人参皂苷Re对大鼠心室肌细胞钠、钾离子通道的影响

目的：观察人参皂苷Re对大鼠心室肌细胞电压依赖性的钠、钾离子通道的影响,揭示其抗心律失常的作用机制。方法：采用酶分法获得单个大鼠心室肌细胞,在全细胞膜片钳技术模式下,记录电压依赖性钠通道、瞬时外向钾通道和内向整流钾通道电流,并观察不同浓度的人参皂苷Re对电流幅度的影响。结果：给予人参皂苷Re（10,100μmol·L-1）后钠通道电流幅度呈现减小的趋势,对通道电流幅度的抑制率分别为（25.5±5.7）%（n=3）和（46.2±18）%（n=4）。给予人参皂苷Re（10,100μmol·L-1）对瞬时外向钾电流幅度略有抑制,洗脱后电流恢复,其中100μmol·L-1人参皂苷对电流的抑制率为（13±9）%（n=3）。给予人参皂苷Re（10,100μmol·L-1）后内向整流钾电流幅度呈现逐渐减小的趋势,药物洗脱后电流完全恢复,（10,100μmol·L-1）对通道电流幅度的抑制率分别为（16.3±8.7）%（n=5）和（35.4±11.2）%（n=5）。结论：人参皂苷Re能够抑制心室肌细胞电压依赖性的钠通道、瞬时外向钾通道和内向整流钾通道电流发挥抗心律失常的作用。     

塞络通胶囊对多发梗死性痴呆大鼠认知功能障碍的干预作用

目的:研究塞络通胶囊(塞络通)对多发梗死性痴呆(multi-infarct dementia,MID)大鼠学习记忆功能的改善作用及其机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组以及塞络通高、低剂量组.采用SD大鼠颈内动脉注射微球血管栓塞剂的方法建立多发梗死性痴呆模型;手术成功后第10天,大鼠分别灌胃给予蒸馏水、盐酸美金刚(20 mg· kg-1)以及高、低剂量的塞络通(16.5,33.0 mg·kg-1),每日1次,连续60 d;检测塞络通不同剂量对模型大鼠Morris水迷宫潜伏期、路径长度,以及脑组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响.结果:与假手术组比较,多发梗死性痴呆大鼠在Morris水迷宫实验中的潜伏期及路径长度均明显延长(P＜0.05或P＜0.01),脑组织ChAT活性明显降低(P＜0.05);塞络通干预60 d后明显缩短模型大鼠在Morris水迷宫实验中的潜伏期及路径长度(P＜0.05或P＜0.01);并且明显降低脑组织AchE活性面升高ChAT活性(P＜0.05或P＜0.01).结论:塞络通对多发梗死性痴呆大鼠认知功能障碍具有一定程度的改善作用,作用机制可能与其对脑组织ChAT活性以及AchE活性不同的调节相关.     

还脑益聪方对老龄大鼠学习记忆及脑组织β类淀粉样蛋白和P物质水平的影响

目的:观察还脑益聪方对老龄大鼠学习记忆功能及脑组织β类淀粉样蛋白(β-AP)和P物质(S.P)水平的影响。方法:以Morris水迷宫试验检测老龄大鼠的空间学习记忆能力,将学习记忆减退的40只大鼠用随机表分成4组,每组10只。即模型(记忆减退老龄大鼠)对照组、还脑益聪方大剂量(13.68 g生药/kg)组、小剂量(6.84 g生药/kg)组和阳性药物对照组(盐酸多奈哌齐片,0.45 mg/kg)组,另取学习记忆能力正常老龄大鼠10只为正常对照组,给与等量水,其余灌胃给药8周。观察测定老龄大鼠的空间学习记忆能力和脑组织匀浆测定β-AP和P物质含量,并检测大鼠血清超氧化物岐化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,以HE染色观察大鼠脑组织形态学的病理变化。结果:模型组老龄大鼠在水迷宫中的游泳时间、路径长度明显延长。给药8周后,还脑益聪方大、小剂量组大鼠游泳持续时间、路径长度较模型组显著缩短,寻找平台的方式有所改进。和正常老龄大鼠组比较,模型组大鼠MDA含量显著升高,SOD活力显著降低。与模型组比较,给药组大鼠脑组织的β-AP含量下降和P物质水平增加,血清SOD水平显著升高(P0.01),脑组织形态结构得到改善。结论:还脑益聪方可降低β-AP在老龄大鼠脑组织的沉积,保护脑组织海马形态的完整性,从而改善老龄大鼠空间学习记忆能力。     

