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1.
目的 建立并考察适用于药物相互作用研究的体外大鼠原代肝细胞模型。方法 用改良Seglen两步灌流法分离肝细胞,以高糖DMEM为基础培养基培养细胞。通过检测细胞上清液中白蛋白(ALB)和尿素氮(BUN)水平、用底物探针法检测大鼠原代肝细胞中5种细胞色素P450(rCYP450)和葡萄糖醛酸转移酶(rUGT)代谢活性,考察培养时长对肝细胞功能和代谢酶活性水平的影响。原代肝细胞与利福平(RIF)、奥美拉唑(OMP)、β-萘黄酮(BNF)、苯巴比妥钠(PB)和地塞米松(DMS)共培养60 h,通过底物探针法检测代谢物的变化,用实时荧光聚合酶链反应法检测各组细胞代谢酶mRNA的表达水平,筛选多种代谢酶的阳性诱导剂。结果 改良后的分离方法可得到活率大于90%,能正常分泌ALB和BUN的原代肝细胞,培养至第9天仍可维持基本功能和正常形态。rCYP1A2、rCYP2B1和rCYP3A1随培养时长活性下降迅速,48和72 h下降至20.54%~23.15%和0~7.80%。rCYP2D2和rUGT酶活性下降较缓,48和72 h可维持在57.41%~76.77%和25.25%~35.24%。诱导剂筛选结果...  相似文献   
2.
3.
目的:探究中药复方祛瘀化痰通脉方对高脂血症金黄地鼠肠道菌群的调节作用及功效配伍的科学性。方法:实验选用叙利亚金黄地鼠,分为正常、模型、复方、祛瘀、化痰和解毒组6组,每组8只。采用高脂饲料喂饲法形成金黄地鼠高脂血症模型,造模4周,灌胃给予祛瘀组(1.11 g·kg-1),化痰组(0.39 g·kg-1),解毒组(0.07 g·kg-1),祛瘀化痰通脉方组(1.42 g·kg-1),正常组与模型组给予等体积的蒸馏水,每天1次,连续灌胃6周。收集血清测定血脂,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理形态,收集粪便进行肠道菌群16S rRNA基因高通量测序分析。结果:与正常组比较,模型组金黄地鼠体质量增长明显(P<0.05,P<0.01),各项血脂指标均显著升高(P<0.01),肠道菌群多样性明显降低(P<0.05,P<0.01),菌群相对丰度门、科、属水平均发生明显变化(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,祛瘀化痰通脉方能控制高脂血症金黄地鼠体质量变化,降低血清甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值(LDL-C/HDL-C)(P<0.05,P<0.01);改善肠道菌群结构,显著降低厚壁菌门与拟杆菌门的比值(P<0.01),增加拟杆菌科、紫单孢菌科、理研菌科、巴氏杆菌属等菌群丰度(P<0.05,P<0.01),降低红蝽菌属的相对丰度(P<0.05)。各配伍组对高脂血症金黄地鼠血脂、肠道菌群具有不同程度的改善作用,其中解毒组降血脂作用和化痰组菌群调节作用更接近复方组。结论:祛瘀化痰通脉方及配伍组从不同角度对金黄地鼠高脂血症发挥不同程度的改善作用,其作用机制可能与调节肠道菌群结构、改善肠道微生态有关,复方组作用最为显著,化痰组次之,本研究亦为中药复方祛瘀化痰通脉方配伍的科学性提供了依据。  相似文献   
4.
目的:探讨痰瘀同治方对兔动脉粥样硬化(AS)对氧磷酶活性及炎症因子的影响。方法:将家兔随机分为正常组、模型组、辛伐他汀组、痰瘀同治方5,2.5,1.25g·kg-1剂量组;采用主动脉球囊拉伤加高脂喂养造模;造模4周开始给药,给药8周。实验结束后,测定各组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,血清对氧磷酶-1(PON-1)活性,C反应蛋白(CRP)和白介素-6(IL-6)含量。结果:与模型组比较,辛伐他汀组和痰瘀同治方5g·kg-1剂量组家兔TC,LDL-C明显降低,痰瘀同治方5,2.5g·kg-1剂量组PON-1活性较模型组明显升高,痰瘀同治方各剂量组CRP,TNFα-和IL-6水平较模型组明显降低。结论:痰瘀同治方通过调节血脂,抗炎,保护PON-1活性等途径起到抗AS的作用。  相似文献   
5.
目的 探讨祛瘀化痰通脉方(QYHT)在假手术组和模型组小型猪体内药代动力学特征,为QYHT的药效物质基础研究及临床应用提供参考。方法 采用高脂饲料喂养结合冠状球囊拉伤内皮损伤的方法建立痰瘀互结证冠心病小型猪模型,连续给药8周后不同时间点取血,对血浆中各成分的浓度进行测定,并计算药代动力学参数。结果 建立了小型猪血浆中9个成分含量测定方法,经方法学验证,专属性、线性范围、准确度和精密度、提取回收率、稳定性以及基质效应均符合体内药物分析的要求。给药后假手术组可检测到3个入血成分,模型组检测到5个入血成分。 结论 QYHT在假手术组和模型组动物体内的处置过程存在一定差异。该测定方法适用于检测QYHT在小型猪血浆中的药代动力学研究,可为该复方的临床合理安全用药提供科学参考。  相似文献   
6.
