罗元恺教授的痛经辨证施治系统

一、经验传授与临床病例相结合(一)请罗教授传授痛经的治疗经验根据罗老的经验,结合中医理论,估计临床可能出现与痛经有关的症状,拟定了症状表(共188项症状),痛经的辨证分型与治疗初步方案。     

Met-RANTES干预实验性小鼠溃疡性结肠炎对MIP-3α及其受体CCR6的影响

目的:探讨MIP-3α及其受体CCR6在实验性小鼠溃疡性结肠炎(UC)发病中的作用,并分析Met-RANTES疗效机制.方法:用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立结肠炎小鼠模型,观察Met-RANTES对小鼠结肠炎病活动指数(DAI)、大体形态评分(GMS)、结肠组织学病理评分(HPS)的影响:并通过RT-PCR检测其对小鼠结肠组织MIP-3α、CCR6mRNA的表达变化及Western blot和免疫组织化学方法检测其小鼠结肠组织MIP-3α、CCR6的蛋白表达变化.结果:DAI、GMS和HPS在DSS模型组和生理盐水治疗组中高于空白对照组,MIP-3α和CCR6在小鼠溃疡性结肠炎中表达上调,在小鼠空白对照组中不表达或弱阳性表达,差异有统计学意义(P<0.01):与DSS模型组和生理盐水治疗组相比,Met-RANTES治疗组小鼠DAI、GMS和HPS降低,MIP-3α和CCR6表达下调(mRNA:0.21±0.08 vs 1.09±0.08.1.08±0.07;0.25±0.08 vs 1.11±0.07,1.05±0.08,P<0.01:蛋白:0.28±0.08 vs 0.98±0.07,1.05±0.06;0.25±0.07 vs 1.19±0.07.1.15±0.06.P<0.01):生理盐水治疗组小鼠DAI、GMS和HPS 以及MIP-3α和CCR6表达与DSS模型组相比表达无明显差异(P>0.05).结论:MIP-3α与CCR6参与了小鼠UC的发生、发展;Met-RANTES能下调MIP-3α及CCR6的表达,并能减轻炎症损伤;针对MIP-3α或CCR6的靶向治疗可能是UC一种有效的治疗方法.     

趋化因子CCL20及其受体CCR6在急性坏死性胰腺炎中的表达及意义

目的 探讨CC趋化因子配体20(CCL20)和CC趋化因子受体6(CCR6)在实验性急性坏死性胰腺炎(ANP)发病机制中的作用.方法 48只SD大鼠按完全随机法分为ANP组和对照组.采用胆胰管逆行注射4%牛磺胆酸钠建立大鼠ANP模型,以注射等容积生理盐水作为对照组.术后1、3、6、12 h分批处死大鼠,取血检测血清淀粉酶,胰腺组织常规病理检查并评分,免疫组化和RT-PCR检测胰腺组织中CCL20、CCR6 mRNA及蛋白表达.结果 ANP大鼠血清淀粉酶和胰腺组织病理评分明显高于对照组.ANP组术后胰腺组织CCL20 mRNA及蛋白表达呈时间依赖性增强(P＜0.05);术后6 h胰腺组织中CCR6 mRNA明显高于对照组(0.88±0.05对0.23±0.09,P＜0.01),术后12 h CCR6mRNA表达较6 h时降低,但仍高于对照组(0.37±0.10对0.15±0.07,P＜0.05),CCR6蛋白变化与其mRNA变化一致.结论CCL20和CCR6参与ANP的发生和发展.     

超声引导下射频消融治疗肝癌后VEGF和AFP的变化

目的:观察超声引导下射频消融治疗肝细胞性肝癌后患者血清VEGF、AFP的变化。方法:超声引导下经皮射频消融治疗46例肝细胞性肝癌,分别以ELISA法和免疫发光法测定患者术前、术后血清VEGF和AFP水平。结果:射频消融术前患者血清VEGF、AFP水平分别为263.69±95.71pg/ml、221.90±128.66ng/ml;术后即时稍有下降,分别为247.55±65.28pg/ml、210.65±95.48ng/ml;术后1周明显下降,分别为162.90±22.12pg/ml、125.17±79.97ng/ml;术后1月VEGF有所上升,为183.13±1.95pg/ml,而AFP继续下降,为41.57±39.07ng/ml。结论:超声引导下射频治疗肝细胞性肝癌可以有效消融肿瘤,消除了VEGF及AFP的来源,从而改善患者预后。     

超声引导下射频消融治疗肝癌对免疫功能的影响

目的：探讨超声引导下射频消融治疗肝癌对患者血清免疫功能的影响。方法：超声引导下射频消融治疗肝癌患者46例,以ELISA法测定患者术前术后外周血IL-2,sIL-2R水平,并行统计学分析。结果：射频消融术前,患者血清IL-2,sIL-2R水平分别为（136.91±55.11）pg/ml、（273.18±89.45）pmol/l,术后1月（186.62±64.88）pg/ml、（171.73±38.49）pmol/L,其差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：超声引导下射频治疗肝癌可以有效改善患者免疫功能。     

