镉对大鼠血睾屏障的损伤及黄芪甲苷的保护作用

目的观察黄芪甲苷和SB203580对镉致大鼠血睾屏障破坏及相关蛋白表达改变的保护效应,探讨黄芪甲苷的保护机制。方法 21只成年雄性SD大鼠随机分为7组:单纯镉组[0.1%氯化镉腹腔内注射,1mg/(kg·d)],镉+黄芪甲苷组[镉剂量同上,同时注射黄芪甲苷,10mg/(kg·d)],镉+SB203580组[镉剂量同上,同时注射SB203580,100μg/(kg·d)],以上各组又分为连续处理5d和10d两个时间组,对照组腹腔内注射等量生理盐水。各实验和对照组动物均为3只。取睾丸做光学显微镜、电子显微镜观察以及免疫组织化学染色和Western blotting检测。结果 HE染色观察对照组支持细胞核染色较浅且不规则,镉组支持细胞内有空泡形成,镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组未见明显形态异常。免疫组织化学染色观察对照组闭锁小带-1蛋白(ZO-1)、紧密连接蛋白-11(claudin-11)阳性产物在生精上皮靠近基底部表达。镉组ZO-1、claudin-11阳性产物表达均显著降低(P0.05),镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组阳性产物表达低于对照组但明显高于镉组(P0.05)。超微结构观察对照组血睾屏障紧密连接形态完整,呈连续的电子密度较深致密线,镉组血睾屏障紧密连接及支持细胞均见不同程度破坏,镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组破坏程度较相应处理时间镉组为轻。Western blotting结果显示,镉组磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)水平明显增强(P0.05),镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组pp38MAPK水平虽高于对照组,但较镉组明显减弱(P0.05)。结论镉致大鼠血睾屏障ZO-1、claudin-11表达降低,紧密连接超微结构损伤,黄芪甲苷具有保护作用,其保护机制与抑制p38MAPK磷酸化有关。     

镉对培养大鼠睾丸支持细胞的损伤及黄芪的拮抗作用

目的:探讨镉对培养大鼠睾丸支持细胞的损伤及黄芪的保护作用.方法:对照组和经镉、镉加黄苠处理的原代培养大鼠睾丸支持细胞用于波形蛋白、E-钙黏蛋白免疫组织化学检测、细胞内钙离子浓度测定及电镜观察.结果:镉处理后2种蛋白阳性产物表达较对照组减弱.镉加黄芪组阳性产物较对照组减弱但明显强于镉组.对照组、镉和镉加黄苠组细胞内钙离子浓度分别为(81.773±3.711)、(161.6024±1.978)和(104.278±1.963).镉处理后支持细胞超微结构受损明显,部分细胞核异染色质凝聚或核碎裂,胞质空泡化.镉加黄芪组细胞破坏较轻.结论:镉对培养支持细胞具有明显的毒性作用,而黄苠可以拮抗镉对支持细胞的损伤.     

实验性病毒性心肌炎时穿孔素和连接蛋白43表达的相关性

目的：探讨病毒性心肌炎时穿孔素和心肌细胞缝隙连接蛋白43表达的关系。方法：应用免疫组织化学EnVision法对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌组织中穿孔素、连接蛋白43的表达进行观察。结果：正常小鼠心肌中未见穿孔素阳性表达，连接蛋白43在心肌闰盘中呈阳性表达。心肌炎组织中部分浸润的炎细胞穿孔素呈阳性表达。在穿孔素阳性表达外，连接蛋白43表达明显减弱甚至阴性。结论：在病毒性心肌炎时穿孔素直接影响到连接蛋白43的正常表达，是引起连接蛋白43阴性表达及异常表达的主要因素之一。     