目的:针对中国实验小型猪冠心病模型,建立非标记液相色谱/质谱联用血清蛋白组学研究方法。方法:研究中分别设立健康对照组、模型组、阳性药物治疗组及中药治疗组,分析过程中,样品未进行高丰度蛋白去除,利用BCA法测定蛋白浓度后,直接使用-20℃冷丙酮冰上沉淀,4℃放置过夜,离心,弃去溶液,对蛋白沉淀,分两步加入Trypsin进行酶解处理,加酸终止后,离心,获取上清液进行分析。测定方法采用160n l Trap柱进行蛋白富集,分析柱采用Agilent Ch ip(C18,150 mm×75μm),为获得较高的蛋白覆盖率,方法进行了如下优化:测定梯度优化在97%水相-77%水相区间;线性梯度运行时间为125min;Data dependent参数优化;2次重复进样等。测定结果利用Agilent Spectral m ill进行搜索,部分蛋白利用M ascot进行了验证搜索。结果:最终在健康对照组获得特异性蛋白512个(un ique prote in),重叠蛋白47个(overlapped)。以获得的健康组特异性蛋白为参照,对4组来源样品进行了PCA分析,将上述各组进行分类,其中模型组与治疗组得到了明显的区分,中药治疗组...  相似文献   
7.
目的:观察痰瘀同治方对痰瘀互结证冠心病小型猪心功能的影响。 方法:将36只中国小型猪随机分为正常对照组、模型组、丹蒌片组和痰瘀同治方高、中、低剂量组(生药2.0,1.0,0.5 g·kg-1),每组6只;除对照组外,其他各组均给予高脂饲料喂养2周后,采用介入技术球囊损伤冠状动脉左前降支内皮,术后继续高脂饲料喂养8周,制备小型猪痰瘀互结证冠心病模型;术后给药8周,观察心肌缺血程度的变化,并采用超声心动图和无创血流动力学方法检测心脏功能和结构的改变。 结果:与对照组比较,模型组心肌缺血程度明显增加,无创血流动力学参数中CO,SV和LCW均明显降低,而SVR则明显增加(P<0.05或P<0.01);超声心动图显示IVSd,LVPWs,EF和FS明显降低, LVIDs则明显增加(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,痰瘀同治方能够减少心肌缺血程度,增强心功能;改善缺血导致的心肌结构和功能改变(P<0.05或P<0.01)。 结论:痰瘀同治方对痰瘀互结证冠心病小型猪心功能具有明显的改善作用;采用临床心功能的检测方法能正确评价冠心病小型猪心肌缺血后心功能的改变,缩小临床与基础实验研究之间的差距。  相似文献   
8.
中国实验小型猪冠心病模型的心肌组织蛋白质组学研究   总被引:2,自引:2,他引:0  
目的研究中国小型猪冠心病模型心肌组织蛋白表达谱的改变情况。方法在建立中国小型猪冠心病模型基础上,应用双向电泳分离各组小型猪心肌组织总蛋白;通过图谱分析软件和基质辅助激光解析-飞行时间质谱技术分别进行差异比较和质谱鉴定及数据比对。结果小型猪冠心病模型组心肌组织与正常组相比共有14个差异蛋白点:13个上调点,1个特异表达点。这些差异点经胶内酶解、MAL-DI-TOF质谱分析及MASCOT搜索引擎检索,鉴定出HSPA8(Hsc70)、apolipoprotein A-IV(apoA-IV)、albumin及desmin4种蛋白。结论初步发现的差异蛋白可能与冠心病的发生、发展相关,但是还需要通过其它方法做进一步验证。  相似文献   
9.
中国小型猪痰瘀互结证冠心病模型的血清蛋白质组学研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:研究中国小型猪痰瘀互结证冠心病模型血清蛋白表达谱的改变情况。方法:在建立中国小型猪痰瘀互结证冠心病模型基础上,应用双向电泳分离小型猪血清蛋白;通过图谱分析软件和基质辅助激光解析-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分别进行差异比较和质谱鉴定及数据比对。结果:小型猪痰瘀互结证冠心病模型组血清与正常组相比共有17个差异蛋白点,6个上调点,1个下调点,7个缺失点,3个特异表达的点。挖取这些差异蛋白点进行胶内酶解、MALDI-TOF质谱分析及MASCOT搜索引擎检索,鉴定出apolipoprotein E precursor(apoE)、complement component 4 binding protein(C4BP)等2种蛋白。结论:初步发现的差异蛋白可能与痰瘀互结证冠心病的形成、发生、发展相关,但是还需要通过其它方法做进一步验证。  相似文献   
10.
无张力疝修补术包括平片和网塞充填等手术式,是利用人工合成材料,在无张力的情况下进行的疝修补。其特点是创伤小,耗时短,恢复快,术后复发率低。符合解剖生理等特点,现已成为治疗腹股沟疝的主要手术式。亦被医学界称为疝手术改革的“里程碑”。我科自2000年以来开展无张力疝修补术治疗腹股沟疝229例。其中老年患者55例,均取得满意效果,现将围手术期护理总结报告如下。 1 临床资料 1.1 一般资料  相似文献   
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