老年轻度认知功能障碍与氧自由基代谢、乙酰胆碱酯酶、血脂及炎性介质的关系

目的 探讨老年轻度认知功能障碍(MCI)与氧自由基代谢、乙酰胆碱酯酶(AchE)、血脂及炎性介质的关系.方法 分别检测老年MCI组(45例)与健康老年组(45例)记忆力、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、AchE、血脂及白介素(IL)-1a、IL-6含量,并进行比较和相关分析.结果 与健康老年组比较,MCI组各项记忆分及记忆商明显降低(均P<0.05);血清SOD及高密度脂蛋白(HDL)水平显著降低(P<0.05～0.01),血清MDA、AchE、IL-1a水平及总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)及载脂蛋白B(ApoB)水平显著增高(P<0.05～0.01).MCI组血清AchE水平与SOD水平呈负相关(r=0.82,P<0.01),与MDA水平呈正相关(r=0.69,P<0.01);ApoB水平与TC、LDL水平正相关(r=0.71,0.76,均P<0.01).结论 记忆障碍是老年MCI患者的认知功能损害特点;血清AchE含量增高,可能是导致Ach不足使认知功能下降的原因之一;老年MCI与氧化损伤、炎症反应及脂质代谢紊乱可能有一定相关性.     

还脑益聪方对认知功能障碍大鼠认知功能及海马Bcl-2， Bax蛋白表达的影响

目的:观察还脑益聪方对复合因素所致大鼠认知功能障碍模型认知功能、海马区细胞凋亡情况及相关基因表达的干预作用.方法:SD大鼠60只,按随机方法分为中高组、中低组、阳性组、模型组及空白组.空白组每日皮下注射等量生理盐水,共10周,并饲喂普通饲料至第10周末;其他各组每日皮下注射D-半乳糖50 mg·kg~(-1)体重,共10周,并于第5周开始同时给予半高脂饲料饲喂.第7周开始,中药高、低剂量组均给予还脑益聪方混悬液0.01 mL·g~(-1)体重灌胃(用药量分别为生药14 g·kg~(-1)体重及生药7 g·kg~(-1)体重);阳性药对照组给予盐酸多奈哌齐混悬液0.01 mL·g~(-1)体重灌胃(用药量为0.4 mg·kg~(-1)体重);模型与空白对照组均给予等量蒸馏水;灌胃每日1次至第10周末.观察各组动物行为学的变化海马区细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白Bcl.2,Bax的变化.结果:水迷宫试验显示,模型组潜伏期明显延长,穿台次数明显减少,和空白组比较有显著差异(P<0.05,P<0.01),中高组及阳性组穿台次数与模型组比较,有显著性差异(P<0.05,P<0.01);模型组海马凋亡细胞数量明显增加,和空白组比较有显著差异(P<0.01),中高组、中低组及阳性组均可减少海马细胞凋亡数量,提高Bcl-2与Bax的比值,差异有统计学意义(P<0.01).结论:还脑益聪方能改善认知功能障碍大鼠学习记忆能力,通过抑制海马细胞凋亡,调节相关基因表达,加速细胞修复,保护损伤脑组织作用,可能是其临床效应的部分途径.     

浅谈中医"虚"、"瘀"、"浊"、"毒"与轻度认知障碍发病的关系

轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MCI)是介于正常老化和痴呆间的一种临床状态,处于这种状态的个体存在超出其年龄所允许的记忆障碍,但仍能维持功能完好,达不到痴呆的诊断标准[1]。MCI是老年痴呆临床前期的一种综合征,也可能是老年痴呆发病的一种早期信号,它有助于发现最需要早期干预的个体[2],也是最有可能发展为老年痴呆一个公认的临床状态。     

银杏蜜环口服溶液对孤养结合慢性不可预知温和应激大鼠抑郁模型P2RX7/NLRP3信号通路的影响

目的 通过观察银杏蜜环口服溶液对抑郁模型大鼠的影响,探讨银杏蜜环口服溶液抗抑郁的机制。方法 50只SD大鼠,除正常组外,采用孤养结合慢性不可预见性应激（CUMS）大鼠抑郁模型,模型成功的大鼠分为模型组,氟西汀组（10 mg·kg^-1）,银杏蜜环口服溶液高、低剂量组（618,309 mg·kg^-1）,每组10只;连续造模21 d,刺激第7天给药,以10 mL·kg^-1体积连续给药14 d,正常组与模型组灌胃蒸馏水;进行糖水偏好实验、旷场实验、悬尾不动实验;苏木素-伊红（HE）染色法观察抑郁大鼠海马组织病理形态变化;运用多因子检测技术（Luminex）及蛋白免疫印迹法（Western blot）技术检测各组大鼠海马组织白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量及NOD样受体3（NLRP3）及其相关激活信号通路蛋白的表达水平。结果 连续给药14 d后,与正常组比较,模型组大鼠糖水消耗率明显降低、直立次数明显减少、悬尾不动累积时间明显延长（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,氟西汀及银杏蜜环口服溶液高剂量组大鼠表现为直立、穿格次数增加,糖水消耗率增加,悬尾不动累积时间明显缩短（P<0.05,P<0.01）。HE结果显示,银杏蜜环口服溶液高剂量组大鼠海马区神经元细胞排列有序,轻度疏松,小胶质细胞浸润不明显;与正常组比较,模型组海马组织中IL-1β,IL-6和TNF-α的含量明显增加（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,银杏蜜环口服溶液高剂量组大鼠脑组织IL-1β,IL-6和TNF-α的含量明显降低（P<0.05,P<0.01）。分子生物学实验表明,与正常组比较,模型组嘌呤能受体P2X7（P2RX7）,NLRP3,凋亡相关斑点样蛋白（ASC）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）,IL-1β蛋白表达明显增加（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,氟西汀及银杏蜜环口服溶液高剂量组可明显抑制P2RX7,NLRP3,ASC,Caspase-1,IL-1β蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论 银杏蜜环口服溶液可以改善孤养结合CUMS诱导的大鼠抑郁样行为,其作用机制与调控P2RX7/NLRP3信号通路相关。     

