传播热带病的媒介昆虫

随着国际交往的的日益频繁,来我国的外国人群中,以及我国赴热带地域国家归国的人群中罹患热带病者日益增多,而广大医务人员对热带病诊治还不熟悉,对引起这些疾病的媒介昆虫就更加陌生。现以疾病为序,对传播疟疾、淋巴丝虫病、登革热、黄热病、立夫特山谷热、西尼罗热的媒介蚊;传播盘尾丝虫病的蚋,传播罗阿丝虫病的斑虻,传播利什曼病的白蛉,传播非洲锥虫病的舌蝇、美洲锥虫病的锥蝽进行简述。     

漳州古雷半岛鼠类及其体表昆虫调查

目的了解漳州古雷半岛鼠类密度及其体表昆虫分布情况,为口岸及地方卫生行政部门病媒生物防治提供本底资料。方法采用笼诱法进行鼠密度监测,捕获活鼠检集鼠体蚤类、螨类、蜱类等医学昆虫,全年监测进行统计分析。结果鼠密度较高,平均捕获率达12.26%,全年活动,季节高峰出现在5月和9月,种群构成中以臭鼩鼱为优势种,鼠体表昆虫蚤类仅发现及印鼠客蚤,螨类有4个种群,蜱类未检出。结论调查摸清了漳州古雷半岛鼠类及体表昆虫种群构成和季节消长资料,为病媒生物和虫媒疾病的防制提供科学依据。     

人CYP3A4与POR和cyt b5的三重共表达及其条件优化

目的:研究人CYP3A4与POR和cyt b5用悬浮细胞共表达时的最佳条件。方法:悬浮培养Sf 9细胞,分别摸索摇床的温度、转速、摇瓶中细胞液的量、表面活性剂的加量、细胞的培养时间,以及3种病毒的加量比例等条件,并进行优化;然后,将表达产物制成微粒体后用于睾酮的代谢,并分别测其代谢活性。结果:当恒温摇床的温度为27℃,转速为90 r/min,每250 ml摇瓶中加入80～120 ml细胞密度为5×105个/ml的细胞液,并加入0.1%的PluronicF-68,细胞培养72 h时,最适合细胞的生长和目的蛋白的表达。此时,当3种病毒的加量比例为1∶1∶1时,表达条件最佳,其对底物睾酮代谢的Km值、Vmax和CLint分别为119.6μmol/L、0.52μmol/(min.g蛋白)和4.34 ml/(min.g蛋白)。结论:通过三重共表达CYP3A4、POR、cyt b5,以及对表达条件的优化,提高了目的蛋白的表达量,得到了较高代谢活性的CYP3A4,从而为新药代谢及药物-药物相互作用研究奠定了基础,为药物代谢酶的大量表达提供了可行的方案。     

中缅边境地区三带喙库蚊对溴氰菊酯抗药性检测

目的明确三带喙库蚊对溴氰菊酯的抗药性及探讨吸血对抗药性的影响,以指导蚊虫抗药性的准确测定和化学杀虫剂的正确选择。方法从位于中缅边境地区的云南省德宏州盈江县现场采集吸血蚊和未吸血三带喙库蚊,采回后的第1d和第3d上午,应用WHO推荐的成蚊滤纸接触法分别测定其抗药性。结果在第1d和第3d的抗性测试中,未吸血蚊的死亡率分别是27.91%和28.15%。吸血蚊的首只击倒时间、KT50和KT95均大于相应未吸血蚊;击倒率和死亡率都小于相应未吸血蚊（击倒率,χ2=4.27,P=0.04〈0.05＆χ2=5.4,P=0.02〈0.05;死亡率,χ2=13.28,P=0.0004〈0.05＆χ2=8.88,P=0.0029〈0.05）。结论云南省盈江县的三带喙库蚊已对溴氰菊酯产生很强的抗药性,吸血可以显著增强该抗药性。因此,在蚊虫的抗药性测定中,要尽量排除吸血的影响,以获得准确地蚊虫抗药性水平,指导杀虫剂的合理使用。     

Glycosylation of recombinant human thyroid peroxidase ectodomain of insect cell origin has little effect on recognition by serum thyroid peroxidase antibody

Background Thyroid peroxidase (TPO) is an important autoantigen in Hashimoto’s thyroiditis (HT), and almost all epitopes are located in TPO ectodomain. The glycosylation of TPO might contribute to breaking self-tolerance, therefore, purified glycosylated recombinant TPO ectodomain is prerequisite of elucidating its role in the pathogenesis of HT. The aim of our study was to investigate whether the glycosylation has influence on the antigenic determinants of recombinant TPO.

