2型猪链球菌层粘连蛋白结合蛋白的原核表达及免疫原性检测

目的表达2型猪链球菌（Streptococcus suis2,S.suis2）层粘连蛋白结合蛋白（Lmb）并检测其免疫原性。方法 PCR检测lmb基因在不同血清型S.suis中的分布。将S.suis2中国强毒株05ZYH33的lmb基因克隆至表达载体pET32a,转化大肠杆菌E.coliBL21,IPTG诱导表达,His亲和层析柱纯化重组蛋白。Western blot检测Lmb的免疫原性。结果 lmb基因存在于大多数S.suis血清型中。诱导表达并纯化后获得较高纯度的重组蛋白。重组Lmb能够和感染05ZYH33全菌的猪恢复期血清反应。结论 lmb基因在S.suis不同血清型中广泛分布,Lmb在细菌感染宿主过程中表达,可以作为疫苗开发的候选分子。     

铁皮石斛居群差异的研究（Ⅰ）——植物体形态结构的差异

目的：比较分析广西，贵州，云南三省区的铁皮石斛主要居群形态结构的差异。方法：运用光镜对铁皮石斛茎进行比较解剖。结果：将采集到的我国铁皮石斛主产区的主要居群分为二种类型：F型和H型。F型植株的茎相对短而柔软，具粘性，适宜加工成铁皮枫斗；其中广西西林居群和云南广南居群茎的表皮具有较丰富的蜡质，不具下皮层，横切面上维管束密度小，维管束内外侧纤维群不发达，茎尤为柔软，是加工铁皮枫斗的优质居群。H型植株的茎较长，质地较硬，粘性差，不适宜加工成铁皮枫斗。结论：F型和H型居群铁皮石斛茎的形态结构具有明显差异，弄清铁皮石斛居群差异对指导铁皮石斛的采收、加工以及大面积人工繁殖具有重要意义。     

人穿孔素C端肽段的放射诱导表达

目的 观察克隆的人穿孔素(perforin,PFN)羧基端肽段在肺癌细胞SPC-A1中的放射诱导表达及其对该细胞的杀伤活性.方法 用PCR方法获取hPFN-C基因片段,将该基因片段克隆到含放射诱导启动子的真核表达载体pcDNA3.1( )/Egr-1,脂质体介导转染SPC-A1细胞.放射诱导表达后,RT-PCR、免疫细胞化学方法检测该基因片段在SPC-A1中的表达.MTT法检测该基因片段的表达产物对SPC-A1细胞的杀伤活性.结果 成功获取hPFN-C基因片段,构建了放射诱导表达的真核表达载体,转染SPC-A1细胞后,免疫细胞化学法证实目的蛋白出现在细胞质中,而未照射的细胞则没有hPFN-C基因表达. MTT法检测显示,与对照组相比,有hPFN-C 表达的SPC-A1细胞存活率仅为0.657.结论 成功构建hPFN-C基因片段的放射诱导表达载体,它在SPC-A1细胞中获得可控性表达,其表达产物对该细胞具有较强的杀伤活性.     

72例肝炎患者TT病毒DNA检测及部分基因序列分析

目的 了解肝炎患者中的TTV的感染情况并对部分分离株进行基因分型。方法 设计通用引物，采用半套式聚酶链反应检测肝炎患者血清标本中TTVDNA，并对部分PCR产物进行直接测序和序列分析。结果 在72例不同肝炎患者血清中，共检出TTVDNA阳性血清39份，总检出率为54.16%.其中,在非甲-非庚型肝炎患者中,TTVDNA阳性率为87.5%;在甲-庚型肝炎患者TTVDNA的阳性率(50.0%).对4株TTV序列分析结果显示,它们与日本分离株TA278、NA004、TKB555、PT3最高的同源性分别为97.7%、99.1%、96.8%、91%。经系统发育分析。其中有1株属G1型，有3株属G2型。结论 本次研究的肝炎人群中，TTV感染率较高，。感染的TTV颁发于G1及G2两个不同的基因型，TTV可能是非甲-非庚肝炎致病因素之一。     

