SCARB2蛋白提高人肠道病毒71型对转基因小鼠的感染力

目的 细胞实验证实人清道夫受体B2（hSCARB2）是人类EV71的受体,本研究拟通过建立人SCARB2转基因小鼠,建立感染能力更高的小鼠模型.方法 构建CMV启动子的SCARB2转基因表达载体,通过显微注射法建立C57BL/6J背景的人SCARB2转基因小鼠,PCR筛选阳性首建鼠.通过Western Blot和免疫组化检测目的 蛋白在各组织中的表达.EV71感染转基因小鼠后,通过实时荧光定量PCR和免疫组化检测目的 蛋白表达对病毒感染的促进效果.结果 人SCARB2蛋白主要在转基因小鼠的骨骼肌和脑组织中表达,与野生型小鼠相比,转基因小鼠组织中的病毒载量显著提高4到5倍.结论 人SCARB2的体内表达可促进EV71对转基因小鼠的感染,该蛋白在体内具有EV71受体功能.     

荧光定量PCR检测土拨鼠肝炎病毒核酸方法的建立

目的建立土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus,WHV)核酸的荧光定量PCR(Real-time PCR)检测方法,应用于土拨鼠肝炎病毒模型的研究。方法分别根据土拨鼠肝炎病毒核心抗原(WHcAg)和表面抗原(WHsAg)的DNA序列设计13对扩增引物,从中筛选无非特异性扩增及引物二聚体且灵敏度高的引物,用于土拨鼠血清中WHV DNA的Real-time PCR检测。建立感染土拨鼠肝炎病毒的土拨鼠血清中WHV核酸的Real-timePCR检测方法。结果根据WHsAg基因的5’端设计的一对引物WHVSF1与WHVSR1,检测灵敏度可达1×101拷贝/μL,病毒拷贝数与Real-time PCR Ct值的标准曲线的R2值为0.997,且电泳未见明显非特异性条带及引物二聚体。结论建立了土拨鼠血清中WHV DNA的Real-time PCR检测方法,该方法为进一步研究土拨鼠肝炎病毒模型奠定了基础。     

H7N9禽流感病毒小鼠感染动物模型的建立

目的 观察贯叶连翘提取物经口给药9个月对Beagle犬长期毒性反应.方法 选用Beagle犬28条,随机分为4组,每组6～8条,雌雄各半.以0.3、0.55、1.0 g/kg剂量的贯叶连翘提取物（胶囊）经口给药,每日1次,每周6次,连续38周,停药恢复期8周.在整个实验期间,每日观察受试动物的一般活动状况,每周称体质量1次,并于给药前、给药10、20、30、38周、停药8周时,作心电图（Ⅱ导联ECG）检查,前肢抽血作血液学和血清生化学检测,收集尿液作尿常规检验,给药20、38周、停药8周时,处死部分动物取主要脏器和组织称重,并作组织形态学检查.结果 在给药10、20、30、38周和停药恢复期8周时,各剂量组和对照组动物一般活动状况、心电图检查、血液学和尿常规检测均未见有明显的异常改变.但在给药20、30周时高剂量组动物ALP、给药38周时中、高剂量组TBIL升高（P＜0.05或P＜0.01）,届时,高剂量组动物肝脏系数上升（P＜0.05）.病理检查亦显示,给药20周时,高剂量组雌、雄各有1条动物肝细胞轻度颗粒变性,雌性有1条肾曲管轻度颗粒样变性;给药38周时,仅高剂量组动物少量肝细胞或肾近曲小管有轻度颗粒样变性.其余各剂量组动物各时点的血液学和血清生化学指标、脏器系数、组织形态学变化与相应对照组比均无显著性差异（P＞0.05）.结论 贯叶连翘提取物连续给药20、38周时,0.55、1.0 g/kg组Beagle犬肝、肾组织形态和功能呈现轻度的毒性反应,但停药后可随时间而逐步恢复正常,其毒性反应程度与给药剂量和服用持续时间呈正相关.贯叶连翘提取物经口给Beagle犬的安全剂量为0.3 g/kg,相当临床治疗抑郁症拟用剂量的40倍.     