Methods Bac-to-Bac baculovirus expression system was used to generate recombinant human TPO ectodomain. The antigenicity was analyzed by antigen specific enzyme-linked immunosorbant assays (ELISAs). The glycosylation of recombinant human TPO ectodomain of High Five insect cell origin was detected by lectin-ELISAs.

Results TPO ectodomain was recovered from the culture media as a soluble protein, and it was fused with a hexahistidine tag which allowed purification by nickel-affinity chromatography. The recombinant TPO ectodomain could be recognized by all the 54 HT patients and three TPO monoclonal antibodies. Fucose, sialic acid and galactose were all detected on the recombinant TPO ectodomain. Sera TPOAb binding decreased slightly after non-specific deglycosylation of TPO by periodic acid.

Conclusions High Five insect cells derived recombinant human TPO ectodomain had N-glycosylation sites, which might have little effect on recognition by serum TPOAb.

     

氯胺酮对大头金蝇生长发育影响研究

目的探讨氯胺酮对大头金蝇生长发育的影响,为法医昆虫毒理学提供基础性资料。方法恒温28℃条件下,用混有4种浓度梯度的盐酸氯胺酮的培养基饲育大头金蝇幼虫,观察记录幼虫体长、体质量的改变。结果实验组平均体长、平均体质量在达到最大值前大部分时间段明显低于对照组(P<0.001);与对照组相比,实验组幼虫最大体长及最大体质量未见一致性差异,但在达到最大体长及最大体质量的时间上有显著延迟,并相应延长整个幼虫期。结论氯胺酮能显著抑制大头金蝇幼虫体长及体质量的增长速度。     

白豆蔻、望春花和高良姜挥发油驱蚊活性的评价

目的评价白豆蔻、望春花和高良姜挥发油的驱蚊活性。方法用实验室人体驱避试验评价纯挥发油对白纹伊蚊的驱避活性。结果白豆蔻、望春花和高良姜纯挥发油的有效保护时间分别为0．5—1．0h、1．0～1．5h和2．0～2．5h。结论三种植物的挥发油具有用于研制驱蚊剂的潜力。     

临沂口岸医学媒介生物本底调查名录

目的 为全面了解临沂口岸医学媒介生物的种群组成及分类地位,为本口岸媒介生物防治及卫生口岸创建提供科学依据.方法 1998年以来,坚持对所辖区域媒介生物的监测和调查.结果 鉴定出媒介昆虫2纲9目21科51属83种.结论 通过调查与鉴定,建立了临沂口岸医学媒介生物本底名录,为今后实施口岸媒介生物监测和控制提供了便利.     

媒介昆虫的显微成像新技术

UV-C光学共聚焦显微图像系统集成了光学和数字图像分析技术,特别适用于采集非平面样品图像(高度变化范围超出了显微镜景深范围),它彻底解决了传统光学显微镜成像时高倍数与大景深不能共存的问题,使样品不同高低部位都能清晰     

应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒

目的建立应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的技术体系,并初步检测所制备病毒的感染活力。方法采用杆状病毒生产系统包装rAAV8-EGFP,经高效液相色谱法提取并纯化病毒,实时荧光定量PCR测定病毒滴度,通过观察绿色荧光蛋白的表达强度来检测rAAV8-EGFP对HEK-293细胞的感染活力。结果实时荧光定量PCR显示成功制备高滴度rAAV8-EGFP,滴度可达1.5×1012vg/ml,100ml摇瓶共得到1.5×1013vg rAAV8-EGFP病毒颗粒;感染后的HEK-293细胞具有较强的绿色荧光蛋白表达。结论应用杆状病毒系统成功制备高滴度、高活力的重组腺相关病毒,为后续研究奠定了基础。