蝎毒提取物对Lewis细胞及DU-145细胞转移的抑制作用

目的 观察蝎毒提取物对Lewis肺癌细胞肺转移和前列腺癌细胞株DU-145骨转移的抑制作用.方法 C57BL/6小鼠尾iv Lewis肺癌细胞(实验分模型组和给药组),裸鼠尾iv CM-DiI标记DU-145细胞(实验分模型组、对照组和给药组),给药组均每天ig给予蝎毒提取物300 mg/kg1次,C57BL/6小鼠给药12d,裸鼠给药24 d,模型组和对照组给予等量生理盐水,肉眼及镜检观察肺转移灶Lewis肺癌细胞肺转移情况,活体成像系统观察DU-145细胞骨转移的情况.在体外实验,免疫组化法检测Lewis细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达,免疫组化法和Westem blotting检测DU-145细胞MMP-9、NF-κB、基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)、IκB-α蛋白表达.结果 接种Lewis肺癌细胞后,蝎毒提取物组平均癌细胞肺转移灶数为3.2±1.2,而模型组为13.5±5.3,差异显著(P＜0.01).活体成像检测显示,接种DU-145细胞30d后,对照组未见荧光团,模型组8只裸鼠中有6只肩胛骨、骨盆、肋骨及胫骨显示有大量荧光团存在,蝎毒提取物组仅有3只裸鼠出现明显荧光团.免疫组化法和Western blotting检测显示,与对照组相比,蝎毒提取物给药后DU-145细胞MMP-9、NF-κB蛋白表达下调(P＜0.01),TIMP-1表达上调(P＜0.01),免疫组化检测亦显示IκB-α蛋白表达上调(P＜0.05).结论 蝎毒提取物抑制Lewis肺癌细胞肺转移和DU-145细胞骨转移,其作用是通过NF-κB和TIMP-1途径抑制MMP-9表达实现的.     

全蝎纯化液对大鼠静脉血栓形成TXB2、6-keto—PGFa的影响

目的观察全蝎纯化液对大鼠静脉血栓形成血栓素B2（TXB2）、6酮-前列腺素F1a（6-keto-PGF1a）的影响,阐述全蝎纯化液抗静脉血栓形成的作用机制。方法SD大鼠随机分为空白对照组、模型组与全蝎纯化液大、中、小剂量组,采用结扎大鼠腹腔主静脉造成静脉血栓模型,观察其对血栓重量及TXB2、6-keto—PGF1a等凝血指标的影响。结果全蝎纯化液大、中、小剂量组TXB。水平显著降低,6-keto—PGF1a水平明显上调,与空白对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）,而与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。全蝎纯化液各剂量组能明显降低大鼠静脉血栓的重量,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论全蝎纯化液具有明显的抑制血栓形成的作用,提示其作用机制可能与血管内皮损坏及TXB2、6-keto—PGF1a含量有关。     

二聚体蝎型探针荧光定量PCR快速检测志贺菌方法的建立及初步应用

目的 利用二聚体蝎型荧光探针法,建立一种可广泛应用且敏感、特异的检测志贺菌的荧光定量PCR技术。方法 根据编码志贺菌ipaH基因的核苷酸序列设计引物和荧光探针,采用基因重组技术构建用于志贺菌检测的定量标准品,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测志贺菌的二聚体蝎型探针定量PCR方法。结果 成功构建了志贺菌重组质粒标准品和志贺菌实时荧光定量PCR方法;通过特异性、敏感性、稳定性和重复性验证,结果表明具有较好的特异性、敏感性、稳定性和重复性;对比分离培养标本,二者符合率为100％;对比TaqMan方法,本方法具有更敏感、省时、成本低的特点。结论 建立了一种以二聚体蝎型荧光探针技术为基础的志贺菌荧光定量PCR检测法,为研制新型的检测试剂盒奠定了基础,可应用于食品卫生监管以及传染病诊断等。     

蝎毒素—A中枢镇痛作用的研究

研究蝎毒及其提取物的中枢镇痛作用。方法向大鼠中脑导水管周围灰质内微量注射蝎毒素，以热辐射甩尾法为指标，观察其中枢镇痛作用效果。结果向大鼠ＰＡＧ内匀速注射０．０１２５％－０．０５％ＳＶ－Ａ０．５μｌ即出现痕阈升高，２０ｍｉｎ达峰值，与对照组比较差异有显著性     

