还脑益聪胶囊治疗老年轻度认知损害的双盲随机对照研究

目的：观察还脑益聪胶囊治疗老年轻度认知损害（mildcognitiveimpairment，MCI）的疗效并探讨其作用机制。方法：对各组试验药进行盲法要求包装，采用随机、双盲、阳性平行对照法共观察90例老年MCI患者，并选45例老年健康者进行治疗前对照分析相关指标。治疗组45例（剔除1例）用药为还脑益聪胶囊（每次3粒，3次／d），同时加服三乐喜模拟药（每次2粒，3次／d）；对照组45例（剔除2例）用药为三乐喜胶囊（每次2粒，3次／d），同时加服还脑益聪胶囊模拟药（每次3粒，3次／d），温开水送服。两组疗程均为16周。于治疗前后进行临床记忆、中医症状、脑血流、自由基、炎性介质及脂代谢变化等情况的分析。结果：老年MCI患者临床记忆量表各项指标积分与老年健康对照组比较明显降低（P〈0．01），血清乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AchE）、白细胞介素-1a（interleukin-1a，IL-1a）和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）含量较健康对照组明显增高（P〈0．01，P〈0．05），而超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）的活性明显降低（P〈0．05）。除指向记忆-项外，还脑益聪胶囊治疗组老年MCI患者治疗后的临床记忆量表积分值均较对照组明显提高（P〈0．01），中医临床症状明显改善，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；还脑益聪胶囊对患者大脑前、后动脉的平均血量参数均有明显提高作用（P〈0．01，P〈0．05），并且显著改善脑动脉的阻力指数（P〈0．01）；还脑益聪胶囊还能显著升高老年MCI患者血清SOD活性，同时降低Ache、IL-1α及IL-6的血清含量（P〈0．01，P〈0．05）；还脑益聪胶囊对患者血脂的改善作用与三乐喜比较差异均有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）。结论：还脑益聪胶囊治疗老年轻度认知损害有较好疗效，效果优于阳性对照药?     

华佗再造浸膏对大鼠局灶性脑缺血/再灌注血脑屏障损伤的保护作用及机制研究

目的:观察华佗再造浸膏(Huatuo Zaizao extractum,HTZZ)对栓线法阻断大脑中动脉(middle cerebral artery occlusion,MCAO)致大鼠局灶性脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)损伤的保护作用及其机制.方法:健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为假手术组,MCAO模型组,达纳康组(20 mg·kg-1),HTZZ 高、中、低剂量组(5,2.5,1.25g·kg-1),每组10只,十二指肠单次给药.采用栓线法阻断大脑中动脉,建立大鼠局灶性I/R模型..缺血90min,再灌注24h后,HE染色观察缺血侧病理损伤,透射电镜观察血脑屏障结构,蛋白免疫印记法检测G蛋白偶联受体激酶2(C protein-coupled receptor kinases 2,GRK2),基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases,MMP-2)和MMP-9表达.结果:90min MCAO/24h再灌注半暗带皮层脑微血管呈现水肿、线粒体损伤、空泡化、膜损伤和微绒毛减少等.伴随这一变化,损伤侧皮层半暗带脑组织GRK2亚细胞分布从胞浆向胞膜转移,MMP-2和MMP-9表达升高.HTZZ可有效恢复脑缺血再灌注造成的脑微血管内皮水肿和血脑屏障超微结构损伤,减少功能性(膜偶联)GRK2表达,并抑制MMP-2和MMP-9表达.结论:细胞膜偶联GRK2可能是华佗再造丸的有效作用靶点.     