雌激素改善卵巢切除合并慢性铝中毒对大鼠心脏Cx43表达和金属元素变化的影响

目的 探讨雌激素治疗卵巢切除合并慢性铝中毒大鼠,对心脏间隙连接蛋白43(Cx43)表达和金属离子含量的影响. 方法 40只6月龄雌性SD大鼠,随机分为卵巢假切除组(Sham组),卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除合并慢性铝中毒组(OVX+Al组)和卵巢切除合并慢性铝中毒及尼尔雌醇灌胃组(OVX+Al+E2组).于术后3个月,利用离子体发射光谱仪测定心脏金属元素含量,采用免疫组织化学和图像分析法观测心肌细胞Cx43表达.结果 1. Cx43表达:Sham组心房肌Cx43遍布于心肌细胞侧面连接和端闰盘处.心室肌分布于心肌闰盘处.OVX组心房肌的Cx43颗粒部分由细胞侧-侧连接处移至闰盘处或杂乱排列,心室肌Cx43由闰盘处移至细胞侧-侧连接处或杂乱地无序排列,少部分出现在细胞质中,OVX+Al组Cx43排列类似于OVX组,且更加紊乱.OVX+Al+E2组心房肌Cx43回复正常分布,但心室肌未发现回复.2.图像分析结果,各组大鼠心肌细胞Cx43的面积构成比比较无显著差异.3.金属元素含量:在Sham组,金属元素在心脏含量的排列顺序如下:Mg＞Ca＞Fe＞Zn＞Al＞Si＞Cu＞Mn＞Se和Cd.各组间比较具有显著差异的是:与Sham组比较,OVX组Zn降低;OVX+Al+E2组Al、Cd、Si、Se均升高;OVX+Al组与OVX组比较,Si升高、Zn降低.OVX+Al+E2组与OVX+Al组比较, Cd、Mn、Se升高. 结论雌激素改善卵巢切除及加铝后引起的心脏金属元素含量改变和心肌细胞间隙连接蛋白Cx43重构.     

伊贝沙坦和培垛普利对左心室肥大时心肌连接蛋白43、结蛋白与肌钙蛋白T表达的实验研究

目的：探讨左室肥大时血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型拮抗剂伊贝沙坦和血管紧张素转换酶抑制剂培垛普利对心肌连接蛋白43（CX43）、结蛋白与肌钙蛋白T（cTnT）表达的影响。 方法： 分假手术组、SD大鼠腹主动脉部分结扎的手术组及腹主动脉部分结扎的处理组即伊贝沙坦组（20 mg·kg-1·d-1 ig）、培垛普利组（2 mg·kg-1·d-1 ig）、两药联用组（伊贝沙坦组20 mg·kg-1·d-1 ig+培垛普利组2 mg·kg-1·d-1 ig），术后次周起干预8周，观察左室重量指数（LVMI）和心肌细胞横径（TDM），免疫组织化学检测心肌CX43、结蛋白与cTnT 表达。 结果： 培垛普利组、伊贝沙坦组和联合用药组LVMI和TDM均显著低于手术组（P<0.05），手术组心肌细胞闰盘区域和侧侧连接的胞膜上均有不规则CX43表达；伊贝沙坦组、培垛普利和其联用组的CX43表达分布较有规律，主要以带状表达于闰盘；手术组心肌CX43、结蛋白、cTnT表达量明显少于伊贝沙坦组、培垛普利组和其联用组（P<0.05）。 结论： 左室肥大时伊贝沙坦和培垛普利有利于心肌CX43、结蛋白与cTnT的表达与分布，能减轻左室心肌肥大，减少心肌细胞损伤，促进心肌细胞骨架结构与缝隙连接的基本正常恢复。     

