正交试验优选蒸制菟丝子饼的炮制工艺

目的: 优选蒸制菟丝子饼的炮制工艺。方法: 以金丝桃苷、槲皮素和山奈酚含量为综合评价指标,选择加水量、闷润时间和蒸制时间为考察因素,采用L₉(3⁴)正交设计优选菟丝子饼的炮制工艺。采用HPLC测定指标成分含量,色谱条件为Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相甲醇(A)-0.15%磷酸溶液(B)梯度洗脱(0~10 min,60%A;10~20 min,45%A;20~30 min,60%A),检测波长365 nm,流速1.0 mL·min^-1,进样量15 μL。结果: 蒸制菟丝子饼的最佳炮制工艺为20 g菟丝子生品加40 mL水闷润10 h,蒸制2 h。结论: 优选的炮制工艺合理可行。     

基于Nrf2-ARE通路的抗辐射有效活性成分筛选研究

目的建立基于Nrf2-ARE通路的报告基因筛选模型,筛选抗辐射复方四物汤加味方中的活性成分。方法将抗氧化反应元件插入萤火虫荧光素酶载体pGL4.26,构建重组质粒pGL4-ARE,与海肾荧光素酶载体pRL-TK共同转染HEK-293细胞,检测四物汤加味方中刺五加皂苷E、金丝桃苷、五味子乙素等12个主要的化学成分对Nrf2-ARE通路的激活作用。结果在四物汤加味方中,白藜芦醇(50μmol.L-1以上)和金丝桃苷(100μmol.L-1以上)的抗氧化活性最强,与空白对照组比较差异有显著性(P<0.01);红景天苷也有较好的效果,500μmol.L-1以上可提高诱导表达倍数(P<0.01)。结论白藜芦醇、金丝桃苷、红景天苷是四物汤加味方中的主要抗氧化活性成分。     

Difference analysis of different parts of chicory based on HPLC fingerprint and multi-component content determination

ObjectiveTo establish HPLC fingerprints of different parts of chicory stems, leaves, roots, flowers and seeds, and compare the similarities and differences of chemical components in different parts, so as to provide a scientific basis for the comprehensive utilization of chicory.MethodsTo establish the HPLC fingerprint of chicory, the chromatographic column was chosen with Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈, the mobile phase was methanol (A) – 0.2% formic acid (B), the flow rate was 1 mL/min, the column temperature was 30 °C, and the detection wavelength was 254 nm. The Similarity Evaluation System of Chromatographic Fingerprint of Traditional Chinese Medicine (2012 Edition) was used to evaluate the similarity of different parts of decoction pieces, and the determination method of multi-component content was established based on fingerprint identification chromatographic peaks, and the determination results were analyzed.ResultsThe HPLC fingerprinting method of chicory was established. Sixteen chromatographic peaks were identified and 10 of them were identified as: caftaric acid (1), esculin (2), chlorogenic acid (3), esculetin (4), caffeic acid (5), cichoric acid (8), hyperoside (11), rutin (12), isochlorogenic acid C (14) and luteolin (16). The similarity of different parts was 0.084–0.701. At the same time, the total content of detected chemical components was ranked as flower > leaf > stem > root > seed. Roots did not contain caftaric acid, rutin, and luteolin, flowers did not contain luteolin, and seeds did not contain caftaric acid, cichoric acid, and luteolin. The content of cichoric acid in leaves was the most, and esculin in flowers was the most.ConclusionThe results of HPLC fingerprint and multi-component content determination revealed the similarity and difference of different parts of chicory from chemical composition, indicating that there were certain differences in different parts of chicory. The established HPLC fingerprinting method can provide a reference for quality control and evaluation of different parts of the chicory.     

基于网络药理学和分子对接技术探究金银花入血成分干预新型冠状病毒肺炎的作用机制

目的 通过网络药理学和分子对接技术探究金银花入血成分干预新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制.方法 通过Swiss Target Prediction和Similarity Ensemble Approach数据库检索金银花中入血成分的作用靶点,利用GeneCards数据库和CTD数据库检索COVID-19靶...     

木芙蓉提取物中金丝桃苷的HPLC法测定

目的 建立HPLC法测定木芙蓉提取物中金丝桃苷的方法,为木芙蓉提取物的开发利用提供科学依据。方法 色谱柱为Diamonsil TM柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.3%磷酸溶液（18∶82）,体积流量1.0 mL/min,柱温30 ℃,检测波长360 nm。结果 金丝桃苷与其他成分分离良好,在29.2～292.0 ng线性关系良好,r＝0.999 9,平均回收率为98.7%,RSD为2.03%。结论 所建立的定量方法简便、准确、专属性好、灵敏度高。     