三七皂苷R1脑、血液微透析探针的体内外回收率分析

目的:建立三七皂苷R1脑、血液微透析探针的体内外回收率的测定方法,考察流速、药物质量浓度、探针使用次数对回收率的影响,并进行探针回收率体内稳定性研究,为三七皂苷R1的后续研究提供依据。方法:采用正透析法和反透析法进行三七皂苷R1脑、血液微透析探针体内、体外回收率的研究,采用LC-MS/MS测定微透析液中三七皂苷R1的质量浓度,计算探针回收率。结果:在流速为1.5μL·min~(-1)时,三七皂苷R1脑、血液探针体内回收率在10 h内保持稳定,平均回收率分别为14.0%和33.2%;恒定质量浓度下,探针体内外回收率均随着流速(0.5,1.0,1.5,2.0,3.0μL·min~(-1))的增加而减小,脑、血液探针的体外正透析法测得的回收率分别为(36.0±1.7)%,(23.5±1.6)%,(14.2±0.5)%,(8.0±0.7)%,(5.4±0.5)%和(61.6±2.6)%,(48.0±4.1)%,(33.0±2.8)%,(24.1±1.2)%,(18.9±1.1)%,正、反透析法所测得的探针体外回收率一致,且体内和体外回收率结果也一致;恒定流速下,三七皂苷R1质量浓度(50,200,500,1 000μg·L-1)对脑、血探针回收率均无影响;使用≤3次的探针,经过恢复处理后,仍能够保持较高的回收率。结论:反透析法测定的体外回收率与体内回收率一致,且与正透析法测定的体外回收率一致,说明反透析法能够作为研究三七皂苷R1回收率的测定方法;探针体内回收率在10 h内保持稳定,说明微透析技术能够用于三七皂苷R1脑细胞间液药代动力学、血液药代动力学的同步研究。     

痰瘀同治方对痰瘀互结证冠心病小型猪心功能的改善作用

目的：观察痰瘀同治方对痰瘀互结证冠心病小型猪心功能的影响。 方法：将36只中国小型猪随机分为正常对照组、模型组、丹蒌片组和痰瘀同治方高、中、低剂量组（生药2.0,1.0,0.5 g·kg^-1）,每组6只;除对照组外,其他各组均给予高脂饲料喂养2周后,采用介入技术球囊损伤冠状动脉左前降支内皮,术后继续高脂饲料喂养8周,制备小型猪痰瘀互结证冠心病模型;术后给药8周,观察心肌缺血程度的变化,并采用超声心动图和无创血流动力学方法检测心脏功能和结构的改变。 结果：与对照组比较,模型组心肌缺血程度明显增加,无创血流动力学参数中CO,SV和LCW均明显降低,而SVR则明显增加（P<0.05或P<0.01）;超声心动图显示IVSd,LVPWs,EF和FS明显降低, LVIDs则明显增加（P<0.05或P<0.01）;与模型组比较,痰瘀同治方能够减少心肌缺血程度,增强心功能;改善缺血导致的心肌结构和功能改变（P<0.05或P<0.01）。 结论：痰瘀同治方对痰瘀互结证冠心病小型猪心功能具有明显的改善作用;采用临床心功能的检测方法能正确评价冠心病小型猪心肌缺血后心功能的改变,缩小临床与基础实验研究之间的差距。     

脑梗死气虚血瘀证大鼠模型表征及病理生理变化研究北大核心CSCD

观察多发性脑梗死气虚血瘀证大鼠模型表征及病理生理指标的变化。将大鼠随机分为4组（每组30只）：正常组、假手术组、模型组、益气活血方组。模型组和益气活血方组大鼠均采用水环境小平台法进行睡眠剥夺1周后行多发性脑梗死手术,术后继续睡眠剥夺4周;同时益气活血方组大鼠术后每天灌胃给药26g·kg^-1,连续4周。于术后48h,2周及4周每组随机选取lO只大鼠,检测反映大鼠表征及病理生理动态变化的指标。结果显示,正常组和假手术组大鼠一般状况良好,行为和脑组织形态结构正常,模型组大鼠毛发枯黄,精神萎靡,静卧懒动,便溏,行为出现障碍,脑组织形态结构出现明显的病理性改变,且随造模时间的延长情况愈加严重,益气活血方组大鼠一般状态、行为障碍及脑组织形态结构病变程度均较模型组明显减轻;模型组3个时间点体质量、负重力竭游泳时间、舌面图像色彩饱和度R,G,B值均减少,切变率5,60,150S^-1下的全血黏度均增加,脑皮层Na＋-K＋．ATP酶、Ca^2＋-ATP酶活性均降低,5-HT含量减少,血清TXB：含量增加,6-keto-PGFl。含量减少,与假手术组比较均有显著性差异（P〈0．05或P〈0．01）;益气活血方组大鼠术后2周、4周上述指标的变化较模型组有明显改善（P〈0．05或P〈0．01）。以上结果表明,多发性脑梗死气虚血瘀证大鼠表征及病理生理指标变化明显异常,益气活血方对其有明显改善作用,说明该模型具有较好的稳定性和可靠性,模型演化的病理生理机制及生物学基础可能与能量代谢障碍、血管活性物质异常及神经递质变化等有关。     