黄芪总苷通过介导mTOR信号通路抑制H_2O_2诱导的大鼠心肌细胞自噬和凋亡

目的:探讨黄芪总苷(astragalosides)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的大鼠心肌细胞H9c2自噬和凋亡作用的影响及作用机制。方法:建立大鼠心肌细胞H_2O_2氧化应激损伤模型,并用20 mg/L的黄芪总苷和0.1 mg/L的雷帕霉素分别处理对应组细胞。采用流式细胞技术检测细胞凋亡率;采用吖啶橙染色观察细胞自噬情况;采用Western blot检测p-mTOR蛋白、P70S6K蛋白、自噬蛋白(LC3)和凋亡蛋白(cleaved caspase-3和caspase-3)的表达。结果:与模型组和雷帕霉素组比较,黄芪总苷组的细胞凋亡率显著降低(P0.05);黄芪总苷组的大鼠心肌H9c2细胞形态完整,细胞核染色为黄绿色荧光,染色质分布均匀,细胞形状规则;细胞中p-mTOR蛋白和P70S6K蛋白的表达显著升高(P0.05),LC3-II/LC-3-I和cleaved caspase-3相对表达量显著降低(P0.05)。结论:黄芪总苷可通过mTOR信号通路提高心肌细胞成活率,抑制细胞凋亡和自噬,减轻H_2O_2诱导的大鼠心肌细胞氧化应激损伤。     

黄芪甲苷对慢性心衰大鼠心肌纤维化及能量代谢的影响

目的:研究黄芪甲苷对慢性心衰大鼠心肌纤维化的影响,初步探讨其具体机制。方法:采用腹主动脉缩窄法(AAC)建立大鼠慢性心衰模型,建模成功后随机分为模型组、缬沙坦组及黄芪甲苷组,另建立假手术组。缬沙坦组和黄芪甲苷组分别给予2 mg·kg~(-1)·d~(-1)的缬沙坦及30 mg·kg~(-1)·d~(-1)的黄芪甲苷灌胃,假手术组及模型组给予生理盐水灌胃。8周后收集心脏结构及血流动力学参数,留取心肌染色后观察心肌细胞形态学变化Western blot和RT-qPCR检测长链脂酰辅酶A脱氢酶(LCAD)、6-磷酸果糖激酶1(PFK1)的蛋白及mRNA表达情况。结果:与假手术组相比,模型组大鼠的左室质量指数(LVMI)、胶原容积分数(CVF)、左室后壁厚度(LVPWD)、PFK1蛋白及mRNA表达均升高(P0.05),LCAD蛋白及mRNA表达均下降(P0.05)。与模型组相比,缬沙坦组及黄芪甲苷组LVMI、CVF、LVPWD、PFK1蛋白及mRNA表达均下降(P0.05),LCAD蛋白及mRNA表达升高(P0.05)。结论:黄芪甲苷可以抑制慢性心衰大鼠心肌纤维化,其机制可能是通过上调LCAD、下调PFK1、纠正能量代谢异常实现的。     

黄芪甲苷联合丹参酮Ⅱa诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

背景：黄芪甲苷和丹参酮Ⅱa是传统中医药治疗心肌缺血的有效成分,是否可参与骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的过程呢？ 目的：观察黄芪甲苷联合丹参酮Ⅱa对体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化作用的影响。 方法：应用MTT法分别测定黄芪甲苷和丹参酮Ⅱa的最大无毒浓度,确定两者联合诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的剂量。将分离纯化的骨髓间充质干细胞分5组进行诱导：黄芪甲苷组、丹参酮Ⅱa组、丹参酮Ⅱa+黄芪甲苷组、5-氮胞苷组、空白对照组,ELISA方法观察体外诱导后骨髓间充质干细胞缝隙连接蛋白43和肌钙蛋白表达变化。 结果与结论：诱导后丹参酮Ⅱa+黄芪甲苷组、丹参酮Ⅱa、黄芪甲苷、5-氮胞苷组肌钙蛋白、缝隙连接蛋白43表达水平均高于正常对照组(P < 0.01),丹参酮Ⅱa+黄芪甲苷组高于丹参酮Ⅱa、黄芪甲苷组(P < 0.01)。丹参酮Ⅱa+黄芪甲苷组与5-氮胞苷组缝隙连接蛋白43表达水平差异无显著性意义(P > 0.05)。结果提示黄芪甲苷联合丹参酮Ⅱa可以诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞方向转化,而其联合作用高于单一成分的作用。     

