还脑益聪方组分对β淀粉样前体蛋白转基因痴呆小鼠行为学及胆碱能系统的早期干预作用

目的：观察还脑益聪方复方组分早期干预对阿尔茨海默病（Alzhei mer disease,AD）模型β淀粉样前体蛋白（β-amyloid precursor protein,APP）转基因小鼠行为学及脑胆碱能系统的影响。方法：将60只3月龄APP695V717I转基因小鼠随机分为4组：模型组、大剂量还脑益聪方组[2.80g/（kg.d）]、小剂量还脑益聪方组[1.40g/（kg.d）]及盐酸多奈哌齐阳性对照组[0.65mg/（kg.d）],每组15只。15只遗传背景相同的非转基因C57BL/6J小鼠作为正常对照组。所试药物稀释至相同体积灌胃给药,正常组和模型组给以等体积蒸馏水灌胃,连续灌胃6个月。采用Morris水迷宫实验和避暗实验进行小鼠行为学测试,采用酶联免疫吸附测定法分别检测小鼠大脑皮层和海马组织的乙酰胆碱（acetylcholine,ACh）、乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,AChE）含量及胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase,ChAT）的活性,采用考马斯亮蓝法测定脑组织中蛋白的含量。结果：与正常对照组比较,模型组小鼠学习记忆成绩均显著下降（P〈0.05,P〈0.01）,海马和皮层组织的ACh含量和ChAT活性显著降低,AChE含量显著增加（P〈0.01,P〈0.05）。与模型组比较,盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方组小鼠的学习记忆能力均有明显提高（P〈0.05）;盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方大剂量组小鼠海马ACh含量明显提高（P〈0.05）,盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方组小鼠海马AChE含量显著降低,ChAT活性显著升高（P〈0.01,P〈0.05）;盐酸多奈哌齐组和还脑益聪方两组小鼠皮层ACh含量均明显提高（P〈0.05）,AChE含量有不同程度的降低,还脑益聪方两组小鼠皮层ChAT活性均明显提高（P〈0.05）。结论：还脑益聪方能明显改善APP转基因小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与调控小鼠海马与皮层胆碱能系统相关酶的含量有关。     

还脑益聪胶囊治疗老年轻度认知损害的双盲随机对照研究

目的：观察还脑益聪胶囊治疗老年轻度认知损害（mildcognitiveimpairment，MCI）的疗效并探讨其作用机制。方法：对各组试验药进行盲法要求包装，采用随机、双盲、阳性平行对照法共观察90例老年MCI患者，并选45例老年健康者进行治疗前对照分析相关指标。治疗组45例（剔除1例）用药为还脑益聪胶囊（每次3粒，3次／d），同时加服三乐喜模拟药（每次2粒，3次／d）；对照组45例（剔除2例）用药为三乐喜胶囊（每次2粒，3次／d），同时加服还脑益聪胶囊模拟药（每次3粒，3次／d），温开水送服。两组疗程均为16周。于治疗前后进行临床记忆、中医症状、脑血流、自由基、炎性介质及脂代谢变化等情况的分析。结果：老年MCI患者临床记忆量表各项指标积分与老年健康对照组比较明显降低（P〈0．01），血清乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AchE）、白细胞介素-1a（interleukin-1a，IL-1a）和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）含量较健康对照组明显增高（P〈0．01，P〈0．05），而超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）的活性明显降低（P〈0．05）。除指向记忆-项外，还脑益聪胶囊治疗组老年MCI患者治疗后的临床记忆量表积分值均较对照组明显提高（P〈0．01），中医临床症状明显改善，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；还脑益聪胶囊对患者大脑前、后动脉的平均血量参数均有明显提高作用（P〈0．01，P〈0．05），并且显著改善脑动脉的阻力指数（P〈0．01）；还脑益聪胶囊还能显著升高老年MCI患者血清SOD活性，同时降低Ache、IL-1α及IL-6的血清含量（P〈0．01，P〈0．05）；还脑益聪胶囊对患者血脂的改善作用与三乐喜比较差异均有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）。结论：还脑益聪胶囊治疗老年轻度认知损害有较好疗效，效果优于阳性对照药?     

还脑益聪方对早期认知功能障碍大鼠海马病理形态、炎症因子和氧化应激指标的影响

目的观察还脑益聪方对复合因素所致早期认知功能障碍大鼠行为学及海马病理形态、炎症因子和氧化应激指标的影响。方法采用皮下注射D-半乳糖及饲喂半高脂饲料的方法造成早期认知功能障碍大鼠模型,并以还脑益聪方灌胃治疗。采用Morris水迷宫试验观察大鼠行为学变化,HE染色及透射电镜观察海马病理形态学改变;应用放射免疫法检测大鼠海马匀浆白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,酶联免疫法(ELISA法)测定氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)含量,免疫比色法测定丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和谷胱甘肽S转移酶(GSH-ST)含量。结果还脑益聪方能增加模型大鼠水迷宫试验穿台次数(P0.01),减轻模型大鼠海马神经细胞损伤、线粒体病变及胶质细胞增生,降低海马匀浆TNF-α及ox-LDL含量(P0.05,P0.01)。结论还脑益聪方能提高早期认知功能障碍模型大鼠的空间学习记忆能力,这可能与其抑制脑内炎症反应与氧化应激,从而减轻海马组织病理变化有关。     

