一种运动想象脑电分类算法的研究

为了解决脑机接口(BCI)中不同意识任务下脑电信号分类问题,针对运动想象脑电(EEG)的事件相关去同步/同步(ERD/ERS)现象,提出一种基于支持向量机(SVM)的实用分类算法。该算法首先对脑电信号进行滤波,获得对运动想象比较敏感的频段,对滤波后的脑电信号,通过去均值减小由于均值不同所造成的误差,然后,再提取基于ERD/ERS的脑电能量场强特征,对提取的特征,运用支持向量机(SVM)进行分类,得到了满意的效果。结果表明,此方法可为脑机接口技术的应用提供有效的手段。     

人α-防御素-1(α-HNP-1)基因乳腺定位表达载体的构建及表达

目的:将人α-防御素-1(α-HNP-1)基因与山羊β-乳球蛋白(Beta-Lac-toglobulin,BLG)基因5’调控区序列融合,构建α-HNP-1基因的乳腺定位表达载体并对其进行检测。方法:用PCR方法获得α-HNP-1基因片断并克隆于pMD18-T载体,经DNA测序证实α-HNP-1基因序列无误后,再将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),构建pcDNA3.1-HNP-1重组质粒。用PCR方法扩增出BLG基因5’区调控序列并克隆到pcD-NA3.1-HNP-1中,构建乳腺定位表达载体pcDNA3.1-BLG-HNP-1,该载体经脂质体包裹后,经乳腺导管注入妊娠中后期大鼠乳腺中进行表达。结果:经酶切鉴定和DNA测序分析证实重组质粒载体pcDNA3.1-BLG-HNP-1构建正确,经ELISA检测,大鼠乳汁中有α-HNP-1表达,其48h表达量为27.67ng/ml,72h表达量为49.00ng/ml。结论:成功构建了α-HNP-1基因乳腺定位表达载体并最终在乳腺获得一定量表达,说明乳腺导管注入法是一种较理想的评价乳腺特异表达载体的可行性方法。     

Site-specific homologous recombination mutagenesis in group B streptococci

We describe the use of suicide vectors to generate site-specific mutations in group B streptococcus. This is accomplished by cloning gene-specific sequences into a temperature sensitive plasmid and selecting for clones which have undergone homologous recombination. The recombinan clones can be easily isolated by selecting for clones which have retained the antibiotic resistance markers that are present on the vector or cloned into the gene-specific sequences. To confirm the fidelity of the recombination events, PCR analysis is performed on chromosomal DNA isolated from the recombinant clones. Using this strategy, we have generated site- specific insertions in several capsule genes and have found that these insertions occurred as expected and that the mutations result in loss of capsule expression. In this report, we specifically detail the construction of cpsB mutants by single and double cross-over recombination and demonstrate that the resulting strains are acapsular.     

Electrophysiological identification of principal and intercalated cells in the rabbit outer medullary collecting duct

Intracellular microelectrode techniques were used together with inhibitors of Na⁺ transport (amiloride) and H⁺ transport (acetazolamide and SITS¹) to identify principal cells and intercalated cells in the outer stripe of the rabbit outer medullary collecting duct. The principal cell (n=9) had a basolateral membrane voltage (V _bl) of –64.7±3.2 mV, a fractional resistance of the apical membrane (fR _a=R _a/R _a+R _bl) of 0.82±0.02, and a K⁺-selective basolateral membrane. Luminal amiloride hyperpolarizedV _bl by 10.3±2.1 mV and increasedfR _a to near unity (n=7). Bath acetazolamide and SITS were without effect on these parameters. The intercalated cell (n=5) had aV _bl of –25.0±3.2 mV, afR _a of 0.99±0.01, and a Cl^–-selective basolateral membrane. Bath acetazolamide or SITS hyperpolarizedV _bl by 26.4±8.2 mV. Luminal amiloride did not alterV _bl of this cell. The differential effects of the inhibitors also indicate that the principal and intercalated cells are probably not directly coupled electrically.     