大鼠心肌钙黏蛋白表达的增龄变化

目的探讨大鼠心肌细胞发育过程中钙黏蛋白(cadherin)的分布方式以及心肌细胞中cadherin表达的增龄变化规律。方法应用S-P免疫组化方法分别检测幼年、青年、中年和老年大鼠的心肌细胞钙黏蛋白cadherin的表达。结果细胞钙黏蛋白cadherin在大鼠的心房、心室、乳头肌、室间隔等处均有表达。幼年时期cadherin阳性颗粒大部分集中在心肌细胞端-端的闰盘处,青年、中年和老年大鼠cadherin典型的分布在细胞心肌末端的闰盘处。结论在大鼠心肌发育过程中,cadherin的表达存在增龄变化;以cadherin介导的细胞黏合对闰盘的形成是必备的,黏合连接稳定了细胞间的联系并且有利于心肌细胞收缩的同步化。     

黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞自噬的影响

目的:探讨黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞自噬的影响。方法:选取清洁级雄性SD大鼠70只随机分为假手术组、脑缺血/再灌注组、溶剂对照组、黄芪甲苷组、黄芪甲苷+自噬抑制剂组、自噬抑制剂组和自噬激活剂组。采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型。观察大鼠神经缺损症状,根据Zea Longa评分标准挑选模型成功的大鼠;采用TTC染色法检测大鼠脑梗死体积;尼氏染色观察大鼠神经细胞形态学变化;透射电子显微镜观察细胞自噬现象;Western blot检测beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达量的变化。结果:假手术组无神经缺损症状,未出现脑梗死灶,尼氏体丰富、染色均匀。与假手术组相比,脑缺血/再灌注组出现明显的脑梗死灶,神经细胞坏死增多,尼氏体数量减少、着色较浅,透射电镜下可见典型的自噬体,自噬标志蛋白beclin-1和LC3-Ⅱ表达增加(P 0. 05)。与脑缺血/再灌注组相比,黄芪甲苷组和自噬激活剂组可明显减小脑梗死体积,神经细胞有不同程度的恢复,尼氏体稍增多,自噬体数量、beclin-1和LC3-Ⅱ表达量均增加(P 0. 05);自噬抑制剂组脑梗死体积增大,神经细胞坏死严重,尼氏体减少,着色变浅,自噬体数量、beclin-1和LC3-Ⅱ表达量均减少(P 0. 05);溶剂对照组无明显变化。与黄芪甲苷组比较,黄芪甲苷+自噬抑制剂组和自噬抑制剂组脑梗死体积增加,神经细胞坏死增多,尼氏体数量减少,自噬体数量、beclin-1和LC3-Ⅱ表达量降低(P 0. 05)。结论:黄芪甲苷可通过激活自噬而减轻脑缺血/再灌注损伤,从而发挥神经保护作用。     

大鼠骨髓间质干细胞定向分化的心肌细胞间形成闰盘样结构

目的：建立大鼠骨髓间质干细胞（BMMSCs）定向分化为心肌细胞的模型，了解细胞间藕联情况。方法： 采用贴壁筛选法分离BMMSCs，体外扩增，5-氮胞苷(5-aza)定向诱导第2代BMMSCs分化为心肌细胞，取继续培养1周、2周、3周的细胞进行免疫细胞化学染色，鉴定横纹肌肌动蛋白和闰盘样结构的存在。结果： 5-aza处理后1周、2周、3周均可见横纹肌肌动蛋白染色阳性细胞。5-aza处理后1周及2周连结蛋白43在部分细胞上表达:呈核周散在分布的棕黄色颗粒，5-aza处理后3周连结蛋白43 在细胞密度大的区域呈核周聚集成线形分布的棕黄色颗粒，个别细胞间可见此结构,类似正常心肌的闰盘结构。结论： 骨髓间质干细胞分化为心肌细胞过程中，随培养时间延长及细胞密度增加逐渐形成闰盘样结构。     

