肾母细胞瘤RASSF1A基因启动子区甲基化研究

目的了解肾母细胞瘤RASSF1A基因启动子区甲基化情况。方法手术获取9例肾母细胞瘤及瘤旁残留肾组织,提取DNA后用亚硫酸氢钠处理,巢式PCR扩增RASSF1A基因启动子区DNA片段,测序,检测启动子区甲基化情况。结果发现1例16个CpG岛位点中有10个存在甲基化(10/16),相应瘤旁残留肾组织无甲基化(0/16);在另1例瘤组织中检测到12个CpG岛位点存在甲基化(12/16),但仅有8个CpG岛位点与上例相同,另外4个位点不同。结论肾母细胞瘤中RASSF1A基因启动子区存在甲基化,与瘤旁残留肾组织甲基化情况有差别。     

胚胎干细胞向神经细胞分化的研究进展

胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)是由早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分离、抑制分化培养获得的多潜能细胞,具有发育分化的多潜能性和无限的自我更新能力,在一定条件下可定向诱导分化为某种类型细胞。ESC在体外培养扩增6个月以上仍能保持其多能性,可诱导分化为     

表没食子儿茶素没食子酸酚对β-淀粉样多肽损伤的星形胶质细胞的保护作用

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酚（EGCG）对异常蛋白β-淀粉样多肽（AB）损伤星形胶质细胞（AS）的保护作用，进一步探讨其作用机理。方法采用原代细胞培养技术，分离培养新生1d大鼠皮质AS，细胞纯化后，加入Aβ进行处理，随后加入不同浓度（0．1、1、5、10、25、50umol／L）的EGCG培养24h，观察细胞的形态学变化；MTT比色法进行细胞活性分析、AS中丙二醛（MDA）以及培养液中乳酸脱氢酶（LDH）含量的变化的检测；比较上述指标在损伤前后的变化。结果EGCG能够减轻Aβ对AS的损伤，抑制AS的MDA的产生，降低AS外液中LDH的含量，增强细胞的活性。结论EGCG能够抑制Aβ对AS的损伤作用，并且对其有神经保护作用，这种保护作用可能与其抑制Aβ引起细胞过度氧化有关。     

脊髓胶质细胞在小鼠骨癌痛形成中的作用

Objective To evaluate the role of gliocyte in the spinal cord in the development of bone cancer pain (BCP) in mice. Methods Forty male C3H/He mice aged 8-10 weeks weighing 18-22 g were randomly divided into 4 groups ( n = 10 each) : group I sham operation (group S) , group II BCP, group Ⅲ PBS and group IV minocyline (group M) . In group BCP, PBS and M, bone cancer pain was produced by injection of NCTC2472 fibrosarcoma cell suspension (2 x 105 cells) 10 μl into medullary cavity of calcaneus bone, while in group S, PBS solution 10 μl was injected instead of cancer cell suspension. In group PBS and M, PBS 5 μl and minocyline 5 μl (dissolved to 0.2 mmol/L in PBS)_were given IT immediately before cancer cell inoculation once a day for 11 consecutive days respectively. Mechanical pain threshold was measured at 1 d before cancer cell inoculation, and at 0, 3, 5, 7, 9 and 11d after cancer cell inoculation. Cold pain threshold was measured at 3, 7, 9 and 11d after cancer cell inoculation. The animals were killed after measurement of pain threshold and L4-6, segment of spinal cord was removed for determination of GFAP and CD11b expression by Western blot. Results Compared with group S, mechanical pain threshold was significantly increased at 3-11 d after cancer cell inoculation in group BCP and PBS, and at 3 and S d after cancer cell inoculation in group M, and cold pain threshold was significantly increased at 7-11 d after cancer cell inoculation, and expression of CD11b and GFAP was up-regulated in group BCP, PBS and M ( P < 0.05) . Compared with group BCP, mechanical pain threshold was significantly decreased at 3-11 d after cancer cell inoculation, cold pain threshold was significantly decreased at 7-11 d after cancer cell inoculation, and expression of CD11b and GFAP was down-regulated in group M ( P <0.05) . ConclusionThe activiton of gliocyte in the spinal cord is involved in the development of bone cancer pian in mice.     

