HPLC-MS同时测定人血浆中吡格列酮及其活性代谢产物的浓度

 目的建立高效液相色谱质谱联用测定人血浆中吡格列酮及其活性代谢产物M-Ⅲ(酮类衍生物)和M-Ⅳ(羟化衍生物)的方法。方法采用WatersXTerraTN C₁₈色谱柱(2.1mm×150mm,3.5μm),Phenomenex C₁₈保护柱,柱温50℃,流动相:乙腈-30mmol·L^-1醋酸铵溶液(含0.1%的甲酸和0.05%的三氟醋酸)(35:65),流速0.22mL·min^-1。质谱采用电喷雾电离源正离子模式(ESI⁺),选择性监测质荷比(m/z)357.4(吡格列酮),358.2(内标),371.5(M-Ⅲ),373.2(M-Ⅳ)的准分子分子离子峰;血浆样品经盐酸酸化后,采用叔丁基甲醚-氯仿提取,内标法定量。结果吡格列酮,M-Ⅲ和M-Ⅳ分别在11.16～1748.60,3.33～520.50,5.00～687.50ng·mL^-1内线性良好(r≥0.9997),最低检测浓度分别为2.90,1.10,1.20ng·mL^-1,3个化合物的方法回收率均在90%-110%范围内,日间和日内RSD皆小于15%。结论本方法操作简单,灵敏准确,稳定性好,适用于临床吡格列酮治疗药物监测,药动学及其药物相互作用的研究。     

色素上皮衍生因子抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞转化生长因子β1、纤连蛋白和Ⅳ型胶原的表达

随着葡萄糖浓度的增加,人肾小球系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)、纤连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)的表达显著增加(P＜0.01).在30 mmol/L的高糖条件下,40～160 nmol/L的色素上皮衍生因子(PEDF)显著抑制TGF-β1表达,呈剂量依赖性(P＜0.01);5～40 nmol/L的PEDF也剂量依赖性地抑制FN和ColⅣ的表达(P＜0.01),提示PEDF可能通过其抗纤维化的作用延缓糖尿病肾病的进程.

Abstract：

The expressions of transforming growth factor β1 (TGF-β1), fibronectin (FN), and collagen Ⅳ in human mesangial cells were augmented with increased concentrations of glucose.Pigment epithelium-derived factor (PEDF) at concentrations of 40-160 nmol/L significantly inhibited TGF-β1 expression in a dose-dependent manner(P＜0.01).PEDF at concentrations of 5-40 nmol/L significantly decreased FN and collagen Ⅳ expressions in a dose-dependent manner(P＜0.01) ,suggesting that PEDF may play a salutary role in diabetic nephropathy by its antifibrogenic activity.     

71例肿瘤化疗致3~4级骨髓抑制的分析

目的：了解肿瘤科化疗致3~4级骨髓抑制不良反应的特点及相关因素，为临床合理用药提供参考。方法：选取某院2016年因化疗致3~4级骨髓抑制的住院肿瘤患者71例，分别从性别与年龄、药物种类、疾病类型、骨髓抑制类型及时间特点、化疗周期对抑制率的影响等多个因素进行回顾性分析。结果：3~4级骨髓抑制患者中男性多于女性，以41~60岁的中年人为主；药物以多西他赛、顺铂、吉西他滨为主，骨髓抑制的外周血象主要表现为白细胞及血小板下降；头颈部肿瘤所占比例最高，为67.7%；三系细胞开始下降时间和低值持续时间各不相同；白细胞及血小板最低值的发生率在化疗第4周期达到最大。结论：3~4级骨髓抑制的发生与多种因素有关，临床药师应该做好不良反应的报告和监测工作，减少反应的发生。     

透明质酸、Ⅲ型前胶原及Ⅳ型胶水平与肝纤维化程度的相关性研究

目的分析血清纤维化指标透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶(ⅣC)水平与肝纤维化程度的相关性。方法回顾性分析广西壮族自治区百色市人民医院2014年1月至2015年12月收治的肝病患者200例作为研究组,另选取同期健康体检者200例作为健康对照组,分别检查两组对象血清纤维化各项指标,并进行比较。结果研究组患者血清HA、PCⅢ、ⅣC水平均明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05);研究组中肝病程度越重各项指标水平增加越明显,差异有统计学意义(P0.05);肝纤维化分期越高,血清HA、PCⅢ、ⅣC水平越高,差异有统计学意义(P0.05)。结论血清纤维化指标HA、PCⅢ、ⅣC水平能够明显反映肝纤维化的程度,3项指标与肝纤维化程度呈正相关,对临床诊断具有重要价值。     

固定效应方差分析中四种离差平方和的定义与探讨

目的系统介绍并探讨固定效应方差分析中四种离差平方和计算方法,为正确进行方差分析提供参考。方法介绍四种离差平方和的原理,结合实例展示具体计算过程和它们相互间的联系,并用SPSS和SAS软件验证。结果对相关理论和具体计算方面都给出了较详尽的过程。结论方差分析应根据数据特征选择离差平方和的计算方法。     