银杏蜜环口服溶液对多发性脑梗死大鼠模型的影响

目的:银杏蜜环口服溶液是由银杏叶和蜜环菌组合而成的上市药物,临床用于缺血性心脑血管疾病,本研究探讨该药对大鼠多发性脑梗死(Multiple Cerebral Infacrtion,MCI)模型的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组,模型组,金纳多组(18 mg/kg),银杏叶提取物组(9 mg/kg),天麻蜜环菌素片组(600 mg/kg),天麻蜜环菌粉组(300 mg/kg),银杏蜜环口服溶液组(618 mg/kg),银杏蜜环口服溶液组(309 mg/kg)。从大鼠颈总动脉向大脑中动脉方向注射荧光微球混悬血清,致使大脑动脉多发性阻塞,造成大鼠多发性脑梗死模型。灌胃给药28 d,末次给药后观察药物对大鼠神经功能评分、抓力、血清TNF-α、脑内氨基酸类神经递质及脑组织形态学的影响。结果:MCI模型大鼠神经功能有显著障碍,抓力显著降低,脑组织内谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)水平显著升高,血清TNF-α水平升高,与假手术组大鼠比较,差异有统计学意义(P0.05)。组织学检查显示,脑组织受损,有明显的梗死灶,神经细胞排列紊乱,炎性细胞浸润等病理改变,免疫组化显示CD34、GFAP有自修复的表达,Neu N低表达。给药28 d后,银杏蜜环口服溶液神经功能明显改善,抓力增加,脑内Glu和GABA显著降低,血清TNF-α水平显著下降,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05~0.01);病理结果显示,银杏蜜环口服溶液可保护脑缺血,改善由此导致的神经缺损程度;免疫组化结果显示,银杏蜜环口服溶液可明显促进血管内皮细胞、胶质细胞及神经元修复。银杏蜜环口服溶液对神经功能的改善和脑内Glu、GABA水平的降低作用显著优于银杏叶提取物;增加抓力作用显著优于天麻蜜环菌;降低血清TNF-α水平程度则同时优于两者。结论:银杏蜜环口服溶液有保护脑缺血,改善神经功能的作用,复方优于单一组份,且有一定的协同增效的作用。     

通咽喷雾剂对短暂性大脑中动脉栓塞模型大鼠吞咽功能的干预效应

目的 观察通咽喷雾剂(TYSpray)对短暂性大脑中动脉栓塞(tMCAO)模型大鼠吞咽功能的影响。方法 将大鼠随机分为Sham组、tMCAO组、tMCAO+TYSpray组。tMCAO组采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉,于90min后再灌注,以建立tMCAO大鼠模型。tMCAO+TYSpray组大鼠在造模后给予通咽喷雾剂口咽部喷雾用药,Sham组、模型组给予等量生理盐水。观察大鼠一般营养状况并记录死亡数;于7d、14d时,记录大鼠体重及进食水量;于14d时,观测大鼠吞咽潜伏期及吞咽次数。结果 tMCAO组大鼠除表现为吞咽潜伏期延长和吞咽次数减少等吞咽直接指标的异常,还表现为毛发干枯少泽、活动度减低、体型瘦弱、精神状态不佳、死亡率高、体重下降和体重增量/体重比值下降、进食量减少、进水量减少和进水量/体重比值下降等吞咽间接指标的异常。tMCAO+TYSpray组大鼠未见吞咽潜伏期延长和吞咽次数减少,而表现为吞咽次数明显增加,在进食量/体重比值方面虽与tMCAO组大鼠相比差异无统计学意义,但表现出一定的改善趋势,在14d时的进水量/体重比值与tMCAO组大鼠相比明显增加。结论 通咽喷雾剂可有效改善tMCAO组大鼠的吞咽功能,在改善进食水方面亦显示出较好的改善趋势。     