黄芪甲苷通过诱导自噬减轻慢性间歇性低氧大鼠心脏损伤

目的 探讨黄芪甲苷（ASⅣ）对慢性间歇性缺氧（CIH）大鼠的心肌保护作用和机制。 方法 SD雄性大鼠24只,随机分为对照组、CIH组、CIH+ASⅣ组和ASⅣ组,每组6只。CIH大鼠循环给予氮气和氧气,使氧气含量在9%～21%间循环,每个循环3 min,每天上舱8 h,共35 d。CIH+ASⅣ组和ASⅣ组每天给予黄芪甲苷干预,对照组和CIH组采用等量生理盐水灌胃。超声心动图检测大鼠心脏左心室功能;HE染色和麦胚芽凝集素染色检测左心室心肌结构;TUNEL检测心肌细胞凋亡;比色法检测心肌组织匀浆的超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛(MDA)含量;Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和自噬相关蛋白LC3、Beclin1、P62及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达水平。 结果 与对照组相比,CIH模型组大鼠左室射血分数（LVEF）及左心室收缩末期内径（LVIDs）降低,心肌纤维排列紊乱,心肌细胞增大,心肌细胞凋亡率增加,Bcl-2/Bax比率下降,SOD活性降低,MDA含量增加,Beclin1表达下降而P62表达上升,p-mTOR/mTOR比率升高。与CIH组相比,ASⅣ干预使LVEF和LVIDs上升,心肌纤维排列较整齐,心肌细胞无异常增大,心肌细胞凋亡率下降,Bcl-2/Bax比率增高,SOD活性增加,MDA水平下降,LC3 Ⅱ/Ⅰ比率增高,Beclin1表达增高而P62表达下降,p-mTOR/mTOR比率下降。 结论 ASⅣ可能通过抑制mTOR诱导自噬,从而减轻CIH间歇性低氧对大鼠心脏的损伤。     

室间隔缺损儿童心房肌细胞Cx43蛋白的表达

目的探讨室间隔缺损儿童心房肌细胞连接蛋白43(Cx43)表达的规律。方法应用SP免疫组织化学和图像分析方法,观测室间隔缺损儿童心房肌细胞Cx43的蛋白表达。结果1．正常儿童心房肌细胞Cx43表达：1～3岁组呈斑点状、带状或链状,主要排列于细胞侧面连接处,闰盘处极少。7～16岁组大量分布于细胞侧面连接处和闰盘处。2．室间隔缺损儿童的心房肌细胞Cx43表达：1～3岁组除了分布于细胞侧面连接处,还见于细胞闰盘处及细胞质中,少数无序排列;7～16岁组分布在细胞侧面连接处和细胞质中,闰盘处极少,且无序排列。3．室间隔缺损儿童心房肌细胞Cx43的蛋白表达量未发生显著变化。结论室间隔缺损儿童心房肌细胞Cx43的蛋白分布形式有改变,表达量无变化。提示,室间隔缺损仅对Cx43的分布形式产生影响。     

黄芪甲苷减轻镉致TM3细胞Cx43表达下降及缝隙连接细胞间通讯功能减退

目的探讨黄芪甲苷(As)对镉(Cd)致TM3细胞连接蛋白43(Cx43)表达改变及由Cx43介导的缝隙连接细胞间通讯(GJIC)功能改变的保护作用。方法用TM3细胞系作为研究对象,设对照组、As(20 mg/L)组、Cd(10μmol/L)组、Cd加As组,免疫组织化学方法分析Cx43阳性产物表达,荧光定量PCR检测Cx43 mRNA表达,Western blot检测Cx43蛋白表达,划痕标记染料示踪技术(SLDT)检测GJIC功能。结果与对照组相比,Cd组TM3细胞Cx43阳性产物表达的平均吸光度值(A_(OD))显著降低(P0.01),Cx43 mRNA和蛋白表达下降(P0.01),TM3细胞GJIC功能降低(P0.01);Cd+As组TM3细胞Cx43阳性产物表达虽较对照组减弱但明显高于相应Cd组(P0.01),Cx43 mRNA、蛋白表达及GJIC功能虽比对照组降低,但较Cd组高(P0.01)。结论黄芪甲苷对镉致TM3细胞Cx43表达下降及GJIC功能减退有明显的拮抗作用。     