维格列汀的合成研究进展

维格列汀是一种二肽基肽酶Ⅳ（DPP-4）抑制剂,它是由Novartis公司研发的新型降糖药。该药物通过降低胰高血糖素的浓度降低血糖,在用药安全性方面具有显著优势,应用较为广泛,临床上主要用于治疗2型糖尿病。本文综述近年来文献报道的维格列汀的合成方法,并评述其优缺点。     

急性染镉对大鼠心肌细胞闰盘超微结构和连接蛋白43表达的影响及黄芪甲苷的拮抗作用

目的:观察急性染镉对大鼠心肌细胞闰盘超微结构和连接蛋白43(Cx43)表达的影响,探讨黄芪甲苷的保护机制.方法:SD大鼠随机分为正常组、镉处理组、镉加黄芪甲苷处理组,取心室肌组织,分别作光镜、透射电镜观察和免疫组织化学检测.结果:与正常组相比,镉组心肌细胞连接蛋白43的表达量明显降低,心肌纤维和闰盘超微结构破坏严重;而镉加黄芪甲苷组心肌细胞连接蛋白43的表达量较镉组显著增加,心肌纤维和闰盘超微结构的损伤也明显减轻.结论:镉能破坏心肌细胞闰盘超微结构,影响连接蛋白43的表达及分布,黄芪甲苷能在一定程度上拮抗镉对心肌细胞闰盘超微结构和连接蛋白43的毒性损伤.     

α2－巨球蛋白活性检测方法的建立与优化

目的：建立α2－巨球蛋白（α2－macroglobulin ,α2－M）活性检测方法,检测Cohn组分Ⅳ中α2－M的活性。方法α2－M可与胰蛋白酶相互作用形成“α2－M－胰蛋白酶复合物”,利用酶标仪检测出“α2－M－胰蛋白酶复合物”与小分子底物Na－苯甲酰－DL－精氨酸－对硝基酰胺盐酸盐（ Na－benzoyl－DL－arginine 4－nitroanilide hydrochloride ,BAPNA）显色反应后的光密度值（410 nm）,根据建立的血浆α2－M活性标准曲线,定量计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2－M的活性。结果通过对实验体系中几个关键实验条件进行优化,建立了血浆α2－M活性标准曲线,并计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2－M活性的平均值为1．578 PU／ml。结论以正常人混合血浆作为参考标准品,用发色底物法检测Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2－M的活性,方法简便易行,为α2－M制备过程中活性测定提供了实验基础。     

黄芪甲苷通过促进小胶质细胞/巨噬细胞M2型极化抑制大鼠脑缺血后炎症反应

目的: 研究黄芪甲苷对大鼠脑缺血后小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2极化及炎症反应的影响。方法: 将48只大鼠随机分为手术对照组、模型对照组和黄芪甲苷组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型。黄芪甲苷组造模后即刻腹腔注射黄芪甲苷（40 mg/kg）,随后1次/d,连续给药3 d。各组术后第1、3天采用改良的神经损伤严重程度评分（mNSS）和角试验进行神经功能评价;术后第3天采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染料（TTC）染色检测脑梗死体积;实时逆转录PCR检测M1型小胶质细胞/巨噬细胞表面标志物CD86、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达,以及M2型小胶质细胞/巨噬细胞表面标志物CD206、精氨酸酶1（Arg-1）、类几丁质酶3样分子1/2（YM1/2）及抗炎因子IL-10、TGF-β的mRNA表达;免疫荧光双标记法检测脑缺血周边区CD16/32/Iba1和CD206/Iba1的表达。结果: 与模型对照组比较,黄芪甲苷组mNSS分值降低、右转次数减少（P < 0.05或P < 0.01）,脑梗死体积减小（P < 0.01）,M1型小胶质细胞/巨噬细胞标志物CD86、iNOS、TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达下调（均P < 0.01）,M2型小胶质细胞/巨噬细胞标志物CD206、Arg-1、YM1/2、IL-10和TGF-β的mRNA表达上调（均P < 0.01）,脑缺血区CD16/32⁺/Iba1⁺细胞数量减少（P < 0.05）,CD206⁺/Iba1⁺细胞数量增加（P < 0.01）。结论: 黄芪甲苷对大鼠脑缺血损伤有保护作用,可能与促进小胶质细胞/巨噬细胞从M1型向M2型转化、抑制炎症反应有关。     

重组人肝再生增强因子对5/6肾切除大鼠肾组织MMP-9、TIMP-1及Collgen-Ⅳ表达的影响

目的探讨重组人肝再生增强因子(rhALR)是否可以通过影响基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)及Ⅳ型胶原(Collgen-Ⅳ)的表达,来延缓肾小球硬化。方法雄性SD大鼠分为假手术组、对照组及rhALR组,以rhALR对5/6肾切除所致慢性肾衰竭大鼠进行干预。结果与假手术组比较,对照组肾小球硬化指数增大,Collgen-Ⅳ、TIMP-1表达增加,MMP-9表达减少(P均<0.05);外源性给予rhALR能降低TIMP-1表达,增加MMP-9表达,减轻Collgen-Ⅳ的沉积,改善肾小球硬化(P均<0.05)。结论 rhALR可通过上调MMP-9/TIMP-1比例减少Collgen-Ⅳ积聚而改善肾小球硬化,保护残肾功能。