白血病细胞系中抑癌基因PTEN启动子区甲基化状态检测及其去甲基化研究

目的 探讨抑癌基因PTEN表达沉默的机制及诱导PTEN表达对白血病细胞的作用.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific PCR,MSP)检测白血病细胞系HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937、NB4、K562中PTEN基因启动子区域甲基化状态;用甲基化转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理白血病细胞,MSP检测甲基化状态的改变、RT-PCR检测PTEN mRNA水平的改变、瑞特染色观察细胞形态学改变、膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)标记染色检测细胞凋亡.结果 检测的白血病细胞系中HL-60、Nalm-6、Raji、KG-1a、U937细胞PTEN基因显示超甲基化状态,而NB4和K562细胞显示低甲基化状态;5-Aza-CdR处理HL-60和Nalm-6细胞后,PTEN基因甲基化降低、mRNA表达水平则逐渐增高,并呈剂量依赖性,细胞出现凋亡现象.结论PTEN基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活或沉默,甲基化抑制剂可以诱导PTEN表达,并引起白血病细胞凋亡.     

维持性血液透析患者指、趾端坏疽1例

1 病例摘要 患者女性，52岁，维持性血液透析9年，出现指、趾端坏疽6月。患者10年前出现视力模糊、眼球痛、畏光流泪、异物感及飞蚊症，曾经一度失明，于外院诊断为“白塞氏病”，给予雷公藤、强的松治疗后好转。9年前出现血肌酐、尿素氮升高，经肾穿刺病理诊断为慢性间质性肾炎，“感冒”后肾功能迅速恶化，进展至尿毒症期，开始规律血液透析治疗。     

探究一次性球囊宫颈扩张器联合缩宫素在宫颈不成熟足月引产中的应用价值

目的探究一次性球囊宫颈扩张器联合缩宫素在宫颈不成熟足月引产中的应用价值。方法选取2017年1月～2018年7月就诊于我院的宫颈不成熟足月引产产妇84例,按随机数字表法将产妇分为观察组和对照组各42例。对照组行缩宫素引产,观察组使用一次性球囊宫颈扩张器联合缩宫素引产。比较两组促宫颈成熟效果、引产至临产时间、总产程、分娩方式和新生儿情况。结果与对照组相比,观察组促宫颈成熟有效率较高,差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,观察组引产到临床时间、总产程较短,差异有统计学意义(P0.05);观察组顺产率高于对照组,剖宫产率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组新生儿1min时Apgar评分为9.13±0.61分,略低于对照组的8.96±0.82分,但差异无统计学意义(P0.05);对照组中新生儿窒息发生率略高于观察组,但差异无统计学意义(P0.05)。结论在宫颈不成熟足月引产中使用一次性球囊宫颈扩张器联合缩宫素,可有效促进宫颈成熟,缩短引产至临产时间与产程,提高顺产比例,降低新生儿窒息发生率,安全性较高。     

定量RT-PCR方法检测衰老大鼠肾脏PAI-1基因的表达

目的采用SYBR 绿色荧光染料Ⅰ(SYBR GREENⅠ)定量PCR法,对来源珍贵的微量组织中的基因进行检测,并对其可行性及适用性进行研究. 方法取24月龄的老年大鼠、3月龄青年大鼠各6只,提取其肾脏组织的RNA, 采用SYBR GREEN I实时检测的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测纤溶酶系活化剂抑制物-1(PAI-1)基因的表达,并用磷酸甘油醛脱氢酶(G3PDH)作为外参. 结果标准曲线有良好的相关性(R2>0.99),PCR产物特异,将PAI-1的拷贝数与G3PDH的拷贝数相除,青年大鼠肾脏PAI-1表达水平为(1.27±0.90)×10-3,老年大鼠肾脏PAI-1表达水平为(3.84±2.00)×10-3,两者比较,差异有显著性(P<0.05). 结论只要严格控制PCR反应条件,SYBR GREENⅠ定量PCR法可以作为一种良好的定量PCR方法对来源珍贵的微量组织的基因表达进行检测,并证实了老年大鼠肾脏PAI-1表达水平明显增加.     

内隐职业刻板印象及其信息加工机制的研究

目的 探讨内隐职业刻板印象、内隐职业偏爱及其加工机制,更好地指导大学生和在职人员的职业选择和发展.方法 内隐联想测验和纸笔版反应与不反应联想任务.结果 ①性别主效应不显著(F-0.649,P=0.424),任务主效应显著(F=1141.930,P=0.000),性别和任务的交互作用不显著(F=0.109,P=0.743...     

