IL2、IL12、IL15的不同组合对人外周血源NK细胞功能的影响

本研究旨在探讨细胞因子IL2,IL12,IL15的不同组合对体外扩增的人外周血来源的NK细胞功能的影响。IL2、IL12和IL15等细胞因子的不同组合培养的人外周血NK细胞分为IL2组、IL2＋IL12组、IL2＋IL15组、IL2＋IL15＋IL12组;无细胞因子培养的NK细胞组为对照组。用细胞计数盒分别测定不同效靶比下NK细胞对靶细胞（K562）的杀伤作用;用ELISA方法检测培养液上清中IFN-γ的分泌水平;用建立竞争性RT—PCR方法定量检测穿孔蛋白、颗粒酶BmRNA的表达水平。结果显示,各组培养的NK细胞对K562细胞的杀伤率增强,在不同效靶比下IL2＋IL15和IL2＋IL15-4-IL12组NK细胞对K562细胞的杀伤率显著高于其他组,但此两组间无显著性差异（P〉0．05）;各细胞因子组培养液中分泌IFN-γ水平均显著高于未加细胞因子的空白对照组（P〈0．01）,在不同细胞因子条件下,IFN-γ分泌水平依次为IL2＋IL12＋IL15组〉IL2＋IL12组〉IL2＋IL15组〉IL2组（P〈0．01）;各培养组的NK细胞穿孔蛋白及颗粒酶B基因的表达量均较对照组明显增加（P〈0．01）,且IL2＋IL15组和IL2＋IL12＋IL15组上述两种基因的表达量均显著高于其他组（P〈0．01）,但组间差别较小,与NK细胞杀伤实验的结果相一致。结论：不同细胞因子组合诱导的外周血NK细胞功能有差异。IL2和IL15在增强NK细胞杀伤功能及促进其扩增作用方面有协同作用,IL12主要刺激NK细胞分泌细胞因子（如IFN-γ）,增强其免疫调节功能。     

北京市西城区社区围孕人员孕前保健调查

目的 了解社区围孕人群生活方式、孕前保健知识的需求.方法 针对参加西城区免费孕前保健的291人进行健康体检,同时建立孕前档案,并进行问卷调查.结果 疾病检出率的前3位:内外科疾病72.16%,生殖道系统疾病 22.68%,遗传性疾病3.78%.病史中采集不良生活方式14种,位于前3位:长期使用电脑占90.38%,运动少占67.01%,饮食结构不合理占36.77%.在风疹的检测中,82.89%具有免疫能力,13.16%为易感人群,3.95%为急性原发感染或正在重复感染.结论 应提高围孕夫妇的整体健康水平,开展孕前保健,降低导致出生缺陷发生的危险因素.     

糖尿病几个实用数据公式的意义

在糖尿病专业工作中,常常需要用到一些专业数据公式来对某些问题进行深入的研究,如科研论文、流行病学调查、实验疗效对比等等.为此,我们选择了几个实用性很强的公式供临床工作者在实践中应用,以供参考.     

PAD和VAD治疗多发性骨髓瘤的副作用评价

本研究评价PAD（硼替佐米、阿霉素、地基米松）和VAD（长春新碱、阿霉素、地基米松）两种方案治疗多发性骨髓瘤的副作用。有27和30例多发性骨髓瘤患者分别入组PAD和VAD治疗组,各组分别采用PAD和VAD方案治疗3—5疗程。观察两组患者治疗副作用的类型、程度及发生时间。结果表明：在治疗过程中,皮疹是PAD组中特有的现象。两组患者共同的不良反应类型包括白细胞和血小板减少、周围神经病变、感染、疲乏、恶心、便秘、皮质激素相关副作用（血压增高、血糖增高、低钾血症、低钠血症、痤疮）等,两组患者在治疗过程中均未发生血栓形成。虽然统计学分析显示,仅血小板减少在两组中差异有显著性意义,但从发生率上看,PAD组患者在白细胞减少、周围神经病变以及疱疹病毒感染的发生率方面高于VAD组。从副反应发生的时间上看,皮疹、便秘、周围神经病变和皮质激素的副作用在第1疗程治疗中即可发生,而其他不良反应多数在3个疗程治疗后出现。终止治疗的主要原因包括感染和不能耐受的周围神经病变。对后者而言,虽然两组均有发生,但只有PAD组的2例患者在3个疗程后中止治疗。结论：PAD在提高疗效的同时,副反应发生率可能更高。并有可能因此而中断或延期治疗,因此在治疗中应给予高度重视,积极预防。     