RP-HPLC法测定天山花楸果实中苦杏仁苷、芦丁、金丝桃苷和橙皮苷的含量

目的:建立同时测定维吾尔药材天山花楸果实中苦杏仁苷、芦丁、金丝桃苷和橙皮苷含量的RP-HPLC分析方法。方法:采用Shim-pack VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B)(三乙胺调pH3.0)为流动相进行梯度洗脱(0~5 min,9%A→10%A;5~30 min,10%A→15%A;30~35 min,15%A→17%A;35~50 min,17%A→21%A;50~60 min,21%A),流速1.0 mL.min-1,检测波长215 nm,柱温25℃。结果:苦杏仁苷、芦丁、金丝桃苷和橙皮苷进样量分别在0.44~4.40,0.05~0.48,0.13~1.26,0.04~0.42μg范围内,与色谱峰面积呈良好线性关系(r>0.9995,n=7);平均回收率(n=9)分别为99.5%,99.3%,100.1%,99.2%。结论:本法简便、准确,重复性好,可用于天山花楸药材的质量控制。     

液相色谱质谱联用测定五子衍宗方有效部位中9种成分

目的:建立五子衍宗方乙醇提取物中9种活性成分的含量测定方法。方法:应用液相色谱质谱联用(LC-MS)进行测定,其中质谱采用提取离子扫描模式,其参数为:正离子,Gas temp 350℃,Drying Gas(N2)10 L.min-1,Nebulizer(N2)1.4MPa,Fragmentor 175 V,Skimmer 75 V,OCT 1RF Vpp 700 V,VCap 4.0 kV,质量范围105～700 m/z。液相色谱条件为:Chromo-lith Fastgradient RP-18e色谱柱,50mm×2 mm(Merck,USA);流动相A相为0.1%甲酸水溶液,B相为乙腈;流速为0.3 mL·min-1;柱温为35℃;进样量为10μL;运行时间为25 min。结果:9种成分日内和隔天精密度的RSD均分别小于1.5%和2.5%(n=5);重复性RSD<2.5%(n=5);五子衍宗乙醇提取物中9种对照品的加样回收率均在96%～103%之间。结论:该测定方法简单、稳定,是一种较理想的含量测定方法,可用于五子衍宗方制剂的质量控制。     

金丝桃苷油水分配系数及大鼠在体肠吸收动力学研究

目的 测定金丝桃苷的油水分配系数,并考察金丝桃苷的大鼠在体肠吸收情况。方法 采用经典摇瓶法测定金丝桃苷的油水分配系数;采用大鼠在体肠吸收模型研究金丝桃苷的肠吸收情况,考察其在小肠各段的吸收情况及药物浓度对吸收的影响。结果 在正辛醇-水体系中,金丝桃苷的油水分配系数log P为0.43;在正辛醇-缓冲液体系中,油水分配系数随pH值的升高而逐渐降低。质量浓度为5、10、20 μg/mL的金丝桃苷在大鼠肠道内均有较好的吸收,在不同质量浓度下金丝桃苷吸收不具有显著性差异（P＞0.05）。结论 应用摇瓶法能准确测定金丝桃苷的油水分配系数,由此推测的体内吸收情况通过大鼠肠灌流试验得到验证。     

金丝桃苷的大鼠胚胎-胎仔发育毒性研究

目的:观察金丝桃苷对Wistar大鼠的胚胎-胎仔发育毒性,为妊娠期安全用药提供参考。方法:取健康受孕大鼠,随机分为金丝桃苷低、中、高(30,175,1 000 mg.kg-1)剂量组、阳性对照组(环磷酰胺,7 mg.kg-1)和溶媒对照组(等体积1%羧甲基纤维素钠水溶液)。分别于母鼠受孕后第6～15天灌胃给予1%羧甲基纤维素钠水溶液和金丝桃苷,环磷酰胺组于母鼠受孕后第11～13天皮下注射给药。给药后观察孕鼠饮水、摄食、生长等一般状况,妊娠第20天处死孕鼠。观察母体动物的临床症状、体重变化、黄体数、着床数、胚胎生存死亡情况、生存胎仔的体重、性别、外观、内脏及骨骼检查等指标。结果:金丝桃苷对各给药组的母鼠和胎鼠的外观、内脏及骨骼发育均未见明显异常。但是金丝桃苷高剂量组可致胎鼠体重增长减缓,身长和尾长缩短(P<0.05)。结论:在本实验条件下,金丝桃苷对胎鼠生长发育有一定影响,建议临床用药时怀孕妇女应慎用。     

柿子叶黄酮的提取工艺优选

目的:研究柿子叶总黄酮的最佳提取工艺.方法:以芦丁、槲皮素和金丝桃苷的提取得率为指标,考察了提取次数、提取时间、料液比、乙醇体积分数对柿子叶黄酮提取率的影响,并通过正交试验设计确定了柿子叶的最佳提取工艺.结果:柿子叶黄酮的最佳提取工艺为:柿子叶中粉加入8倍量70％乙醇回流提取2次,每次1h.结论:工艺验证结果显示该工艺稳定可靠,可以用于柿子叶黄酮的工业化提取.