钙敏感受体在黄芪注射液防治心肌损伤中的作用

目的研究黄芪注射液对心肌损伤大鼠钙敏感受体表达的影响及黄芪注射液可能的心肌保护作用机制。方法 40只大鼠随机分为4组:空白组、心肌损伤组、黄芪注射液组(20 mL/kg)、黄芪注射液(20 mL/kg)+钙敏感受体激动剂Cinacalcet(3.0 mg/kg)组。腹腔内注射5 mg/kg异丙肾上腺素,制备大鼠心肌损伤模型。Western blot方法检测各组大鼠心肌组织中钙敏感受体的表达以及Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达;TUNEL染色法评价各组大鼠心肌细胞的凋亡;酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-1β、NF-κB的水平。结果黄芪注射液显著抑制了心肌损伤组大鼠钙敏感受体的表达(P0.01),促进了Bcl-2的表达(P0.01),降低了Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达(P0.01),降低了血清TNF-α、IL-1β和NF-κB的水平(P0.01);钙敏感受体激动剂Cinacalcet可以部分消除黄芪注射液对心肌损伤组大鼠的心肌保护作用。结论黄芪注射液对心肌损伤组大鼠的心肌保护作用可能与抑制钙敏感受体的表达、减少炎症反应、降低心肌细胞凋亡有关。     

黄芪甲苷通过调控miR-33a及ABCA1信号发挥抗动脉粥样硬化作用

目的:观察黄芪甲苷是否通过调控微小RNA-33a(miR-33a)而影响下游信号三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达,促进巨噬细胞内胆固醇流出,从而研究黄芪甲苷抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:体内实验:采用HE染色检测各组小鼠主动脉横截面病理损伤程度real-time PCR和Western blot分别检测小鼠主动脉ABCA1的mRNA和蛋白表达。体外实验:建立THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞,然后用黄芪甲苷含药SD大鼠血清处理,采用real-time PCR检测细胞miR-33a表达;细胞随机分为空白血清组、黄芪甲苷含药血清组及黄芪甲苷含药血清+miR-33a mimic处理组,real-time PCR和Western blot法检测细胞ABCA1的mRNA和蛋白表达,油红O染色和高效液相色谱法检测细胞内脂质含量,[3H]法检测细胞内胆固醇流出。结果:体内实验显示,黄芪甲苷组小鼠血管各层结构正常,排列整齐,局部有小灶性的钙化颗粒物沉积,病变轻,斑块小,泡沫细胞和脂质减少,弹力板基本完整,病变程度明显轻于模型组。与模型组相比,黄芪甲苷组小鼠主动脉的miR-33a表达量降低,ABCA1 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P 0. 05)。体外实验显示,在不影响THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞活性的情况下,黄芪甲苷含药血清能明显上调ABCA1的mRNA和蛋白表达,但能被转染miR-33 mimic抑制;黄芪甲苷含药血清可减少细胞中的脂质蓄积,但能被细胞中转染miR-33 mimic所弱化;黄芪甲苷减少细胞内胆固醇蓄积与其促进细胞内胆固醇流出有关,细胞中转入过量miR-33a可以抑制胆固醇流出。结论:黄芪甲苷可通过减少miR-33a的生成,进而上调ABCA1表达,促进巨噬细胞中胆固醇流出,这可能是黄芪甲苷抗动脉粥样硬化作用的分子机制之一。     