第四脑室Schwann细胞瘤一例

患者男，18岁。以头晕3年，加重并行走不稳1个月，于2004年4月29日住院。查体：体表皮肤无咖啡斑，双眼底见视乳头水肿，有小脑性共济失调，Romberg征阳性，余无其他神经系统阳性体征。CT平扫见小脑蚓部一大的类圆形低密度占位。MRI见肿瘤位于第四脑室，类圆形、边界清楚、似有包膜。T1W1呈低信号，T2W1呈高信号，增强后呈混合密度，第三脑室、侧脑室扩大。术前诊断：髓母细胞瘤并脑积水。行枕下正中入路开颅肿瘤切除术，暴露小脑半球和扰大池并打开扰大池蛛网膜即见肿瘤，有包膜，血供少，部分呈囊性，完整切除。术中见肿瘤与硬脑膜、周围小脑、脑干、颅神经均无关。病理结果：Schwann细胞瘤。镜下见梭形瘤细胞呈束状排列，形成AntoniA，网状细胞稀疏分布形成Antoni B．     

星形胶质细胞源性因子对神经干细胞分化的实验研究

目的探讨星形胶质细胞源性因子对神经干细胞分化的影响。方法分离和培养新生大鼠脑组织的神经干细胞;采用差速贴壁法和振荡法分离纯化星形胶质细胞,用免疫细胞化学染色法,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记星形胶质细胞,进行细胞的纯度鉴定;将星形胶质细胞和神经干细胞在互不接触的情况下进行共培养,免疫荧光法观察神经干细胞分化后神经元特异性烯醇化酶(NSE)、GFAP和酪氨酸羟化酶(TH)的表达。结果纯化的星形胶质细胞GFAP抗体标记阳性,细胞纯度达98%;星形胶质细胞与神经干细胞共培养时,神经干细胞贴壁分化加快,NSE阳性细胞及TH阳性细胞明显多于对照组(P<0·05)。结论星形胶质细胞源性因子可快速诱导神经干细胞向神经元细胞、包括多巴胺神经元细胞分化,提示星形胶质细胞支持神经元发生。     

视网膜母细胞瘤的VEGF和NF-κB P65表达及意义

①目的　探讨血管生成因子VEGF和细胞核因子NF κBP6 5蛋白在视网膜母细胞瘤中的表达及其与视网膜母细胞瘤生物学行为的关系。②方法　应用免疫组织化学SABC法检测VEGF和NF κBP6 5蛋白在 36例视网膜母细胞瘤中的表达情况。③结果　NF κBP6 5在正常视网膜中呈阴性表达 ,VEGF在正常视网膜中呈弱阳性表达 ,而在视网膜母细胞瘤中两者均呈阳性表达。两者在肿瘤组织细胞中的表达与在正常组织细胞中的表达差异有显著性 (F =1 5 2、1 2 3,q =4 0 .1 1、2 7.2 0 ,P <0 .0 5 )。且VEGF在视网膜母细胞瘤视神经浸润组与未浸润组的表达之间也有统计学差异 (q =1 0 .5 3,P <0 .0 5 )。 ④结论　VEGF和NF κBP6 5均参与视网膜母细胞瘤的形成 ,且VEGF可能与视网膜母细胞瘤的浸润有关     

胶质细胞瘤诊断及介入治疗研究进展

MRI与超声技术在胶质细胞瘤的诊断中不断改进,增强了临床诊断价值.超选择血管内灌注化疗/放疗具有创伤小、局部疗效明显、不良反应较轻等优势,治疗上较重视抑制血管生成,以药物化疗为主,具有广阔应用前景.有待加强对药物作用机制、肿瘤复发机制方面的研究.降低诊断成本,提高新技术的准确性、可靠性,加强超选择血管内灌注与化疗药物配合使用的研究,在今后研究中具有重要意义.     

Holzer改良磷钼酸结晶紫染色法

神经胶质细胞是神经系统特有的组织成分,广泛分布于中枢神经及周围神经中,起着支持组织的作用。在中枢神经系统发生的肿瘤中,神经胶质细胞瘤最多.故神经胶质细胞染色主要用以诊断这类肿瘤。神经胶质细胞用常规 HE 染色,一般只能见到胞核及少许的胞浆,唯有特殊染色才能显示神经胶质细胞的全貌.组织固定:用10％甲醛溶液固定。Holzer 磷钼酸晶紫溶液配制:①0.5％磷钼酸水溶液20ml,95％酒精40ml,临用前将两液混合即可.②结晶紫0.5g,无水酒精2ml.氯仿8ml。此液配制后可长期保存,应注意防止挥发。③无水酒精2ml,氯仿8ml.④溴化钾10g,蒸镏水100ml。③苯胺4ml,氯仿6ml,冰醋酸1滴。操作: