骨桥蛋白反义寡核苷酸抑制卵巢癌细胞SKOV3粘附侵袭的实验研究

目的研究骨桥蛋白（OPN）反义寡核苷酸（antisense oligonucleotide,ASODN）抑制人卵巢癌细胞株SKOV3粘附侵袭及诱导凋亡的作用。方法用脂质体将骨桥蛋白ASODN转染卵巢癌细胞SKOV3。实验分3组：对照组,随机序列寡核苷酸（random oligonucleotide,rODN）组和ASODN组。通过荧光定量RT-PCR、流式细胞仪检测法、黏附细胞计数法和Boyden小室法分别测定骨桥蛋白mRNA和细胞表面骨桥蛋白的蛋白表达及癌细胞黏附力、侵袭力的变化。Annexin V染色法、DNA ladder法和Hoechst染色法检测凋亡。结果转染后ASODN组骨桥蛋白mRNA的相对定量比值较对照组显著降低（1.95±0.81 vs 5.26±0.66,P〈0.01）;流式细胞仪检测骨桥蛋白表达结果显示,转染后平均荧光指数明显降低,细胞表面骨桥蛋白的蛋白表达下降（P〈0.01）;转染后ASODN组黏附力和侵袭力均较对照组显著下降（黏附细胞百分数值为16.97±1.60 vs 36.14±1.16,穿透聚碳酸酯膜细胞数为44.67±2.08 vs 83.67±4.51,P值均〈0.01）;经骨桥蛋白ASODN作用后SKOV3细胞发生凋亡。而rODN组上述各指标较对照组无明显变化。结论骨桥蛋白的表达与黏附侵袭能力密切相关,反义寡核苷酸能有效抑制卵巢癌细胞株SKOV3细胞骨桥蛋白基因的表达,从而抑制蛋白质的合成,降低其黏附侵袭能力,并能够诱导凋亡。     

骨桥蛋白在肝包虫动物模型外囊壁中的表达

目的:观察动物模型肝包虫囊壁情况,研究骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)在小鼠肝细粒棘球蚴外囊壁中的分布特征及表达相关因素,并探讨其意义.方法:肝包虫动物模型的制作、HE染色观察、免疫组化观察53例小鼠肝细粒棘球蚴外囊壁中OPN及巨噬细胞的表达与分布.结果:HE染色外囊的着色明显较周围巨噬细胞带深,不存在渐变的过程;83%肝细粒棘球蚴外囊壁中有不同程度OPN表达,且集中分布于肝包虫纤维囊壁(外囊),与外侧巨噬细胞带比较有显著差异(P＜0.01).结论:在动物模型上证明了外囊与肝实质间存在可分离间隙,OPN主要分布在肝细粒棘球蚴外囊,并在其形成过程中起重要作用.     

OPN在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的研究OPN在HCC中的表达与临床病理特征的关系。方法选取48例HCC手术切除的新鲜标本和10例正常肝组织,10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,每个标本行连续切片,厚4μm。应用SABC免疫组化法,以OPN单克隆抗体对HCC组织切片进行染色。用X2检验、t检验和Fisher确切概率法,对OPN在HCC中的表达及其临床病理特征的关系进行研究。结果OPN在HCC癌组织中的阳性率为50.00%,明显高于癌旁及正常肝组织(P<0.01)。OPN在高、中、低分化HCC中评分是0.67±1.63、2.14±1.81、2.20±1.74,低分化明显高于高分化(p<0.05)。OPN在有转移与无转移HCC中的评分是2.64±1.84、1.25±1.74,有转移者明显高于无转移者(p<0.01)。OPN与其它病理特征无关。结论OPN在HCC癌组织中的表达明显升高,病理分化差者表达明显升高,且伴有转移者高于不伴转移者,提示OPN可能促进了HCC的发展和转移。     

骨桥蛋白与肿瘤

骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是一种磷酸化糖蛋白，是骨骼和牙齿矿化细胞外基质的主要组成成分。它不仅参与骨的吸收与形成，而且与肿瘤的浸润、转移密切相关，甚至有人认为，它既是肿瘤诊断的标记物，又可作为监测肿瘤预后的指标。关于OPN与肿瘤转移及血管生成的研究不多，作者对此作一综述。     

川芎嗪对PDGF-BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖和骨桥蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨川芎嗪对血小板源生长因子(PDGF BB)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及骨桥蛋白mRNA表达的影响。方法:大鼠胸主动脉平滑肌细胞体外培养,PDGF BB刺激VSMC ,采用MTT法和流式细胞仪测定川芎嗪对VSMC增殖的影响,逆转录聚合酶联反应(RT PCR)测定VSMC骨桥蛋白mRNA的表达水平。结果:川芎嗪可显著地抑制VSMC增殖(P <0 .0 1) ,使细胞生长停滞于G0 /G1期;PDGF BB诱导骨桥蛋白mRNA呈高表达,川芎嗪下调了这种表达。结论:川芎嗪能抑制体外的VSMC增殖,提示川芎嗪可能作为防治血管成形术后再狭窄的一种药物。     

