川芎嗪对血管平滑肌细胞增殖抑制作用的探讨

目的观察川芎嗪（TMP）对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的抑制作用，并探讨其作用机制。方法利用大鼠颈动脉血管内膜损伤可引起VSMC增殖、血管增厚为实验模型。行增殖细胞核抗原（PCNA）、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原组织化学检测，纤维母细胞生长因子（FGF）、血小板源生长因子（PDGF）、Bcl-2、Pax、C—myc原位杂交检测及TUNEL染色。结果内皮损伤后VSMC增殖，血管管腔面积减少；低剂量TMP治疗组有轻度抑制VSMC增殖的作用，使管腔面积有所增加；TMP高剂量抑制作用明显增强。高剂量TMP组和假手术组PCNA、Ⅳ胶原、PDGF的表达低于模型组；TMP低剂量组与模型组相比无显著差异。高、低剂量TMP组和假手术组的Ⅰ型胶原、FGF、Bcl-2、c—myc和TUNEL的表达低于模型组。高、低剂量TMP组和假手术组的Bax表达高于模型组。结论TMP能抑制平滑肌细胞Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原、FGF、PDGF表达；影响Bcl-2、c—myc、Bax基因表达，促进血管平滑肌细胞凋亡；达到抑制平滑肌细胞增殖的作用。     

川芎嗪对高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞游离钙的影响

目的研究川芎嗪对自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响。方法以体外培养的自发性高血压大鼠和正常血压对照大鼠的心肌细胞及动脉平滑肌细胞为实验模型，用Fura-2荧光法检测细胞内游离钙浓度。结果自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度显著高于正常血压对照大鼠。川芎嗪对自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度具有显著抑制作用，并呈现量效关系。较高剂量的川芎嗪对正常血压对照大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度也有抑制作用；而较低剂量的川芎嗪不仅无抑制作用，还使正常血压对照大鼠心肌细胞游离钙浓度显著升高。结论川芎嗪具有钙离子拮抗剂的特性，其在高血压防治中的作用，值得进一步探讨。     

一氧化氮对大鼠主动脉血管平滑肌细胞骨桥蛋白表达的影响

目的 观察一氧化氮(NO)对培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞骨桥蛋白表达的影响.方法 用含10%小牛血清的DMEM培养液体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,随机分为对照组和不同浓度NO供体S-亚硝基-N-乙酰青霉胺(0.5、1、2、5mmol/L)干预组,应用反转录一聚合酶链反应及Western blot技术结合光密度扫描分析,观察NO对血管平滑肌细胞的骨桥蛋白表达的影响.结果 不同浓度NO供体S-亚硝基-N-乙酰青霉胺均明显抑制血管平滑肌细胞的骨桥蛋白mRNA和蛋白的表达,且具有剂量依赖性促进作用.结论 NO能抑制血管平滑肌细胞骨桥蛋白的表达.     

烟草烟雾刺激通过骨桥蛋白对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响及骨桥蛋白(osteopontin,Opn)在其中的作用。方法体外培养VSMC,用不同浓度CSE刺激,并且设置对照组,采用MTT法检测CSE对大鼠VSMC增殖活性的影响,用免疫细胞化学检测CSE作用后VSMC中骨桥蛋白和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果①MTT结果示2.5%、5%CSE组吸光度(A值)增高,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。10%、20%CSE组A值与对照组比较,差异无显著性意义(P0.05)。对照组VSMC中有少量Opn和PCNA蛋白表达。2.5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达增加。5%CSE组Opn和PCNA蛋白表达达到高峰,此后逐渐下降。10%、20%CSE组仍高于高于对照组。②Opn抗体可显著抑制5%CSE诱导的MTTA值和Opn、PCNA蛋白表达增加。结论①低浓度CSE(2.5%、5.0%)对大鼠VSMC的增殖逐渐增加,高浓度(10%、20%)时增殖趋势逐渐下降。②CSE可通过增加Opn的表达促进大鼠VSMC的增殖。     