体内诱导多能干细胞与机体的损伤修复及再生

细胞单向分化的假说在近年来受到挑战,越来越多的证据表明,高度分化的细胞可以在一定条件下转化为干细胞。而近来发现了两例小鼠体内由机体损伤干细胞缺失引起的高度分化细胞去分化形成干细胞的证据。这表明,哺乳动物可以不依赖外源干细胞的导入,而是由自体细胞的去分化成为多能性干细胞、增殖与再分化而起到修复损伤的作用。对于自体去分化再生机制的探究可能会引起一些具有挑战性的观念,这对于损伤修复,治疗肿瘤和众多难愈疾病有着重要的理论意义和极大的应用前景。     

肾移植受者BK病毒感染的单中心回顾性研究

目的通过对肾移植术后受者的血清和尿液中BK病毒(BK virus,BKV)DNA拷贝数量的检测,探讨肾移植受者术后BK病毒的发病规律及其与临床转归的关系。方法对接受同种异体肾移植术的80例患者进行血清和尿液中BK病毒DNA拷贝数量的检测,利用SV40大T抗原免疫组化染色,对接受移植肾穿刺活检的80例病理学标本进行回顾研究,对诊断BK病毒相关性肾病(BK virus associated nephropathy,BKAVN)患者进行随访及病史复习。结果 BK病毒血症发生率为8.75%,BK病毒尿症发生率为37.5%,BKAVN发生率为2.5%,术后尿和血BK病毒DNA拷贝的变化趋势一致,术后6~12个月是BK病毒感染高峰期。结论 BKV感染对肾移植的效果有重要的影响,一旦出现BKVAN极易导致移植肾功能丧失;对肾移植受者应该进行BKV早期监测,减少免疫抑制剂的剂量治疗BKVAN的效果较好。     

规律性尿激酶封管预防血液透析中心静脉导管栓塞的护理研究

随着血液透析技术水平的不断提高,尿毒症病人的存活时间越来越长.对于维持性血液透析病人而言,良好的血管通路是其赖以生存的基本条件,对于自身血管条件差无法建立动静脉内瘘的病人,进行中心静脉插管越来越多的成为病人进行透析的通路选择.但有诸多因素影响导管的通畅,其中导管栓塞是影响管路通畅、降低使用寿命和影响透析充分性的主要因素.常规各透析中心采用肝素液封管,但不能降低中心静脉导管栓塞的发生,用大剂量的尿激酶溶栓治疗效果是肯定的,但同时增加了出血的副反应[1].因此,我中心采用随机对照方法,观察定期使用尿激酶封管对预防导管栓塞的作用.     

静脉滴注免疫球蛋白对肾移植患者群体反应抗体的影响(英文)

背景:很多方法可降低群体反应抗体致敏患者的群体反应抗体水平,其中血浆置换或免疫吸附法脱敏法是比较常用的,但这些方法副作用较多。目的:拟观察肾移植前静脉滴注免疫球蛋白对肾移植患者血清群体反应抗体的影响。设计、时间及地点:以2003-01/2006-11重庆医科大学附属第一医院肾移植中心的57例等待肾移植的群体反应抗体致敏患者为对象的前后对照,病例分析。对象:群体反应抗体致敏患者57例,年龄21～65岁,群体反应抗体值平均(46.7±29.5)%。方法:所有患者在接受肾移植前以5g/d剂量静脉滴注免疫球蛋白,2周为1个疗程。2个疗程之间间隔1周。在给予静脉滴注免疫球蛋白前和疗程结束立即应用酶联免疫吸附反应方法各检测1次血清群体反应抗体水平。主要观察指标:血清群体反应抗体水平。结果:应用免疫球蛋白后群体反应抗体降为非致敏84%(48/57),完全未降5%(3/57),部分下降11%(6/57)。用药后群体反应抗体下降0～61%,平均(38.4±16.3)%。57例患者肾脏移植前淋巴细胞毒试验<10%,均未出现超急性排斥反应。结论:静脉滴注免疫球蛋白预治疗是理想的降低肾移植致敏性的方法,且副作用小。     

AML1-ETO对p21 WAF1/CIP1启动子转录活性作用的研究

目的观察AML1-ETO融合基因对p21WAF1／CIP1基因启动子转录活性的影响，探讨AML1-ETO促进白血病发生的机制。方法构建p21WAF1／CIP1基因启动子的报告质粒，与AML1-ETO、AML1b和AML1a的表达质粒共转染非洲绿猴肾细胞系CV—1细胞，测定荧光素酶的活性，分析AML1-ETO、AML1b和AML1a对p21WAF1／CIP1基因启动子转录活性的影响。结果在CV—1细胞中，AML1-ETO对p21WAF1／CIP1基因启动子的转录具有明显的抑制作用，在pCMV5-AML1-ETO的剂量为1000ng时，p21WAF1／CIP1启动子的转录活性下降为对照组的（19±4）％，这种作用具有序列特异性和剂量依赖性；AML1b和AML1a对p21WAF1／CIP1基因启动子转录活性的抑制作用不明显，在剂量为1000ng时，p21WAF1／CIP1启动子的转录活性分别下降为对照组的（61±16）％和（594-16）％。结论AML1在与ETO形成融合基因后，其产物由于ETO蛋白能够更有效地募集转录共抑制复合物，其转录抑制活性要比AML1a和AML1b更强；外源的AML1-ETO对p21WAF1／CIP1的作用可能也与细胞系有关。