京大戟的化学成分研究

目的研究京大戟的化学成分,为寻找新的抗肿瘤活性成分以及为大戟质量标准研究提供合适对照品。方法用95%乙醇提取,硅胶柱色谱分离纯化,根据理化性质和光谱数据分析确定结构。结果分得8个化合物,分别鉴定为正十八烷醇(octadecanol,Ⅰ)、3-甲氧基-4-羟基反式苯丙烯酸正十八醇酯(octadecanyl-3-methoxy-4-hydrox-ybenzeneacrylate,Ⅱ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅲ)、正三十烷酸(triacontanoic acid,Ⅳ)、2,2′-二甲氧基-3,3′-二羟基-5,5′-氧-6,6′-联苯二甲酸酐(2,2′-dimethoxy-3,3′-dihydroxy-5,5′-oxo-6,6′-biphenylformic anhydride,Ⅴ)、大戟醇(euphol,Ⅵ)、tirucallol(Ⅶ)、京大戟素(euphpekinensin,Ⅷ)。结论化合物Ⅰ、Ⅳ、Ⅵ和为首次从京大戟中分离得到。     

辐射诱导性自杀基因在胰腺癌细胞中的表达

目的 利用辐射敏感的早期生长反应基因1(Egr-1)启动子驱动单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK),观察其在胰腺癌细胞中的表达效果.方法 以细菌内同源重组法构建含绿色荧光蛋白(GFP)做标志基因的TK基因的腺病毒载体pAdEgr-1-TK,转染人胰腺癌细胞系PC-3 60Co-γ射线照射后,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析各不同照射剂量组TK基因的mRNA表达.Western印迹法分析60Co-γ射线照射后转染pAdEgr-1-TK细胞中TK蛋白质的表达量.结果 重组腺病毒载体pAdEgr-1-TK转染胰腺癌细胞系PC-3,不同剂量60Co-γ射线照射后,经RT-PCR半定量分析,TK mRNA表达结果分别为0 Gy(67.3±2.1)%、5 Gy为(89.3±1.0)%、7.5 Gy为(114.7±5.7)%、10 Gy为(140.5±3.1)%、15 Gy为(134.5±4.0)%、20 Gy为(117.4±3.4)%,各照射组TKmRNA表达均明显高于对照组0 Gy(均P<0.01),尤以剂量为10.0 Gy时最为显著.Western印迹分析结果分别为0 Gy为(5.4±0.7)%,5 Gy为(7.6±0.9)%,7.5 Gy为(21.5±1.5)%,10 Gy为(35.7±1.4)%,15 Gy为(32.1±1.2)%,20 Gy为(28.8±1.5)%,60Co-γ射线照射可明显提高转染pAdEgr-1-TK细胞中TK的蛋白质表达量,且蛋白质表达量与辐射剂量呈正相关性.结论 放射敏感性启动子Egr-1基因可驱动TK自杀基因在胰腺癌细胞中高效表达.     

一种新免疫调节因子:B淋巴细胞刺激因子

1999年，Morre、Shu、Schneider及Mukhopadhyay等不同小组在搜索EST数据库和人嗜中性粒细胞、单核细胞cDNA文库时，先后发现了一种新的细胞因子，根据不同的功能命名如下：BEyS（B lymphocyte stimulator）、THANK（a TNF homologue that activates apoptosis，nuclear factor-κB，and c-JUN NH2-ter-minal kinase）、BAFF（B cell activating factor belonging to the TNF family）、TALL-1（TNF and apoptosis ligand-related leukocyte expressed ligand 1）以及zTNF4和TNFSF20等。     

铁皮石斛的组织培养研究

本文通过实验总结出组培铁皮石斛各个阶段的培养基。诱导培养基N_6 BA2.5mg/L;N_6 BA2.5mg/L IBAO.5mg/L;分化培养基N_6 BA1.5mg/L NAA1.2mg/L 5％香蕉汁;生根壮苗培养基N_6 NAA2.5mg/L 1O％土豆汁。     

用于生物人工肝的肝细胞组织化培养

肝细胞是生物人工肝支持系统的核心。组织化培养的肝细胞具有比常规培养肝细胞更好的功能。本文就近年来肝细胞组织化培养的发展作一综述 ,并归纳了肝细胞组织化研究的发展方向     

聚ADP-核糖聚合酶家族的生物学活性及与糖尿病关系的研究进展

聚ADP-核糖聚合酶（PARP）是存在于大多数真核细胞中的蛋白质翻译后修饰酶，其功能主要为催化聚ADP核糖基化，对维持基因组完整性和细胞生存有重要作用。现对PARP家族成员的结构和功能，以及PARP与糖尿病的关系作一综述。