慢性心衰大鼠心肌细胞内雷尼丁受体及集钙蛋白的表达

目的:研究慢性心衰大鼠心肌细胞内雷尼丁受体(RyR2)及其调节蛋白集钙蛋白的表达,探讨心衰心肌细胞内钙容量降低的机制。方法:雄性SD大鼠被随机分为心衰组和假手术组,运用激光扫描共聚焦显微镜、透射电子显微镜、免疫印迹等方法研究2组大鼠心肌细胞肌浆网内钙容量、心肌细胞超微结构及心肌细胞内肌浆网钙释放通道RyR2和其调节蛋白集钙蛋白表达的变化。结果:慢性心衰大鼠心功能左心室舒张末期压力、左室压力最大上升速率均显著低于假手术组。假手术组大鼠心肌细胞的肌小节完整,肌丝排列整齐,线粒体结构正常;心衰组大鼠部分心肌细胞肌丝溶解,线粒体肿胀,嵴断裂。慢性心衰大鼠心肌细胞肌浆网内钙容量显著低于假手术组。慢性心衰大鼠心肌细胞内RyR2的表达量无明显变化,集钙蛋白表达明显下降。结论:慢性心衰大鼠心肌细胞内集钙蛋白表达下调,可能是导致心肌细胞肌浆网钙容量减少的原因之一。     

小鼠心脏发育过程中Cx43表达的时空变化

目的：探讨小鼠心脏发育过程中连接蛋白43（connexin43，Cx43）表达的时空变化。方法：应用SP免疫组化和图像分析方法，观测胎小鼠、出生1d、6d、2月和14月小鼠心肌细胞Cx43的表达。结果：1、胎小鼠和出生1d小鼠心肌细胞Cx43呈斑点状遍布于心肌细胞侧-侧连接和细胞质内，闰盘处极少。2、出生6d时Cx43开始向端闰盘处聚集，2月和14月小鼠心室肌细胞Cx43已经典型分布于闰盘处，而心房仍分布于细胞侧面连接处和细胞质。3、分布密度总规律是：胎小鼠〈出生1d〈6d〉2月〉14月。结论：小鼠心肌细胞Cx43分布随心脏发育逐渐向闰盘处重排，其密度逐渐下降。心房肌Cx43的表达与分布具有一定的幼稚性。     

大鼠心肌细胞粘着斑蛋白α-catenin表达的增龄变化

目的　探讨大鼠心肌细胞发育过程中粘着斑蛋白α -catenin的表达分布方式以及增龄变化规律。方法　应用S -P免疫组化方法分别对大鼠的胎儿、新生儿、幼年、青年、中年和老年大鼠的心肌细胞粘着斑蛋白α-catenin的表达进行检测。结果　细胞粘着斑蛋白α -catenin在大鼠的心房、心室、乳头肌、室间隔等处均有表达。胎鼠心肌细胞中粘着斑蛋白α -catenin分散分布于细胞膜和胞浆中 ;新生大鼠心肌细胞的连接处见有α-catenin的免疫标记颗粒 ;幼年时期α -catenin的免疫标记颗粒大部分集中在心肌细胞末端的闰盘处 ;青年、中年和老年大鼠α -catenin的免疫标记典型的分布在心肌细胞末端的闰盘处。结论　在大鼠心肌发育过程中 ,α -catenin的表达分布存在增龄变化 ;粘着斑蛋白α -catenin的分布方式与闰盘的发育是一致的。     

大鼠心脏连接蛋白43表达的增龄变化

目的　探讨大鼠心脏连接蛋白 4 3(Cx4 3)表达的增龄变化规律。　方法　应用SP免疫组织化学方法 ,检测 2 1例幼年组、青年组和老年组大鼠心肌细胞Cx4 3的蛋白表达。　结果　 1 Cx4 3主要在心室肌表达。 2 幼年大鼠心室肌的Cx4 3多数已聚集于端闰盘处 ,少数仍呈斑点状散在分布 ,而乳头肌等处的Cx4 3主要分布于细胞表面。青年和老年大鼠的Cx4 3典型地分布于端闰盘处。　结论　Cx4 3的表达因年龄和部位不同均有差异