新型H7N9病毒在同居小鼠中的传播途径

目的 进一步了解新型H7N9流感病毒的致病性、传播能力以及通过何种途径进行传播。方法 H7N9病毒感染小鼠后与同居小鼠合笼，研究同居小鼠的临床变化指征、病毒复制情况、病毒在组织中的分布以及病理变化。以同居小鼠分泌物接种其他小鼠，观察同居小鼠通过何种途径传播病毒。结果 H7N9病毒可以在肺组织、肠组织和脑组织中复制，并可以在同居小鼠中传播。H7N9病毒感染小鼠其咽、眼分泌物以及粪便均具有感染性，其中尤以咽拭子的传播风险最高。结论 H7N9病毒可以不通过适应就感染小鼠，并引起小鼠间传播。被感染小鼠分泌物具有感染性。     

东亚钳蝎毒素对大鼠实验性大肠癌的抑制作用

前阶段研究证实蝎毒素对体外培养大肠癌细胞有显著抑制作用.为进一步探索其对大肠癌发生发展的影响,利用盐酸二甲基肼诱发Wistar鼠大肠癌的动物模,通过分组、分阶段研究蝎毒素对大肠肿瘤发生过程和组织病理改变的作用.结果发现蝎毒素可以降低诱癌率和诱癌鼠死亡率.20周内单纯诱癌组死亡率达32.6%,蝎毒灌胃组和腹腔注射组分别为23.0%和20.51%,其中蝎毒注射组死亡率与单纯诱癌组相比有显著差异有显著差异(P<0.05).20～31周单纯诱癌组诱癌率为81.82%,蝎毒注射组为44.00%,两组差异显著(P<0.01).大肠癌核仁组成区染色结果发现单纯诱癌组AgNOR颗粒明显增加而蝎毒注射组显著减少,第核AgNOR颗粒数两组有显著差异(P<0.05).结果提示蝎毒素具有去除DMH毒性,降低实验肿瘤的发生,抑制大肠肿瘤细胞rRNA活性,直接抑杀肿瘤细胞的作用.     

东亚钳蝎毒抑制大鼠实验性大肠癌细胞核中Ag-NOR的定量研究

东亚钳蝎毒是东亚钳蝎毒腺细胞分泌的一种含多种生物活性成份的小分子肽,对大肠癌细胞有显著抑杀作用。为了进一步探讨蝎毒素对大肠癌细胞抑杀的作用机制,我们对蝎毒素对 Wistar 鼠实验性大肠癌细胞核 Ag-NOR 的影响进行了研究。     

东亚钳蝎毒抑制大鼠实验性大肠癌细胞核中Ag-NOR的定量研究

东亚钳蝎毒是东亚钳蝎毒腺细胞分泌的一种含多种生物活性成份的小分子肽，对大肠癌细胞有显抑杀作用。为了进一步探讨蝎毒素对大肠癌细胞抑杀的作用机制，我们对蝎毒素对Wistar鼠实验性大肠癌细胞核Ag-NOR的影响进行了研究。     

人肠道病毒71型动物模型研究进展

人肠道病毒71型是婴幼儿手足口病的致病原之一,其严重的并发症可导致神经系统疾病,甚至死亡,是近期威胁中国儿童健康的因素之一.目前尚无临床疫苗可以预防该病毒感染,而EV71的动物模型是进行致病机理、疫苗评价和药物等研究的基础.本文对EV71的两种常用动物模型:小鼠和猕猴(Macaca mulatta)模型进行了描述,并对其在研究中的应用给与概括,为研究者选择合适的动物模型提供了依据.     

乙型病毒性肝炎动物模型的比较分析

全世界有近2.4亿慢性乙型病毒性肝炎(HBV)患者,尽管已有HBV疫苗和抗病毒治疗药物的产生,但乙肝仍是严重威胁人类健康的传染病。由于缺乏理想的动物模型,使得对于乙型病毒性肝炎的研究受到局限。本综述按照现有HBV动物模型进行对比分析,探讨各种模型病原学和病理与病理生理学应用的区别,以期为科研人员在今后的HBV研究中更好的利用相关资源,提供参考。     

肺炎克雷伯氏菌特异性抗原的筛选与鉴定

目的寻找肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)血清学检测用特异性抗原。方法双向电泳分离K.pneumoniae总蛋白,通过免疫印迹(Western blotting)与常见病原菌的多抗反应筛选特异性抗原蛋白,原核表达该蛋白并用ELISA法验证。结果获得K.pneumoniae的双向电泳图谱。寻找Western blotting中与K.pneumoniae自身多抗反应而不与与其它病原菌多抗反应的蛋白,质谱鉴定为酸性磷酸酶(Acid phosphatase,GI:238894261)。经表达纯化并以酶联免疫吸附试验(ELISA)验证,证明该蛋白作为包被抗原的灵敏度高,特异性强。结论 K.pneumoniae酸性磷酸酶是适用于该菌感染检测特异性抗原蛋白。