野生全蝎粉与酵解和酶解提取物抗肿瘤效果比较研究

目的:比较不同方法处理的野生全蝎粉提取物对三种癌细胞的抑制作用。方法:野生全蝎粉、发酵全蝎粉及未发酵粉分别经仿胃肠道酶解,醇、水提物的冻干粉用MTT法测定对肿瘤细胞的抑制率。结果:用单因素方差分析比较组间差异显著性,表明全蝎不同方法处理的醇、水提取物冻干粉对食管癌细胞、乳腺癌细胞、肺腺癌细胞的抑制率与空白组之间均有显著性差异,P0.05。结论:全蝎醇、水提物冻干粉对食管癌(Eca-109)、乳腺癌细胞(MCF-7)的生长有不同程度的抑制作用,全蝎酵后酶前、酶后提取物对乳腺癌细胞(MCF-7)的生长、全蝎的酵后酶前提取物及酶解物对肺腺癌细胞(A549)的生长均有不同程度的抑制作用。     

蝎毒活性多肽对内皮细胞释放PGI_2和NO的影响

目的　探讨蝎毒活性多肽 (SVAP)抗栓作用机制。方法　酶消化法培养人脐静脉内皮细胞 (HU VEC) ,放射免疫分析法测定HUVEC培养液中 6 Keto PGF1α的含量以反映PGI2 的变化 ,硝酸还原酶法测定NO的含量。结果　SVAP 1、5、10、2 0mg·L- 1均可明显增加HUVECPGI2 的释放 ,而SVAP 1、5mg·L- 1对NO的释放无明显影响 ,SVAP 10、2 0mg·L- 1可使NO释放量显著增加 ,PGI2 和NO释放量之间呈正相关。结论　SVAP抗栓机制可能与影响VEC合成或 (和 )分泌PGI2 ,NO以及NO与PGI2 二者之间协同及相互介导作用有关。     

李佃贵教授运用全蝎治疗萎缩性胃炎经验

对于慢性萎缩性胃炎的病机,中医界有着不同的认识,认为其病机主要为浊毒内蕴,其中又以浊毒内蕴,瘀血阻络最为常见。故提出了从浊、毒论治CAG的观点,并从临床研究观察,取得了满意的效果。治疗常在方剂中加入全蝎,取得了很好的疗效。     

蝎毒素Ⅳ尾静脉注入后的镇痛作用

大鼠中脑上端切断模型３０只，随机等分为Ａ、Ｂ、Ｃ３组，经尾静脉分别注入蝎毒素Ⅳ（ＳＶＣ－Ⅳ）１３０μｇ／ｋｇ，吗啡６００μｇ／ｋｇ及生理盐水，以大鼠缩腿潜伏期和屈肌反射为测痛指标，观察ＳＶＣ－Ⅳ尾静脉注入后的镇痛作用并与吗啡的作用进行比较。结果：Ａ组ＳＶＣ－Ⅳ注入后３０ｍｉｎ之内缩腿潜伏期明显延长，２０ｍｉｎ左右延长最明显，屈肌反射Ａ波波幅于１０～４０ｍｉｎ内明显受到压抑，２０ｍｉｎ左右最大Ａ波抑制率为（９６．１±８．９）％；Ｂ组吗啡注入后Ａ波波幅的压抑限于１０～４０ｍｉｎ，３０ｍｉｎＡ波最大抑制率为（８７．４±８．２）％；Ｃ组屈肌反射无明显变化。结果提示：ＳＶＣ－Ⅳ静脉给药具有镇痛作用，其镇痛作用强于吗啡。     

蝎毒素Ⅳ在大鼠脊髓中的镇痛作用及其机理的研究

蛛网膜下腔插管大鼠模型２５只，随机等分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ５组，分别经插管注入蝎毒素Ⅳ１μｇ／ｋｇ，纳络酮１６μｇ／ｋｇ＋蝎毒素Ⅳ１μｇ／ｋｇ，吗啡３２μｇ／ｋｇ，纳络酮１６μｇ／ｋｇ＋吗啡３２μｇ／ｋｇ，纳络酮１６μｇ／ｋｇ。以屈肌反射作为疼痛指标，观察蝎毒素Ⅳ在脊髓的镇痛作用及纳络酮对蝎毒素Ⅳ作用的影响并与吗啡进行对比观察。结果蝎毒素Ⅳ注入５～２０ｍｉｎ和９０～１２０ｍｉｎ内屈肌反射被显著抑制（Ｐ＜０．０１），表现为屈肌反射阈值升高及Ｃ波潜伏期延长；此种抑制不能被纳络酮消除。提示蝎毒素Ⅳ在脊髓具有一定的镇痛作用；其发挥镇痛作用的机制不同于吗啡。     

蝎毒对家兔心电图的影响

观察了山东泗水产东亚钳蝎对清醒家兔心电图的作用。结果表明静脉注射蝎毒溶液(0.75mg/kg)引起R—R间期显著延长(p<0.01),心率减慢,而对P—R间期和QRS波时程无明显影响。大剂量静注蝎毒出现窦房结活动抑制,房室传导阻滞,室性心律和心室内传导阻滞等心律失常。