镉胁迫对昆虫的毒性效应及昆虫防御机制的研究进展

镉是重要的重金属污染物之一,其毒性大,蓄积性强,易对人类健康造成严重危害,这种危害也涉及到无脊椎动物,尤其是镉胁迫对昆虫的影响已引起人们关注。环境中的镉可通过摄食和呼吸等途径进入昆虫体内,影响昆虫的生长发育,并通过氧化损伤等途径诱导细胞凋亡。昆虫对镉胁迫有一定的防御能力,可在一定程度上依靠金属结合蛋白、抗氧化酶、热休克蛋白的保护作用及排泄行为的解毒作用减少镉对机体的损害。镉的毒性效应可能随昆虫种类不同而不同。本文就镉胁迫对昆虫生长和发育的影响、诱导细胞凋亡的分子机制以及昆虫对镉胁迫的防御机制等研究进展进行回顾综述。     

昆虫杆状病毒表达载体系统的发展

近年来随着关键技术的不断改进,昆虫杆状病毒表达载体系统更趋于完善。适合规模化生产的昆虫细胞系与衍生和改造细胞系的建立,提高了系统的糖基化能力及蛋白表达量。BaculoGold、Bac-to-Bac、flashBAC、BaculoDirect、MultiBac等重组杆状病毒构建技术的应用,简化了构建过程,提高了重组效率。通过删除部分杆状病毒基因、改造启动子以及引入调控序列等途径优化,昆虫杆状病毒表达载体系统的蛋白表达量获得进一步提高。此文对昆虫细胞、杆状病毒及重组杆状病毒的构建技术的发展进行综述。     

蜱抗原免疫接种诱导宿主抵抗力的研究

本文选用中华硬蜱雌性成虫中肠抗原、卵抗原对家免进行人工免疫接种，在按常规方法免疫接种三次后，用中华硬蟀成虫进行感染（叮咬），分别观察中肠抗原接种组、卵抗原接种组、佐剂对照组和空白对照组中华硬蜱的吸血量、生殖情况。结果显示．中华硬蜱叮咬中肠抗原免疫接种兔后其吸血量、产卵量均较对照组显著降低，蜱的吸血量较佐剂和空白对照组分别下降48．56％和54．65％，产卵量下降52.8％和57.9％，而中华硬蜱叮咬卵抗原免疫接种组兔后其吸血、生殖能力较对照组无显著性差异（P＜0．05）。实验表明中华硬碑中肠抗原可有效诱导宿主产生特异性抵抗力，并对该现象进行了分析讨论。     

乙型肝炎病毒多聚酶基因在重组杆状病毒系统中的表达

目的利用杆状病毒一昆虫细胞表达系统制备乙型肝炎病毒多聚酶重组蛋白。方法构建含有乙型肝炎病毒多聚酶基因的杆状病毒转移载体pFastbac Dual—polymerase，转化大肠杆菌DH10Bac进行转座，提取重组Bacmid转染昆虫细胞获得含有HBVpol基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染昆虫细胞进行蛋白表达，用SDS—PAGE电泳分析表达情况。结果将所得Bacmid行PCR鉴定，结果表明成功构建了的含乙型肝炎病毒多聚酶基因的重组杆状病毒，SDS-PAGE分析表明该病毒能在昆虫细胞中高效表达重组的多聚酶蛋白。结论利用杆状病毒表达系统，构建的重组杆状病毒在昆虫细胞中高效表达乙型肝炎病毒多聚酶，为进一步的乙型肝炎病毒多聚酶的体外功能研究奠定了基础。     

汉滩病毒核蛋白部分片段与囊膜糖蛋白G1在昆虫细胞中的融合表达

目的　应用Bac -to -Bac杆状病毒表达系统融合表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白部分片段。方法　构建含有汉滩病毒G1S0 7嵌合基因的杆状病毒表达载体 pFBD -G1S0 7,转化DH10Bac致敏菌 ,利用其含有的细菌Tn7转座系统将嵌合基因重组至穿梭质粒Bacmid上 ,快速筛选出含有G1S0 7嵌合基因的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中表达该融合蛋白 ,利用间接免疫荧光、ELISA和免疫印迹对表达产物进行检测。结果　构建的含G1S0 7嵌合基因之重组杆状病毒可在昆虫细胞中表达出融合蛋白 ,该蛋白可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1特异性单抗所识别 ,表达产物主要集中在细胞内。结论　在昆虫细胞中表达出具有生物学活性的G1S0 7融合蛋白 ,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础     

DNA条形码技术应用于口岸吸血蠓类快速分子鉴定的研究

目的建立口岸吸血蠓类快速分子鉴定方法,提高鉴定效率和准确率。方法选择口岸区域采集点,采集吸血蠓类。经形态学鉴定后,单只蠓提取基因组DNA,采用自行设计的COI基因扩增引物进行扩增。PCR产物经电泳鉴定后,进行双向测序。序列经分析后,去除引物序列和不稳定序列,进行拼接。提交至NCBI和BOLD数据库进行比对,并建立系统进化树进行验证。结果得到12个新序列,已登录至GenBank,登录号为KF528689~KF528700。其中台湾蠛蠓的COI序列(683 bp)填补了NCBI数据库的空白。所得序列经分析后可以将多种蠛蠓、库蠓很好地区分开。结论本项目所建立的基于吸血蠓类COI基因的DNA条形码快速分子鉴定方法可以很好地鉴定各吸血蠓种,值得进一步推广应用。     

白豆蔻、望春花和高良姜挥发油驱蚊活性的评价

目的评价白豆蔻、望春花和高良姜挥发油的驱蚊活性。方法用实验室人体驱避试验评价纯挥发油对白纹伊蚊的驱避活性。结果白豆蔻、望春花和高良姜纯挥发油的有效保护时间分别为0．5—1．0h、1．0～1．5h和2．0～2．5h。结论三种植物的挥发油具有用于研制驱蚊剂的潜力。     

传播热带病的媒介昆虫

随着国际交往的的日益频繁,来我国的外国人群中,以及我国赴热带地域国家归国的人群中罹患热带病者日益增多,而广大医务人员对热带病诊治还不熟悉,对引起这些疾病的媒介昆虫就更加陌生。现以疾病为序,对传播疟疾、淋巴丝虫病、登革热、黄热病、立夫特山谷热、西尼罗热的媒介蚊;传播盘尾丝虫病的蚋,传播罗阿丝虫病的斑虻,传播利什曼病的白蛉,传播非洲锥虫病的舌蝇、美洲锥虫病的锥蝽进行简述。     

中国吸血蚋类研究回眸

蚋类,俗呼黑蝇(blackfly),隶属于昆虫纲、双翅目(Diptera)、蚋科(Simuliidae),是医学昆虫中的一个世界性分布的重要类群,不但骚扰吸血,侵袭人畜,并且是多种人类和禽畜疾病的传播媒介,其中包括人畜盘尾丝虫病、欧氏曼森线虫病和禽鸟住白虫病等。由于     

白纹伊蚊吸血特性的观察

用云南白纹伊蚊建立的实验种群，进行了吸血特性的观察。结果表明，白纹伊蚊具有再次吸血的特性，第一次吸血后６－７天再次吸血率高达１００％。每只蚊虫平均吸血量为１．３５７０－１．４８２０ｍｇ。吸血温度在１５－４０℃之间，最适吸血湿度－３０℃。每次吸血所需时间２－１９分种。