PDGFR-β反义寡核苷酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　研究血小板衍化生长因子 β受体 (PDGFR- β)反义寡核苷酸 (AODN)对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响 .方法　建立大鼠血管平滑肌细胞体外增殖模型 .将细胞分为反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组和空白对照组 ,其中反义组按浓度又分为 1,2 .5 ,5 ,10和 15μmol· L- 1 5小组 .在加药后 2 4,48和 72 h以流式细胞仪测定细胞周期 ,免疫细胞化学染色分析细胞核增殖抗原的表达 ,MTT(四唑盐 )比色法测定细胞增殖活力 .结果　 10μmol·L- 1 PDGFR- β AODN干预 VSMC48h后 ,处于 DNA合成前期 (G0 / G1 )细胞数分数 (0 .70 )高于空白对照组 (0 .0 7,P <0 .0 5 ) ;PCNA免疫细胞化学染色发现以 5～ 15μmol· L- 1PDGFR- β AODN干预 48h后 VSMC各组胞核染色强度为2 0 .4%～ 6 .4%明显弱于空白组 (73.8% ) ,正义组 (72 .9% )和无义组 (75 .6 % ) (P<0 .0 5 ) ;10μmol· L- 1 PDGFR-β AODN作用 48h后 VSMC的增殖抑制率为 6 6 .7% ,高于正义组 (8.1% ) ,错义组 (11.8% )和 5 μmol· L- 1 AODN组 (4 5 .4% ) (P<0 .0 5 ) ;同时 10μmol· L- 1 AODN组 48h增殖抑制率与 2 4h(9.1% )相比明显增加 (P<0 .0 5 ) .结论　 PDGFR- β AODN对VSMC增殖有明显抑制作用 ,并且呈时间和浓度依赖性 .     

血小板源生长因子-α受体结构域切除对肺血管平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨从血小板源生长因子－α（PDGF－α）受体水平阻断对肺血管平滑肌增殖的影响。方法：将组织贴块法培养的肺动脉平滑肌细胞（VSMC）分别施加小、中、大剂量的受体结构域切除的PDGF－α受体腺病毒重组体Ad5CMV-PaRtr(ACP),通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察细胞不同时相的增殖曲线；采用流式细胞学技术观察不同干预条件下VSMC细胞周期的变化。结果：中、大浓度ACP对细胞增殖有明显抑制作用。中、大剂量ACP干预后，VSMC生长明显受抑，波峰减弱或消失，第7－9天生长曲线才呈现上升趋势。在中浓度的ACP作用下，加入PDGF－BB不能促进VSMC的增殖。ACP干预前后，VSMC增殖周期中各期细胞构成发生显著的变化，以G0＋G1期细胞增多，S＋G2＋M期细胞减少为特征。与对照组相比，各组的G0＋G1期细胞均有显著升高（P＜0．05）。小剂量与中剂量、中剂量与大剂量间G0＋G1期细胞有显著性差异（P＜0．05）。结论：ACP作为细胞增殖抑制剂，能在中、大剂量下明显抑制VSMC的增殖，可使G0／G1期细胞数明显增多，且与ACP有剂量依赖关系。     

血管舒缓素对PDGF诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨了血管舒缓素对血小板趋化生长因子（ＰＤＧＦ）诱导培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法 取ＳＤ大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行培养,传至５代后,分组观察ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦ＋血管舒缓素组、ＰＤＧＦ＋血管舒缓素＋缓激肽受体拮抗剂组等。干预因素作用于血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）,对＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）的掺入及原癌基因ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ的表达的影响。结果 １．ＰＤＧＦ可促进ＶＳＭＣ     

曲尼司特对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的:为探讨曲尼司特预防再狭窄的可能性,研究了曲尼司特对培养的大鼠主动脉平滑肌细胞(ASMC)增殖的影响。方法:以培养的大鼠 ASMC 为模型,应用~3H-TdR 掺入试验观察 ASMC 增殖情况。结果:曲尼司特呈剂量依赖性地抑制基础、血小板源生长因子(PDGF)和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的 ASMC DNA 合成,与相应对照组比较 P<0.05或 P<0.01。结论:曲尼司特能明显抑制 ASMC 增殖,对防治再狭窄可能有效。     

体外传代培养对大鼠血管平滑肌细胞OPN mRNA表达的影响

目的探讨体外传代培养对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）表型标志分子骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）mRNA表达的影响。方法选择未经培养传代的VSMCs和体外传代一至五代的VSMCs作对比研究。用RT-PCR法检测VSMCs中OPN mRNA相对表达水平。结果体外培养至第一代时,VSMCs的OPN mRNA表达量较原代VSMCs显著增高（P〈0.01）,且随传代代数的增加有逐渐增高趋势。结论 OPN在原代VSMCs中表达甚微,体外培养可促使VSMCs多量表达OPN,OPN为VSMCs合成表型标志分子,即体外培养可促使VSMCs从收缩表型转为合成表型。     

猪十二指肠类肝素对血管平滑肌细胞增殖的抑制

猪十二指肠类肝素（冠心舒）是一种富含硫酸基的硫酸多糖，对培养的兔主动脉平滑肌细胞增殖以结晶紫、ＭＴＴ染色和３Ｈ－ΤｄＲ掺入等方法测定显示明显抑制作用，作用强度与肝素相仿。同浓度的右旋糖酐对此无抑制作用，说明猪十二指肠类肝素抑制血管平滑肌增生与分子中所含硫酸基有关。猪十二指肠类肝素口服有效，抗凝效价又低于肝素，提示本品有可能用于防治动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄。     

