石榴皮多酚对大鼠耳廓痤疮模型mTOR/HIF-1α/RORγt信号通路的影响

【摘要】 目的 探究石榴皮多酚对大鼠耳廓痤疮模型的抗炎作用及机制。方法 将36只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、石榴皮多酚低、中、高浓度组和阳性组,除空白组外,其余各组于大鼠双耳内侧面耳导管开口处均匀涂抹100%油酸,0.5 ml/次,1次/d,并于涂抹油酸的第21天开始在大鼠耳廓同一部位皮下注射痤疮丙酸杆菌液50 μl,1次/d,连续3 d,构建大鼠耳廓痤疮模型。肉眼观察提示造模成功后外用药物,石榴皮多酚组予不同浓度（质量分数分别为1.4%、2.8%、5.6%）石榴皮多酚软膏0.5 mg,阳性组予盐酸克林霉素凝胶0.5 mg,空白组及模型组予等量蒸馏水,2次/d,连续用药2周。末次用药24 h后,取腹主动脉血,ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素17（IL-17）水平;剪取大鼠耳廓模型处组织,HE染色观察各组皮肤组织病理学变化,免疫组化法检测局部组织中mTOR /HIF-1α/RORγt表达水平。对满足方差齐性的数据,采用单因素方差分析;对不满足的数据,采用Kruskal-Wallis H检验;两两比较采用LSD-t检验。结果 与模型组相比,石榴皮多酚组及阳性组大鼠耳廓造模处囊肿脱屑及痂皮明显改善,表皮角化改善,真皮层炎症因子浸润减少。IL-17水平在石榴皮多酚低浓度组（61.03 ± 5.99） ng/L、中浓度组（55.35 ± 2.24） ng/L、高浓度组（54.35 ± 4.29） ng/L、阳性组（48.11 ± 4.07） ng/L及空白组（42.10 ± 5.62） ng/L均明显低于模型组（70.24 ± 3.30） ng/L,t = 3.12、5.34、5.70、8.29、10.54,均P＜0.05。免疫组化显示,HIF-1α表达水平在石榴皮多酚低浓度组（0.29 ± 0.05）、中浓度组（0.29 ± 0.03）、高浓度组（0.33 ± 0.02）及阳性组（0.30 ± 0.01）均明显低于模型组（0.41 ± 0.04）,t值分别为4.89、5.50、3.62、5.21,均P＜0.05;RORγt表达水平在石榴皮多酚低浓度组（0.28 ± 0.02）、高浓度组（0.31 ± 0.04）均低于模型组（0.35 ± 0.02）,t值分别为3.68、2.18,均P＜0.05;各组间mTOR表达差异无统计学意义（P = 0.119）。结论 石榴皮多酚可以改善大鼠痤疮模型炎症反应,其机制可能与下调HIF-1α/RORγt信号通路有关。     

基于UHPLC-Q-TOF-MS技术研究炮制对白术芍药散中化学成分的影响4

目的 采用UHPLC-Q-TOF-MS技术结合多元数据统计分析方法,针对白术芍药散水煎液中的化学组成进行分析,同时与药材未经炮制即配伍入药的情况进行比较,探讨中药炮制过程对白术芍药散中化学成分的影响。方法 采用正、负离子扫描模式检测,利用Peakview 1.2软件鉴别样品中化学成分,结合MarkerView 1.2.1软件对炮制前后样品进行主成分分析并寻找两者的特征差异性成分。结果 正、负离子检测模式下共匹配出化学成分183种,通过t检验发现差异性化学成分34种,差异性成分的主要来源为陈皮和防风。结论 药材经过炮制配伍入药对于白术芍药散的化学组成具有显著性影响,古籍中所载白术芍药散应采用炮制品进行组方用药具有实际的客观原因与深刻的科学内涵。     

石榴皮乙醇提取物对临床分离菌株的抗菌作用及毒性试验研究

目的研究石榴皮乙醇提取液的体外抗菌作用和毒性。方法采用抑菌环试验和营养肉汤稀释法以及动物试验法进行了实验室观察。结果含石榴皮生药150 g/L的乙醇提取液对结核分枝杆菌、蜡状芽孢杆菌、肺炎克雷伯菌等临床分离菌株和枯草杆菌黑色变种、金黄色葡萄球菌等标准菌株的抑菌环直径均大于7 mm。石榴皮乙醇提取物对白色念珠菌的最低抑菌浓度为25 g/L。小鼠急性经口LD50值大于5000 mg/kg,石榴皮提取原液对家兔皮肤刺激试验指数为0.13,属于轻度刺激性。结论石榴皮乙醇提取液具有良好的体外抗菌作用,属无毒级物质,皮肤刺激性较轻。     