还脑益聪方提取物对APP转基因小鼠脑组织Aβ生成相关因子和学习记忆行为的影响

目的研究还脑益聪方提取物对β淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)转基因小鼠学习记忆能力以及脑组织海马CA1区(hippocampal-CA1 area,CA1)APP、淀粉样前体蛋白β位分解酶1(β-site APP-cleaving enzyme,BACE1)、早老素蛋白1(presenilin-1,PS-1)和β淀粉样蛋白(beta amyloid protein,Aβ)的影响,初步探讨还脑益聪方提取物治疗阿尔茨海默病(Alzheimer′sDisease,AD)的作用机制。方法选用3月龄APP695V717I转基因小鼠模型,按数字表法随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方提取物大剂量组和小剂量组,另设立正常对照组(C57BL/6J小鼠),每组15只。连续灌胃4个月后进行相关指标检测:采用Morris水迷宫观测APP转基因小鼠空间学习记忆行为,采用免疫组织化学法检测APP转基因小鼠海马CA1区APP、BACE1、PS-1和Aβ蛋白的表达水平。结果与正常对照组小鼠比较,7月龄APP转基因模型小鼠在Morris水迷宫实验中穿越原平台位置次数、原平台所在第四象限游泳时间和游泳路程均显著减少(P<0.01);与模型组比较,7月龄盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方提取物大、小剂量组小鼠在Morris水迷宫实验中穿越原平台位置次数、第四象限游泳时间和路程均显著增多(P<0.05)。与正常对照组小鼠比较,7月龄模型组小鼠海马CA1区神经元APP、BACE1、PS-1和Aβ阳性表达显著增强(P<0.01)。与模型组比较,7月龄各药物干预组小鼠APP、BACE1、PS-1和Aβ阳性表达显著减弱(P<0.01)。结论还脑益聪方提取物早期应用可明显改善APP转基因小鼠已下降的学习记忆能力,降低海马CA1区神经元APP、BACE1、PS-1和Aβ的表达,减少Aβ生成,延缓APP转基因小鼠大脑病理进程。     

老年单纯收缩期高血压诊治的若干问题探讨

单纯收缩期高血压是老年人高血压的一种常见类型,也是严重危害老年人健康的常见病、多发病。随着该病发病率的不断升高,有关其发病机制、临床特点、诊断及治疗等方面备受瞩目。基于辨证与辨病相结合的治疗模式具有协同降压、改善生活质量等优势,有着广阔的应用前景,值得深入推广、探索与发掘。     

D-半乳糖合并半高脂饲料致认知功能障碍大鼠模型的建立及评价

目的 建立复合因素所致认知功能障碍大鼠模型,并从行为学、病理形态学、细胞凋亡、氧化损伤和炎症因子等角度进行评价.方法 选用雌性正常SD大鼠,采用皮下注射D-半乳糖及饲喂半高脂饲料,制备6 w及8 w不同时程的认知功能障碍动物模型.采用Morris水迷宫实验及物体识别实验检测各组大鼠学习记忆能力;采用HE染色及电镜观察海马组织病理形态;测定脑中丙二醛(MDA)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的含量;比较不同时程认知功能障碍模型大鼠之间及与正常大鼠的差异.结果 6 w末时,认知功能障碍模型大鼠在物体识别实验中,分辨指数较空白组明显下降(P＜0.05),但水迷宫实验成绩与空白组比较无明显差异;而8 w末时,模型动物在分辨指数下降(P＜0.01)的同时,水迷宫成绩亦明显下降,逃避潜伏期明显延长(P＜0.01),穿台次数明显减少(P＜0.05);8 w末与6 w末相比,水迷宫实验逃避潜伏期明显延长(P＜0.01);造模后,能引起海马神经细胞的退行性改变及早期凋亡现象,且存在着进行性加重的病理变化;6、8 w模型组大鼠脑组织的TNF-α、IL-6水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01),同时8 w大鼠IL-6水平高于6 w模型组(P＜0.05);6、8 w模型组ox-LDL、MDA水平均显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 以该方法复制的认知功能障碍大鼠模型,在一定程度上模拟了认知功能障碍发生、发展的多环节病理变化,可为认知功能障碍的治疗,特别是其早期干预打下基础.     