塞络通胶囊对局灶型脑缺血/再灌注大鼠线粒体动力学的影响

观察塞络通胶囊对局灶性脑缺血再灌注的保护作用机制。采用大鼠90 min中脑动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型。蛋白免疫印迹法检测线粒体分裂融合基因Drp1,Opa1表达。透射电镜观察线粒体超微结构变化。HE染色观察病理学形态变化,免疫组织化学法检测Drp1,Opa1表达。结果显示,塞络通胶囊(33,16.5 mg·kg^-1,ig)可抑制缺血侧皮层区线粒体分裂融合异常,抑制线粒体分裂基因Drp1表达,促进线粒体融合基因Opa1表达,最终减轻缺血再灌注带来的能量代谢紊乱。塞络通胶囊可抑制缺血周边区线粒体动力学异常、维持线粒体正常形态,说明维持线粒体动力学正常可能是中药塞络通胶囊促进缺血脑区自修复功能的作用机制。     

解毒通络胶囊对中风后抑郁大鼠模型益气解郁功效研究

目的：观察解毒通络胶囊对中风后抑郁大鼠行为学的影响,评价解毒通络胶囊益气解郁的功效。方法：大鼠麻醉后采用颈外动脉注射微球法制备多发性梗死模型,中长期饲养造成中风后抑郁模型,对各组大鼠进行旷场实验、悬尾实验、游泳实验不动时间测定、糖水偏好实验等行为学实验。结果：大鼠注射荧光微球后长期饲养形成中风后抑郁模型,与正常组相比,模型组大鼠进食量减少,体质量增加较缓,旷场实验所示的自发运动和探究活动减少,游泳不动时间、悬尾不动时间延长,糖水偏好程度下降。与模型组相比,解毒通络胶囊组及步长脑心通组大鼠体质量增幅较大,旷场实验所示的自发运动和探究活动增加,游泳不动时间和悬尾不动时间均缩短,糖水偏好程度增加,并接近假手术组。结论：解毒通络胶囊对中风后抑郁大鼠的抑郁样行为有显著改善作用。     

D-半乳糖合并半高脂饲料致认知功能障碍大鼠模型的建立及评价

目的 建立复合因素所致认知功能障碍大鼠模型,并从行为学、病理形态学、细胞凋亡、氧化损伤和炎症因子等角度进行评价.方法 选用雌性正常SD大鼠,采用皮下注射D-半乳糖及饲喂半高脂饲料,制备6 w及8 w不同时程的认知功能障碍动物模型.采用Morris水迷宫实验及物体识别实验检测各组大鼠学习记忆能力;采用HE染色及电镜观察海马组织病理形态;测定脑中丙二醛(MDA)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的含量;比较不同时程认知功能障碍模型大鼠之间及与正常大鼠的差异.结果 6 w末时,认知功能障碍模型大鼠在物体识别实验中,分辨指数较空白组明显下降(P＜0.05),但水迷宫实验成绩与空白组比较无明显差异;而8 w末时,模型动物在分辨指数下降(P＜0.01)的同时,水迷宫成绩亦明显下降,逃避潜伏期明显延长(P＜0.01),穿台次数明显减少(P＜0.05);8 w末与6 w末相比,水迷宫实验逃避潜伏期明显延长(P＜0.01);造模后,能引起海马神经细胞的退行性改变及早期凋亡现象,且存在着进行性加重的病理变化;6、8 w模型组大鼠脑组织的TNF-α、IL-6水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01),同时8 w大鼠IL-6水平高于6 w模型组(P＜0.05);6、8 w模型组ox-LDL、MDA水平均显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 以该方法复制的认知功能障碍大鼠模型,在一定程度上模拟了认知功能障碍发生、发展的多环节病理变化,可为认知功能障碍的治疗,特别是其早期干预打下基础.