不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及对相关基因表达的影响

目的 探讨不同时间、不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基（N-nitrosobis-2-oxopropylamin,BOP）诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因表达的变化.方法 72只仓鼠按完全随机法分为3组,每组24只.A组采用小剂量BOP长周期皮下注射诱导造模（10 mg/kg体质量,每周1次,连续8周）;B组采用大剂量BOP短周期皮下注射诱导造模（首次剂量70 mg/kg体质量,后3周每周20 mg/kg体质量）;C组为未注射BOP的对照组.成模后取胰腺组织及肝脏组织行病理组织学检查.采用实时PCR法及蛋白质印迹法检测仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因的表达.结果 A组仓鼠中19只成功诱导胰腺癌模型;B组均未见胰腺肿瘤形成,而18只仓鼠成功诱导肝内胆管细胞癌;C组胰腺及肝脏均未见异常.仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ mRNA的表达量分别为对照组的1.93、2.03、1.57、5.55和3.54倍,差异有统计学意义（P值均＜0.05）;COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ蛋白的表达量分别为2.47 ±0.22、0.56 ±0.05、1.23 ±0.05、1.55 ±0.13、2.02 ±0.01,而对照组仓鼠正常胰腺组织的蛋白表达量分别为0.80±0.08、0.39 ±0.01、0.60 ±0.01、0.53 ±0.03、0.40 ±0.02,两组差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.两组MHC-ⅡmRNA及蛋白表达的差异无统计学意义.结论 小剂量BOP长周期皮下注射能成功诱导仓鼠胰腺癌模型,胰腺癌组织的COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ基因表达上调,可能参与仓鼠胰腺癌的发生和发展.     

肥胖、高脂血症与急性胰腺炎相关性研究

目的探讨肥胖、高脂血症在急性胰腺炎发病中的影响与作用.方法选择重症急性胰腺炎(SAP)患者98例,轻症急性胰腺炎(MAP)患者107例,测定体重指数(BMI)、血脂水平以及急性胰腺炎相关的实验室检查指标.结果肥胖组(BMI≥28 kg/m2)共有64例,超重组(24≤BMI＜28 kg/m2)和体重正常组(BMI＜24kg/m2)分别有66例和75例.肥胖组SAP比例高于超重组和体重正常组;SAP患者BMI和血三酰甘油高于超重组和体重正常组;对于肥胖的急性胰腺炎患者,血脂升高伴随着更为严重的胰腺和肝肾功能损害,在超重组和体重正常组未观察到同样的效应.结论肥胖影响急性胰腺炎的严重程度,并且肥胖者发生急性胰腺炎后,血脂水平可作为急性胰腺炎严重程度的预测指标.     

5-脂氧合酶抑制TNF-α诱导的胰腺癌细胞凋亡

目的:检测胰腺癌细胞中5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)及其代谢产物的表达情况,分析高表达5-LOX及LTB4对胰腺癌细胞生长凋亡的影响.方法:体外培养人胰腺癌细胞株ASPC-1,PANC-1和SW1990,并构建5-LOX基因稳定转染细胞株.用RT-PCR和Western blot检测细胞5-LOX mRNA和蛋白的表达,ELISA检测细胞培养上清中LTB4的含量,采用流式细胞仪、Annexin V/PI双染法检测TNF-α诱导细胞的细胞凋亡.结果:三种胰腺癌细胞株均表达5-LOX mRNA和蛋白,细胞上清中也都检测到一定量LTB4分泌.5-LOX基因稳定转染细胞株表达5-LOX和LTB4的水平上升.TNF-α(20μg/L)处理野生型SW1990细胞,12和24 h后凋亡率分别为25.4%±3.65%和43.5%±5.23%,但该效应在高表达5-LOX的细胞株中明显减弱,分别为13.2%±2.01%和21.7%±3.65%.在野生型SW1990细胞培养中加入外源性LTB4(10 nmol/L)能抑制TNF-α诱导的细胞凋亡,野生型与处理组细胞24 h后凋亡率有显著性差异(47.6%±5.32%vs 18.5%±5.69%,P<0.01).用LTB4受体阻断剂处理5-LOX高表达细胞株,能恢复其对凋亡诱导的敏感性.结论:胰腺癌细胞均能表达5-LOX并产生LTB4,高表达5-LOX能抑制TNF-α诱导的胰腺癌细胞凋亡.     

胰腺癌细胞中5-脂氧合酶mRNA和蛋白的表达

胰腺癌预后差,早期诊断困难,发病率于近年来逐步上升,且传统治疗效果不理想.因此,深入研究胰腺癌的发病机制对探索更为有效的预防、诊断和治疗方法具有重要意义.近年来研究结果表明,5-脂氧合酶(5-lipoxygenase, 5-LOX)代谢途径与胰腺癌的发生和发展关系密切.为此,我们应用RT-PCR和免疫组织(细胞)化学技术检测胰腺癌细胞株SW1990和Capan2中5-LOX的表达情况.     

雷公藤内酯醇诱导胰腺癌细胞凋亡及对5-脂氧合酶和凋亡基因表达的影响

目的探讨雷公藤内酯醇(TL)在胰腺癌化学预防和治疗中的应用价值。方法采用人胰腺癌细胞株SW1990作为研究对象,MTT法和吖啶橙(AO)染色分别检测SW1990细胞的增殖和凋亡,采用半定量RT-PCR法检测5-脂氧合酶(5-LOX)mRNA、bcl-2 mRNA和bax mRNA的表达。结果10μg/ml的TL对SW1990细胞生长的抑制率达30%以上,0.1μg/mlTL处理24h后,SW1990细胞凋亡指数达38.5%,显著高于对照组的14.97%。5-LOX、bcl-2、bax mRNA表达从0.7160±0.0251,0.2446±0.0311和0.0260±0.0065分别变化为0.2400±0.0316,0.0700±0.0158和0.0700±0.0158。结论TL能抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,其凋亡机制可能与下调5-LOXmRNA和bcl-2mRNA、上调bax mRNA基因表达有关。