还脑益聪方提取物对阿尔茨海默病模型小鼠脑组织Aβ、APP及相关分泌酶表达的影响

目的 观察由补肾益气、活血解毒中药组成的还脑益聪方提取物对β-淀粉样前体蛋白(APP)转基因造成的阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)生成的影响,并初步探讨其作用机制.方法 将3月龄AD模型小鼠随机分为模型组、还脑益聪方提取物大、小剂量组(2.8,1.4 g·kg-1)和盐酸多奈哌齐组(0.65×10-3g·kg-1),每组15只;同月龄相同遗传背景的C57BL/6J小鼠15只作为正常对照组.所试药物稀释相同体积灌胃给药,对照组和模型组给以等体积蒸馏水灌胃,每日1次,连续灌胃6个月.采用免疫组织化学法结合彩色图像分析法观察各组小鼠脑组织APP、Aβ、β位点剪切酶(BACE)和早老蛋白1(PS-1)的表达;采用刚果红染色观察各组小鼠脑组织淀粉样沉积的变化.结果 与正常对照组相比,模型组小鼠海马CA1区APP、Aβ、BACE和PS-1表达显著增多(P<0.01),刚果红染色示橘红色染色增多;与模型组相比,还脑益聪方组小鼠海马CA1区APP、Aβ、BACE和PS-1表达显著减少(P<0.05或P<0.01).橘红色染色较少.结论 还脑益聪方提取物可通过减少脑组织的APP含量及抑制β-和γ-分泌酶,从而减少AD模型小鼠脑组织Aβ的生成及淀粉样沉积的形成,这也是其改善AD模型小鼠学习记忆能力的机制之一.     

还脑益聪方对老年大鼠脑组织炎症因子及海马核因子-κB表达的影响

目的:观察还脑益聪方对老年认知障碍大鼠学习记忆能力、脑组织炎性因子含量和海马组织核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:采用自然衰老大鼠模型,应用Morris水迷宫检测,以青年组大鼠平均逃避潜伏期95%和99%正常值范围上限值为界,筛选认知障碍老年大鼠40只。随机分为还脑益聪方大剂量(13.68g生药/kg)组、小剂量(6.84g生药/kg)组、阳性药物对照(盐酸多奈哌齐,0.45mg/kg)组和老年认知障碍大鼠(模型)组,并设立学习记忆正常的青年大鼠10只、正常老年大鼠10只为空白对照组。灌胃给药8周后,观察大鼠学习记忆能力及脑组织白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,免疫组织化学方法检测海马组织NF-κB的表达。结果:与老年认知障碍大鼠比较,盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方组大鼠首次穿越中心的时间显著缩短(P<0.05、P<0.01),在中心区域的寻找平台时间显著加长(P<0.05)。同时,还脑益聪方可以显著降低认知障碍大鼠的IL-6、TNF-α水平(P<0.05,P<0.01),抑制脑组织NF-κB的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:还脑益聪方可通过抑制老年认知障碍大鼠的海马组织NF-κB表达,降低脑组织中的炎症因子水平,减轻海马区神经元损伤,达到改善认知障碍大鼠的学习记忆能力。     

缺血性脑卒中免疫炎症机制及中医药干预研究进展

缺血性脑卒中由于脑血管局部缺血缺氧,继而激活血管内炎症反应,最终产生一系列中枢神经系统免疫应答反应,在脑损伤和神经修复过程中均发挥重要作用,与缺血性脑卒中的发生发展紧密相关。中性粒细胞、神经胶质细胞、淋巴细胞等免疫细胞具有双重作用,既能释放炎症介质加重脑损伤,又能释放神经营养物质和抗炎因子产生脑保护作用。通过整理缺血性脑卒中后血管内炎症反应及中枢神经系统免疫应答机制,以及中医药对相关免疫细胞的干预作用,以期为缺血性脑卒中的治疗提供证据和思路。