水通道蛋白-1在小梁切除术之切除组织中的表达

目的观察青光跟患者小梁和虹膜组织与正常跟组织水通道蛋白-1（AQP-1）的表达差异。方法收集开角型和闭角型青光跟小梁切除术时切除的小梁和虹膜组织，免疫组织化学法检测AQP-1的表达，并与正常跟相应组织对照。结果正常眼小梁网组织、Schlemm’s管内皮细胞、周边虹膜组织中上皮和基质组织可见AQP-1呈强阳性着色，开角型青光眼和闭角型青光眼组织标本小梁网AQP-1阳性染色较正常弱；部分急性闭角型青光眼患者周边虹膜组织标本上皮层较基质组织染色明显弱。结论开角型青光眼小梁网AQP-1的表达减少可能与小梁网的发育有关，闭角型青光眼虹膜上皮和小梁网AQP-1的表达减少可能与虹膜萎缩或高眼压有关。     

β-肌动蛋白作为糖皮质激素作用后晶状体上皮细胞定量mRNA表达的内部参照标准

目的观察糖皮质激素作用体外培养的晶状体上皮细胞时,看家基因β肌动蛋白(βactin)mRNA表达的稳定性,建立该细胞定量mRNA研究的内部参照标准。方法采用含0、1×10-8、5×10-8、10×10-8、50×10-8mol/L不同浓度的地塞米松培养液体外培养晶状体上皮细胞,RTPCR测定β肌动蛋白(βactin)mRNA,并进行半定量灰度分析。结果各组均有明显表达,对照组晶状体上皮细胞β肌动蛋白表达(平均灰度值)为52.99±6.66,1×10-8、5×10-8、10×10-8、50×10-8mol/L地塞米松处理组分别为51.65±4.24、48.85±5.42、50.46±4.89和49.52±3.91,统计学分析各组间平均灰度值差异无显著性。结论体外培养的晶状体上皮细胞经0、1×10-8、5×10-8、10×10-8、50×10-8mol/L地塞米松作用后βactinmRNA表达稳定,是研究糖皮质激素作用于该细胞时可靠的内部参照标准。     

Ahmed青光眼阀盘周纤维包裹二次手术后的临床分析

目的分析Ahmed青光眼阀盘周纤维包裹二次手术切除后的效果和并发症。方法回顾分析在我院行全视网膜冷凝后Ahmed青光眼阀植入后因Ahmed阀的盘和引流管周围形成包裹、眼压超过30 mmHg导致手术失败的患者共11例,进行二次纤维包裹切除后,分析其眼压、视力的变化和发生并发症的原因。结果11例患者术后进行1~12月的随访,远期成功率为72.7%。术前和术后眼压平均为(40.72±9.05)mmHg和(17.36±8.09)mmHg,术后较术前显著下降(t=6.38,P<0.001)。主要并发症为Ahmed阀盘和引流管的暴露。结论二次选择性的瘢痕切除辅以抗增殖药物的应用,能够进一步提高Ahmed青光眼阀植入术的成功率。     

810 nm激光经巩膜睫状体光凝治疗难治性青光眼的效果

 目的 观察810 nm激光经巩膜睫状体光凝术(trans-scleral cyclophotocoagulation, TSCP)治疗难治性青光眼的效果。方法 回顾性分析2014-04至2016-06保定市第一中心医院收治的78例(78眼)接受810 nm激光TSCP治疗的难治性青光眼患者的临床资料,记录患者术后视力、眼压的变化,观察患者术后眼部疼痛程度,统计治疗相关并发症发生情况。结果 (1)治疗成功73例,成功率为93.59%。(2)术后1 d,患者视力降低13例,术后1周降低11例,术后1、3、6个月患者视力趋向稳定,术后6个月患者视力不变所占比例高达74.36%。视力提升12例,占15.38%;视力降低8例,占10.26%。(3)术后1 d、1周、1个月、3个月、6个月患者眼压均明显降低,与术前比较差异有统计学意义(P<0.05),术后1、3、6个月患者眼压趋向稳定,均低于术后1 d(P<0.05)。(4)术后不同时间所有患者VAS评分均降低,术后1~6个月趋向稳定,明显低于术后1 d及术后1周(P<0.05)。(5)患者术中并发症以眼部疼痛为主,术后早期以前房轻度炎性反应为主,术后晚期并发症发生率较低,以白内障、眼球萎缩、色素膜炎为主。结论 810 nm激光TSCP可降低难治性青光眼患者眼压,减轻眼部疼痛程度,且术后并发症发生率低,安全性高。     

姜黄素对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜组织结构及IL-23和IL-17表达的影响

目的:通过建立视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)模型,观察姜黄素对Sprague-Dawley(SD)大鼠视网膜组织结构及白细胞介素-23(interleukin-23,IL-23)和白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)表达的影响.方法:采用随机数字法将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(normal control group,NCG)、模型组(model group,MG)、姜黄素低剂量组(low-dose curcumin group,LDCG)和姜黄素高剂量组(high-dose curcumin group,HDCG),每组15只.MG、LDCG、HDCG组SD大鼠右眼均采用前房灌注生理盐水升高眼压法建立RIRI模型.LDCG、HDCG组均于建模前30min和建模后每24h定时分别以20、100mg/kg的剂量腹腔注射姜黄素溶液.建模后72h作视网膜石蜡切片,采用HE染色观察各组视网膜组织结构及炎症细胞浸润程度.同时,提取视网膜分别作Western-blot、ELISA法检测和分析各组视网膜IL-23和IL-17的表达水平及变化情况.结果:光学显微镜观察发现NCG组视网膜结构正常,层次清楚,细胞排列均匀整齐,视网膜厚度正常,无炎症细胞浸润.MG、LDCG组视网膜组织水肿,各层排列紊乱,可见细胞空泡、核浓缩和炎症细胞浸润等病理改变.HDCG组视网膜组织结构与NCG组相似,视网膜组织结构完整,炎症反应相对较轻.Western-blot、ELISA法检测和分析均显示IL-23、IL-17在MG组的表达明显增强,与NCG组相比差异均具有显著统计学意义(P<0.01),但LDCG、HDCG组中IL-23、IL-17的表达较MG组明显降低,差异均有显著统计学意义(P<0.01).结论:姜黄素可以减轻视网膜的炎症反应,保护视网膜组织结构;抑制视网膜IL-23、IL-17的表达,且呈剂量依赖性,这为姜黄素在亚急性期治疗RIRI提供了新的理论依据.     