陈皮水提物指纹图谱的化学计量学分析及与糖尿病认知功能障碍的谱效关系

目的:建立陈皮水提物的HPLC指纹图谱,并研究其与糖尿病大鼠认知功能的谱效关系。方法:采用HPLC建立21批陈皮水提物的指纹图谱,流动相乙腈(A)-0.1%的磷酸(B)梯度洗脱,检测波长270 nm;采用指纹图谱软件中的相似度评价,SPSS 24.0二维聚类分析和SIMCA 14.1主成分分析对结果进行分析;采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg·kg^-1)复制糖尿病大鼠模型,模型复制成功后给予陈皮水提物灌胃,定期检测空腹血糖值,诱导第12周Morris水迷宫检测实验大鼠的空间学习记忆能力,灰色关联度分析和偏最小二乘回归分析研究谱效关系。结果:确定了陈皮水提物中25个共有峰,鉴定出5种物质,并且将21个不同品种、产地的陈皮分成了2类;与模型组比较,灌胃陈皮水提物的各组大鼠空腹血糖下降,认知能力得到改善;灰色关联分析及最小偏二乘回归分析谱效关系表明,19,15,4,17,6号峰与糖尿病大鼠认知功能关联性较大。结论:不同品种、产地之间的陈皮水提物存在一定的差异,通过化学计量学可以方便、快捷的对不同产地的陈皮水提取物质进行全面的质量评价,并且陈皮水提物可降低糖尿病大鼠的空腹血糖值及改善认知能力,其发挥作用是多种有效成分共同起效的结果,其中19,15,4,17,6号峰是与糖尿病大鼠认知功能密切相关的成分。     

陈皮、青皮中4种黄酮成分的比较研究

目的比较浙江、湖北、广东产陈皮、青皮药材中橙皮苷、柚皮苷、川陈皮素和橘皮素的量。方法用甲醇超声提取药材,HPLC法测定,采用Waters xbridge C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.5%醋酸水,梯度洗脱(0~20 min,10%~25%乙腈;20~35 min,25%~70%乙腈;35~38 min,70%~95%乙腈);体积流量1m L/min;柱温30℃;检测波长283 nm。结果陈皮、青皮药材中4种黄酮类成分均以橙皮苷含有量为最高,柚皮苷含有量最低;浙江和湖北产陈皮和青皮中橙皮苷的含有量均符合《中国药典》标准,但两地的青皮中川陈皮素和橘皮素的量要远大于陈皮。广东新会产陈皮和青皮中橙皮苷的含有量均偏低,但它们的川陈皮素和橘皮素的含有量相差不大。结论陈皮和青皮中黄酮类成分含有量的差异可用于解释它们功效之间的区别。     

陈皮“陈久者良”之黄酮类成分增加原因探究

研究陈皮"陈久者良"之黄酮类成分增加的原因。采用显微与分子鉴定方法对陈皮样品表面分离纯化真菌进行鉴定;应用HPLC对陈皮霉变前后芸香柚皮苷、陈皮苷、川陈皮素与桔皮素4种黄酮类成分的变化规律进行了定量研究;采用紫外分光光度法测定了陈皮霉变前后总黄酮含量变化;应用逆向思维对筛选出的真菌进行反接培养,筛选出与黄酮类物质变化密切相关菌株。最终从8批次陈皮样品中共分离鉴定出25株真菌,分属于2属5种,分别为普通青霉、朱黄青霉、桔青霉、黄曲霉和黑曲霉,同时,陈皮霉变后黄酮类成分含量增加,其中主要影响黄酮类成分增加的菌株为黑曲霉。因此,陈皮"陈久者良"有一定的科学道理,其黄酮类成分的增加与表面污染黑曲霉等真菌的代谢活动相关。     

HPLC测定陈皮-枳壳药对提取物中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量

目的:建立陈皮-枳壳药对提取物中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量测定方法。方法:采用HPLC,AgilentHypersill C18(4.0 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸(24∶76)为流动相,流速1 mL.min-1,检测波长283 nm,柱温40℃。结果:柚皮苷、橙皮苷和新橙皮分别在6.05～60.5,4.34～43.4,7.14～71.40 mg.L-1线性关系良好(r均>0.999 5);加样回收率分别为98.65%,98.66%,100.78%,其RSD分别为2.01%,1.52%,2.11%;重复性RSD分别为2.41%,1.56%,2.52%(n=6)。结论:该方法简便可行,重复性好,结果准确可靠,可用于陈皮-枳壳药对提取物中柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量测定。     

陈皮及青皮本草考证

对陈皮、青皮进行本草考证。经考证后认为,陈皮、青皮虽来源相同,但二者各有所长。     

陈皮粥促进妇科手术术后肛门排气的临床研究

目的研究陈皮粥对妇科手术术后肛门排气的作用。方法将80例行妇科腹部手术的患者随机分为两组：观察组（40例）在术后12小时给予陈皮粥饮食;对照组（40例）在术后12小时给予半流质全粥饮食。观察两组术后肛门排气时间、术后焦虑程度、腹胀情况、术后改普食天数、总住院天数及手术天数。结果观察组术后肛门排气时间为（34．58±9．35）h,对照组为（47．73±9．85）h,两组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。术后焦虑程度、腹胀情况、普食时间,观察组优于对照组,患者总住院天数及手术后住院天数,两组差异无统计学意义。结论陈皮粥能有效地促进妇科手术术后肛门排气。     

正交试验优选陈皮挥发油的最佳提取工艺条件

目的确定舒胃宁中陈皮挥发油的最佳大生产提取工艺。方法采用正交试验法对陈皮挥发油的提取工艺条件进行优选,以挥发油得率和乳化比值为评价指标。结果陈皮挥发油的最佳提取工艺为药材粉成粗粉、加6倍量水、浸泡1h、提取6110结论最佳提取工艺可行且节约成本。