湿因子(RF)和hs-CRP水平。结果 4种抗体在RA患者组中的阳性率显著高于非RA疾病组和健康对照组。除AKA抗体阳性率较低(41.8%)外,其余抗体在RA组中的阳性率差异无统计学意义。结论抗MCV和抗GPI抗体诊断RA的敏感度最高;抗CCP抗体的特异性最高,AKA抗体具有较高的特异性,但敏感度最低,联合检测可弥补单项抗体检测造成的漏诊。     

波形蛋白与DNA拓扑异构酶Ⅱ在病理性瘢痕中的表达及意义

目的:比较波形蛋白及DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)、β(TopoⅡβ)在病理性瘢痕、成熟瘢痕和正常皮肤中的表达情况,探讨它们与成纤维细胞生物学特征的关系及在瘢痕形成中的作用.方法:应用免疫组织化学检测病理性瘢痕、成熟瘢痕和正常皮肤各10例,了解其中波形蛋白、TopoⅡα、β的表达水平,测定光密度值,并分析其相关性.结果:波形蛋白在病理性瘢痕和成熟瘢痕真皮层大量表达;TopoⅡα蛋白在病理性瘢痕表皮基底层表达明显低于正常皮肤和成熟瘢痕,但是在真皮层血管周围有阳性表达;TopoⅡβ蛋白在病理性瘢痕表皮层表达明显低于正常皮肤和成熟瘢痕,但是在真皮层胶原纤维增生区域大量表达.各组光密度值差异有统计学意义.结论:TopoⅡα、β在病理性瘢痕真皮层表达增强,与波形蛋白的表达一致,提示其可能与病理性瘢痕的形成有关.