肿瘤转移相关分子骨桥蛋白的表达调控研究进展

骨桥蛋白(Osteopontin,OPN),又称Secreted phosphoprotein,SPP1;Bone sialoprotein Ⅰ,BNSP或BSP Ⅰ;T-lymphocyte activation 1,ETA-1.OPN最初被作为一种存在于矿化组织的蛋白被分离;后来的研究发现它存在于各种体液中,可由破骨细胞、巨噬细胞、T-细胞、腔上皮细胞及血管平滑肌细胞等多种细胞分泌;参与炎症细胞、免疫、骨组织矿化、血管再生、组织修复等病理和生理过程.近年文献大量提及的OPN在恶性肿瘤形成、侵袭和转移的肿瘤演进中的特殊作用,本文在此简要综述OPN的表达调控研究进展.     

溶石颗粒剂对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响

目的：通过测定用药前后肾脏骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的变化,来阐明民间验方溶石颗粒剂防治肾结石的作用机制。方法：采用乙二醇、氯化胺法致大鼠肾结石,同时每天1次ig给予溶石颗粒剂5.8,11.6,17.4 g·kg^-1,实验全程21 d。每7 d作以下测定：尿标本以EDTA法测定钙浓度,比色法测定草酸浓度；肾组织HE染色,以免疫组化法检测大鼠肾骨桥蛋白的表达。结果：模型组大鼠肾OPN的表达明显增加,与溶剂对照组相比P<0.01,其中21 d模型组OPN的表达最高,OPN的表达为溶剂对照组的1.4倍（0.281 3/0.201 8）；溶石颗粒剂各剂量组均能明显抑制大鼠肾结石模型OPN的表达（P<0.05）,且呈现明显的量效关系；溶石颗粒剂各剂量组能减轻大鼠肾脏草酸钙结晶程度,显著降低大鼠尿钙和草酸浓度(P<0.01)。结论：溶石颗粒剂可以抑制大鼠肾结石模型中OPN的表达。     

骨软骨瘤和骨恶性肿瘤KAI-1和OPN的表达及临床病理意义

目的骨软骨瘤和骨恶性肿瘤组织中KAI-1和OPN表达水平的临床病理意义。方法20例骨软骨瘤和55例骨恶性肿瘤经脱钙后常规制作石蜡包理切片,KAI-1和OPN染色方法为SP免疫组化法。结果20例骨软骨瘤KAI-1阳性19例(95.0%)、OPN阳性2例(10.0%),55例骨恶性肿瘤KAI-1阳性28例(50.9%)、OPN阳性30例(52.7%),差异均存在高度显著性(P<0.01);KAI-1和OPN在不同类型骨恶性肿瘤中阳性率差异无显著性(P>0.05);组织学分级I级和未转移骨恶性肿瘤KAI-1表达阳性率明显高于组织学分级II级、III级及转移病例(P<0.05或P<0.01),组织学分级I级和未转移病例OPN表达阳性率明显低于组织学分级III级和转移病例(P<0.05);KAI-1和OPN在骨恶性肿瘤中表达呈高度负相关。结论KAI-1和OPN表达可能是反映骨恶性肿瘤发生、进展、生物学行为及预后的重要标记物。     

骨桥蛋白和CD44v6在子宫内膜癌中的表达及其意义

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)和CD44拼接变异体6(CD44v6)在子宫内膜癌中的表达及其与子宫内膜癌临床分期、病理类型和组织学分级的关系.方法 采用免疫组化法检测48例子宫内膜癌标本中OPN和CD44v6的阳性表达情况,分析其与子宫内膜癌的临床分期、病理类型和组织学分级的关系.结果 不同临床分期的子宫内膜癌患者,其OPN和CD44v6阳性率间差异均无统计学意义(P＞0.05);不同病理类型的子宫内膜癌患者,其OPN和CD44v6阳性率间差异均有统计学意义(P＜0.05);不同组织学分级的子宫内膜癌患者,其OPN阳性率间差异有统计学意义(P＜0.05),CD44v6阳性率间差异无统计学意义(P＞0.05).OPN与CD44v6的表达无相关性.结论 OPN和CD44v6的表达可能与子宫内膜癌的病理类型和组织学分级有关.     

骨桥蛋白与卵巢恶性肿瘤相关性研究进展

骨桥蛋白（osteopontin，OPN）是细胞外基质中具有多种生物学活性的分泌型磷酸化糖蛋白。大量研究证实，骨桥蛋白能作用于肿瘤发生发展的多个环节，参与细胞信号转导，促进细胞黏附和迁移，与肿瘤细胞生长、侵袭、转移密切相关。近年认为，骨桥蛋白是一种新的肿瘤标志物，其与妇科肿瘤尤其是卵巢恶性肿瘤的关系也日益受到关注。骨桥蛋白在卵巢癌中的表达、外周血浓度及受体水平，均可作为无创性肿瘤筛查的指标，从而作为新的标志物用于卵巢癌的早期诊断和预后监测。在基因转录水平上抑制骨桥蛋白及其主要受体可能成为肿瘤治疗的新的理想靶点。