人C1酯酶抑制剂初步纯化过程pH值和聚乙二醇含量的优化#br#

目的 探讨pH值、聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）含量和离心条件对PEG4000粉末用于去除人C1酯酶抑制剂（C1 esterase inhibitor，C1-INH）制备原料中的IgM效果的影响，并通过对羧甲基（carboxymethyl，CM）离子交换层析中洗脱盐离子浓度的筛选，分离活性与非活性C1-INH。方法 向不同pH值的C1-INH制备原料中加入不同质量分数的PEG4000，于不同条件下离心后，用特定蛋白检测仪对离心后上清液中IgM和C1-INH含量进行检测，确定PEG沉淀法纯化C1-INH的最佳条件。将离心后上清液调节pH后作为CM离子交换层析上样样品，使用不同盐离子浓度的洗脱液对活性C1-INH进行分离，确定最佳的盐离子浓度。结果 在弱酸性pH（6.8）下，当PEG4000质量分数为12%，离心条件15 000×g、25 ℃、20 min时，IgM去除率>99%，且C1-INH的回收率>80%；在盐离子浓度为200 mmol/L时，产物中C1-INH的比活性最大（4.43 IU/mg），且绝大多数杂质蛋白得以去除。结论  优化条件下PEG4000能有效去除C1-INH制备原料中的IgM，且能保持较高的C1-INH回收率；CM离子交换层析能对活性与非活性C1-INH进行有效分离，并去除大多数杂质蛋白。     

2型糖尿病胰岛β细胞早时相分泌临床意义

选择糖尿病人94例。入选条件1．无心肾功能不全者；2．口服降糖药尚未使用胰岛素者。患者采用馒头餐作糖耐量及胰岛素C肽释放试验，同时测HBA1c，然后将结果进行相关检验。结果：2型糖尿病β细胞早期（1h）时相分泌胰岛素与餐后高血糖及HBA1c密切负相关，按HBA1c7．5分组的对照检验进一步证实其相关性。结论：2型糖尿病人胰岛β细胞的早期时相分泌1小时的切点值与餐后高血糖、HBA1c密切负相关，提示2型糖尿病的治疗以改善早期时相分泌为主要目标。     

CD16+56在急性髓系白血病中的表达及其意义

为探讨CD16 56抗原在急性髓系白血病(AML)中的表达及其临床意义,本文用流式细胞仪检测42例AML患者的骨髓细胞,分析其细胞形态学(FAB)分型、免疫表型和临床特点。结果显示:42例AML患者中CD16 56阳性7例(16.6%),1例部分表达(2.4%),34例没有表达(80.9%)。CD16 56阳性的AML患者中,FAB分型、免疫表型和临床表现各有特点,多见于M2、M5,髓外浸润常见,大多数预后不良。     