莲心碱对内皮素促血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用内皮素建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型。用＾３Ｈ胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）参入法,流式细胞术,免疫细胞化学及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法,观察了莲心碱对血管平 肌细胞增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。结果发现：Ｌｉｅｎ能逆转内皮素所致的「＾３Ｈ」ＴｄＲ参入量增多,阻止血管平滑肌细胞由静止期进入ＤＮＡ合成期和有丝分裂期,并能逆转内皮素引起的ｃ－ｆｃｓ,ｃ－ｍｙｃ,ｃ－ｓｉｓ原癌基因相     

STUDY ON THE INHIBITORY EFFECT OF ANTISENSE ETAR OLIGODEOXYNUCLEOTIDES ON THE PROLIFERATION OF VASCULAR SMOOTH CELLS

Ｒ啨ｓｕｍ啨　　 Ｏｂｊｅｃｔｉｆ　Ｐｏｕｒ啨ｔｕｄｉｅｒｌ ｅｆｆｅｔｉｎｈｉｂｉｔｅｕｒｄｅｓｏｌｉｇｏｄ啨ｓｏｘｙｎｕｃｌ啨ｏｔｉｄｅｓｄｅｃｏｎｔｒｅｓｅｎｓｄｅｓｒ啨ｃｅｐｔｅｕｒｓｄ ｅｎｄｏｔｈ啨ｌｉｎｅＡ (ＯＮＤｓ ＲＥＴＡ)ｓｕｒｌａｐｒｏｌｉｆ啨ｒａｔｉｏｎｄｅｓｃｅｌｌｕｌｅｓｄｅｓｍｕｓｃｌｅｓｌｉｓｓｅｓｖａｓｃｕｌａｉｒｅｓ (ＣＭ ＬＶ) .　Ｍ啨ｔｈｏｄｅｓ　ＬｅｓＯＮＤｓ ＲＥＴＡ ｄｅｓｅｎｓ ,ｄｅｃｏｎｔｒｅｓｅｎｓｅｔｎｏｎａｐｐａｒｉ啨ｓｏｎｔ啨ｔ啨ｓｙｎｔｈ啨ｔｉ…     

不同低氧环境对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨不同低氧环境对大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖活性的影响.方法 将原代培养的大鼠PASMCs分为常氧组(21% O2,5% CO2)、低氧组(10% O2,85% N2,5% CO2)、缺氧组(1% O2,94% N2,5%...     

黄色素对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究黄色素（ＳＹ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及其作用机制。方法 以培养的家兔ＶＳＭＣ为材料，采用细胞计数和＾３２Ｐ掺入法，研究了ＳＹ对ＶＳＭＣ的增殖及ＶＳＭＣ中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性的影响。结果 ＳＹ对血清刺激的ＶＳＭＣ的增殖具有抑制作用，且呈剂量和时间依赖性。１．０ｇ／Ｌ达到最大抑制，抑制率为５４．６％，４ｄ（１．０ｇ／Ｌ ＳＹ）达到最大抑制，抑制率为５２．０％，超过４ｄ     

丹皮酚对人胎儿平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：观察丹皮酚（Ｐａｅ）以人胎儿主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用。方法：利用体外细胞培养技术,用人高脂血清造成平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的模型并通过ＭＴＴ测定、细胞计数及透射电镜下的细胞超微结构的观察等方法,观察了Ｐａｓ对人胎儿平滑肌细胞的保护作用。结果：人高脂血清可明显刺激人胎儿平滑肌细胞的增殖并引起其表型的改变,而Ｐａｅ可呈浓度依赖性地抑制平滑机细胞的平殖并可显著抑制高脂血清对ＳＭＣ的促增殖作用。结论：Ｐａｅ抗动脉粥样硬化的作用可能部分是由于抑制ＳＭＣ异常增殖的结果。     

G蛋白反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的影响

使用硫代修饰的Ｇ蛋白（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白）反义寡聚脱氧核苷酸（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ）作用于含２０％胎牛血清ＤＭＥ培养液培养基的血管平滑肌细胞（ｖＳＭＣ）。通过细胞计数和免疫细胞化学方法，观察了Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ对ｖＳＭＣ增殖和ＰＣＮＡ表达的影响。结果表明，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ联合应用能明显抑制ｖＳＭＣ增殖；免疫细胞化学分析亦显示ｖＳＭＣ中ＰＣＮＡ蛋白表达显著减少。而相同浓度的正义ＯＤＮｓ只有微小抑制作用。结果提示，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ有可能应用于防治临床血管活性物质依赖性细胞增生性疾病的研究。