还脑益聪方组分对APP转基因小鼠脑组织炎症因子和氧化应激的影响

目的: 研究中药复方-还脑益聪方(HNYCF)组分对阿尔茨海默病(AD)动物模型脑组织炎症因子和氧化应激相关指标的影响,探讨其治疗AD的作用机制。方法: 选用3月龄APP695V717I转基因小鼠AD模型,随机分成4组:模型组、盐酸多奈哌齐组、HNYCE组分大剂量组和HNYCF组分小剂量组。另设立正常对照组(相同遗传背景的C57BL/6J小鼠)。各组小鼠按相应处理连续灌胃6个月后进行相关指标检测。采用Morris水迷宫和跳台实验观测小鼠学习记忆能力,采用免疫组织化学法检测脑组织核因子κB(NF-κB) 和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达水平,放射免疫法测定脑组织皮层和海马白细胞介素-6 (IL-6)和高敏C-反应蛋白(hs-CRP)的含量,比色法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛(MDA)含量。结果: HNYCF小鼠在Morris水迷宫中穿越平台次数、第4象限游泳时间和路程均较模型组显著增多(P<0.05或P<0.01);HNYCF大剂量组小鼠在跳台实验中潜伏期较模型组显著延长(P<0.01);HNYCF小鼠脑组织NF-κB表达下调,PPARγ表达上调,IL-6含量减少,与模型组比较有显著差异(P<0.05或P<0.01);HNYCF小鼠血清SOD活性较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论: HNYCF可以改善APP转基因小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与抗炎、抗氧化作用有关。     

中药不合理用药的探讨

随着我国中医药事业的发展,其领域越来越广,中药品种繁多,来源复杂,性质差异大,如配伍不当,不合理用药,过量或长期应用不但起不到其应有的疗效,还会危害到身体的健康,下面就其危害健康的问题进行一些探讨。     

鸡胚原始生殖细胞定向诱导分化为脂肪和神经元样细胞

目的探索培养传代后鸡胚原始生殖细胞(EPGCs)的多向分化潜能,比较不同诱导程序、不同特异性化学诱导剂及其协同作用。方法分别获取发育至19期和28期的鸡胚PGCs,体外培养传代到第4代。采用不同诱导程序、不同组合的诱导剂地塞米松、胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)诱导EPGCs向脂肪细胞分化。采用不同诱导程序、不同组合的诱导剂维甲酸(RA)、丁化羟基苯甲醚(BHA)I、BMX、二甲基亚砜(DMSO)诱导EPGCs向神经元样细胞分化。结果1.EPGCs被诱导7~21d后,分化成脂肪细胞,其中诱导程序(2)(见正文中叙述)的诱导分化效果较好,第192、8期分化率分别为89%和91%。诱导剂联合协同作用的诱导效果极显著地(P<0.01)高于单独作用的诱导效果。诱导的脂肪细胞经特异性的油红O和苏丹红染色为阳性,并检测到特异性过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPAR-γ)的表达。2.EPGCs被诱导3~7d后,分化成神经元样细胞,RAI、BMX单独使用对神经元样细胞的形成率分别为82%和83%,极显著地(P<0.01)高于RA、BHA、DMSO和IBMX的协同作用的效果。诱导的神经元样细胞特异性免疫组织化学检测显示,均有神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经丝蛋白M(NFM)的表达,而无胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结论鸡EPGCs体外培养传代后仍具有多向分化潜能,在特异化学物质的诱导下,可被定向诱导分化为脂肪细胞、神经元样细胞。     

血清胱抑素C与血清肌酐、尿素氮在老年人肾功能评价中的对比

胱抑素C（Cystainc）是一种低分子量非糖化碱性蛋白质,所有的有核细胞都能稳定地产生,存在于人体的体液中：胱抑素C几乎完全被肾小球过滤,然后由肾小管重吸收,紧接着被降解,并且肾小管不分泌,也不通过肾小管排泄。胱抑素C不受炎症反应、性别、肌肉以及年龄变化的影响。在肾移植患者血清胱抑素C（SCys C）浓度作为移植肾功能测定指标的可行性和临床应用价值。临床对GFR的评价通常使用内源性血液物质,如UREA、SCR、Ccr等,尽管应用较广,但作为肾脏标志物,有许多不足。血清胱抑素C（SCys C）是新近发展起来的评价肾功能早期损害的一个灵敏标志物？优点是方法简便,血清浓度稳定,可随时进行检测。我国已步入了人口老龄化时代,如何提高老年人的生活质量,已经为政府部门及广大医务工作者所关注。由于老年人特有的生理特性及各种慢性疾病的影响,肾脏过滤功能也像机体的其他机能一样在逐渐减退。目前,临床通常以血清尿素氮和肌酐作为评价肾功能的实验室指标,但它们都有各自的弊端。近年来,随着检测技术的发展及检测自动化,血清胱抑素C（SCys C）用作评价肾功能的实验室指标,颇受人们关注。在这里,以参加我院健康体检的200例老年人为对象,测定其血清胱抑素C、肌酐和尿素氮的浓度,旨在探讨血清胱抑素C、肌酐和尿素氮在评价老年人肾功能方面的对比。