重组人白介素11联合粒细胞集落刺激因子动员的自体外周血造血干细胞移植

本研究旨在探索重组人白介素11（rhIL—11）联合重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）动员外周血造血干细胞进行自体外周血干细胞移植的作用。16例预行自体外周血干细胞移植的非霍奇金淋巴瘤及急性髓系白血病患者随机分为实验组（rhIL-11联合rhG—CSF动员）及对照组（rhG—CSF动员），两组均在动员性化疗后血象下降至最低值有回升迹象时应用rhIL—11及rhG—CSF；rhG—CSF5μg/（kg·d）动员中位时间5．5天，rhIL—1150μg/（kg·d）动员中位时间4天；动员后观察外周血白细胞和血小板计数，以及干细胞采集物单个核细胞、CD34^＋细胞、CFU—GM集落数的变化；按常规进行自体外周血干细胞移植后，观察粒细胞及血小板植活时间及单采血小板输注量。结果显示：实验组及对照组动员后外周血白细胞和血小板计数，以及干细胞采集物单个核细胞、CD54^＋细胞及CFU—GM集落数无显著性差异（P〉0．05）。自体外周血干细胞移植后，实验组中性粒细胞数≥0.5×10^9／L的中位时间为10．5天，对照组中为13天．实验组比对照组提前2.5天（P〈0．05）。实验组血小板数≥20×10^9／L的中位时间为11.5天，对照组为13天，实验组比对照组提前1.5天（p〈0．05）。实验组输注单采血小板中住数为3.5单位，对照组为5单位，实验组比对照组减少1．5单位（P〈0．05）。实验组使用动员剂的不良反应主要有低热、乏力、感冒样症状、食欲不振、头晕、肌肉酸痛等，对照组仅出现低热，患者对以上症状均可以耐受，停药后症状自行消失。结论：rhIL—11联合rhG—CSF动员外周血造血干细胞安全有效，在自体外周血干细胞移植后造血重建较快，单采血小板输注量少。     

多参数流式细胞术分析急性白血病免疫表型

为了探讨急性白血病免疫表型特征,利用流式细胞术三色荧光直接标记技术CD45/SSC多参数散点图设门方法,对162例急性白血病患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析.结果提示:急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者主要表达CD117(94.9%)、CD13(88.5%)和CD33(70.5%);急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中B-ALL主要表达cCD79a(100%)、CD19(92.1%),T-ALL表达cCD3(100%)、CD2(83.3%);ANLL伴淋系抗原表达(Ly ANLL),以CD7(56.2%)、CD19(31.2%)多见;ALL伴髓系抗原表达(My ALL),以CD13(88.9%)、CD33(27.8%)多见.为此用多参数流式细胞术三色荧光直接标记法进行免疫分型,对急性白血病的确诊、治疗和预后有重要的临床意义.     

细胞因子联合高效扩增高纯度人外周血来源NK细胞并观察其细胞功能的变化

目的 探索从人外周血中分选及扩增高纯度NK细胞的方法,并初步了解扩增后的NK细胞功能的变化.方法 采用免疫磁珠分选系统(miniMACS)阴性分选法,从外周血单个核细胞(PBMNC)中获得纯化的NK细胞,在干细胞培养基条件下,通过IL-2、IL-12和IL-15等细胞因子的不同组合,分别培养15 d,每3 d半量换液并补充细胞因子;检测分选及扩增前后NK细胞CD3-CD56+细胞含量、扩增倍数及扩增前后各组NK细胞穿孔素、颗粒酶B mRNA的表达水平及IFN-γ的分泌水平.结果 经miniMACS阴性免疫磁珠分选后CD3-CD56+细胞含量由分选前的(11.2±5.2)%提高到(94.2±3.5)%.培养15 d后除对照组CD3-CD56+细胞纯度略下降外,其余组与扩增前无明显差异(P0.05).在IL-2、IL-2+IL-12、IL-2+IL-15、IL-2+IL-15+IL-12培养体系中,NK细胞扩增倍数分别为15.4±1.1,19.9±3.9,50.5±4.3和52.4±6.7,均显著高于对照组(6.1±1.0)(P<0.01),但IL-2+IL-15与IL-2+IL-15+IL-12组间比较,差异无统计学意义(P0.05).各组培养的NK细胞穿孔素、颗粒酶B基因的表达量均较扩增前明显增加(P<0.01),IL-2+IL-15组、IL-2+IL-12+IL-15组两种基因的表达量均显著高于其他组(P<0.01),但两组间比较差异无统计学意义(P0.05);各细胞因子组培养液中IFN-γ分泌水平均显著高于未加细胞因子的空白对照组(P<0.01),IFN-γ分泌水平IL-2+IL-12+IL-15组IL-2+IL-12组IL-2+IL-15组IL-2组(P<0.01).结论 经miniMACS免疫磁珠阴性分选法获得少量NK细胞后,应用IL-2+IL-15细胞因子联合培养是获得纯度高、细胞毒活性强、扩增效率高的NK细胞的简单有效方法.