脑灌注压与环池变化在急性颅脑损伤病人术前评估中的临床意义

目的 探讨急性颅脑损伤患者脑灌注压(CPP)、CT影像中环池变化与病情变化及预后之间的关系.以量化术前评估指标,选择最佳救治时机,指导临床手术时机的选择及用药,提高颅脑损伤患者的救治成功率.方法 回顾性分析我院2011年3月—2012年2月间收治的153例急性颅脑损伤患者的CPP值、CT环池值及格拉斯哥预后评分(GCS)数值.以CPP下降至70 mmHg前、50～70 mmHg及低于50 mmHg的指标分3组,每组均为51例.随访3个月以上,比较3组的疗效.结果 CPP＞70 mmHg的A组患者,手术时间为CT环池值0.4 mm时,预后良好28例(54.9％);CPP 50～70 mmHg的B组患者,手术时间为CT环池值0.7 mm时,预后良好40例(78.4％);CPP＜50 mmHg的C组患者,手术时间为CT环池值2.2 mm时,预后良好45例(88.2％).环池前后径和GCS评分呈正相关性(r=0.564,p＜0.01).结论 针对意识障碍加重的病例,环池形态改变越明显,GCS评分越低.依据颅脑损伤患者的CPP及CT环池值双因素的变化情况来进行评估,可以选择恰当的手术时机,制定合理的治疗方案.     

CT引导下臭氧治疗椎间盘突出的临床应用

目的 探讨臭氧治疗术在椎间盘突出症中的疗效作用。方法 选择40例临床有明确腰背痛及坐骨神经性疼痛,经CT确诊为椎间盘突出患者,其中椎间盘膨出7例、突出29例、脱出4例,行CT引导下经皮穿刺椎间盘臭氧治疗术,盘内注入臭氧量10 ml,椎旁间隙注入10 ml。结果 40例患者,35术后立即症状缓解、疼痛减轻。术后1周40例患者均有疗效,随访一个月、3个月、6个月,有效率均上升。治疗后1周3个月疗效达到优和良的比例存在统计学显著性差异,3~6个月后疗效优良的比例无明显差异。结论 CT引导下经皮椎间盘臭氧治疗术是治疗椎间盘突出症的有效方法,方法简便、准确、安全、无并发症;在临床治疗中值得广泛推广应用。     

探讨核心蛋白多糖体外抑制兔晶状体上皮细胞的转分化

目的:探讨核心蛋白多糖(decorin)对体外培养的兔晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)分泌转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)和表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响。方法:体外原代培养兔LEC,当细胞接近融合时转板培养,分别设置对照组和实验组,对照组为不用药培养12d;实验组为培养6d后加入不同浓度的decorin(10,1.0,0.1mg/L3个浓度组)继续培养6d,用ELISA法检测各组培养液上清中TGF-β1的水平,免疫细胞化学和计算机图像分析统计各组细胞中α-SMA的表达水平。结果:实验组TGF-β1水平和α-SMA水平均明显低于对照组的水平(117.9±18.1→427.2±41.3,111.7±26.7→427.2±41,236.0±28.6→427.2±41.3;15.7±8.7→97.2±26.9,16.2±9.5→97.2±26.9,54.9±29.6→97.2±26.9,P<0.01),decorin表现出明显的抑制作用;α-SMA的表达量随着TGF-β1水平的下降而下降,两者高度正相关(r=0.995,P<0.01)。结论:Decorin抑制活性TGF-β1的水平,下调α-SMA的表达。     

MCF-7细胞瞬时基因表达转染模式的建立

目的　建立一种高效、简便、低毒、价廉的瞬时基因表达细胞转染模式。　方法　选择人乳腺癌细胞 系MCF 7,采用Polyethylenimine(PEI)作为转染剂,对细胞密度、载体DNA量、PEI氮与DNA磷的比率(PEI N∶DNA P) 以及PEI DNA混合物与细胞共存的无血清培养时间等对转染效率的影响进行了比较分析。　结果　转染时的24 孔板每孔接种的细胞以2×105为宜,PEI N∶DNA P的最优比率不是固定的,它与转染时DNA的量有关,每孔转染1 μgDNA时其最优PEI N∶DNA P比率为33∶1左右,而每孔转染4μgDNA时其最优PEI N∶DNA P比率为9∶1左右。 另外,PEI DNA混合物与细胞共存的无血清培养时间至少需要3h,最佳时间为5～7h。　结论　利用转染剂PEI, 控制合适的细胞密度、DNA质量、PEI N∶DNA P比率和无血清培养的时间,可成为一种高效、简便、低毒、价廉的瞬时 基因表达的细胞转染模式。