新发结直肠癌患者膳食模式分析

目的 探讨新发结直肠癌患者的膳食模式与发病的关系,为结直肠癌的发生提供科学的干预方向。方法 以2018—2019年辽宁省某肿瘤医院就诊并经病理学确诊的新发结直肠癌患者和同期在该医院体检中心参加健康体检者为研究对象,新发结直肠癌患者为病例组,按同性别、同年龄1∶1选取健康体检者作为对照组,采用主成分分析法对调查对象的膳食模式进行分析,利用Logistic回归模型分析不同膳食模式对结直肠癌发病风险的影响。结果 本研究共对新发结直肠癌患者232例、健康体检者232人进行调查,2组人群在性别、年龄、文化程度、家庭人均月收入和体力劳动强度分布差异均无统计学意义（均P>0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示坚果薯类膳食模式（OR=0.482）、水产奶类膳食模式（OR=0.666）和果蔬素食膳食模式（OR=0.800）是结直肠癌发生的保护性因素,西式膳食模式（OR=1.441）、辛辣熏制膳食模式（OR=1.195）、肉类膳食模式（OR=1.397）和高脂肪膳食模式（OR=1.349）为结直肠癌发病的危险因素。结论 坚果薯类、水产奶类和果蔬素食是结直肠癌发生的保护性因素。西式、辛辣熏制、肉类和高脂肪膳食为结直肠癌发病的危险因素,在结直肠癌的防病宣传健康教育中应该加强饮食健康宣传,提高防病意识,有效降低发病率。     

脑卒中肺部感染危险因素及血清免疫炎性因子的预测价值

目的基于主成分分析(PCA)-决策树模型分析脑卒中肺部感染的危险因素及血清免疫炎性因子的预测价值。方法回顾性分析2014年12月-2019年12月江西省上饶市人民医院确诊的176例脑卒中患者,根据是否发生肺部感染,分为感染组40例和未感染组136例。记录患者临床特征,检测血白细胞(WBC)计数、血清C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)和可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)水平。采用Logistic回归和卡方自动交叉检验(CHAID)模型分析影响脑卒中后肺部感染的危险因素;受试者工作特征曲线(ROC)分析血WBC、CRP、PCT、SIL-2R预测肺部感染的价值。结果脑卒中肺部感染与患者年龄、卒中类型、是否合并糖尿病、吸烟史、吞咽困难、意识障碍、侵入性操作有关(P<0.05);感染组患者血WBC、CRP、PCT和SIL-2R水平高于未感染组(P<0.05);糖尿病、侵入性操作、CRP和PCT均为影响脑卒中患者肺部感染的独立危险因素(P<0.05);PCA-ROC分析显示,血WBC、CRP、PCT、SIL-2R和联合预测主成分1(PC1)的曲线下面积(AUC)分别为0.670、0.816、0.854、0.686、0.918;PCA-卡方自动交互检测(CHAID)模型分析显示,WBC、CRP、PCT、SIL-2R和PC1预测肺部感染的准确率为77.33%、84.72%、86.90%、79.02%和89.24%。结论血清PCT水平可用于预测脑卒中患者肺部感染的发生,临床可重点关注合并糖尿病、意识障碍和侵入性操作的患者。     

人肝癌特异性EB病毒载体—p^EBAF介导hGM—CSF基因的转移及表达

目的：探索人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（hGM-CSF)基因在肝癌细胞中特异性表达的新途径。方法：构建p^EBAF/hGM-CSF基因克隆,用脂质体转染法将它分别导入分泌甲胎蛋白（AFP）的肝癌细胞株HepG2和不分泌APF的细胞株SMMC7721,构建两围基因的细胞克隆HepG2/hGM-CSF,SMMC7721/hGM-CSF,用MTT比色法测定细胞上清中hGM-CSF活性。结果：HepG2/hGM-CSF细胞上清hGM-CSF活性平均为46．5ng/ml/10^6/24h,SMMC7721细胞上清中无明显hGM-CSF活性。结：载体p^EBAF介导的hGM-CSF基因能在分泌AFP的肝细胞中获得特异性表达。     

使用人粘附分子—2启动子的衰变加速因子重组基因表达载体的构建及意义

目的：构建含人粘附分子-2（ICAM-2）启动子的人衰变因子（DAF）重组基因的真核细胞表达载体,运用于转基因动物克服异种器官排斥的研究。方法：双酶切本室巳构建质粒pGEM-7Zf-DAF,得到含人ICAM-2启动子及DAFcDNA序列的插入片段（3.7Kb）;双酶切pcDNA3真核表达载体,得到不含病毒启动子、含筛选基因Neo的一段DNA作为载体序列（4.4Kb）;两段DNA进行连接反应后转化细菌;阳性转化菌落质粒抽提及酶切鉴定。根据人的ICAM-2启动子、DAFcDNA序列,设计引物行PCR特异扩增检验。结果：特异性3组酶切重组表达载体,产生符合设计的相应条带;PCR扩增出特异的318bp及1.7Kb的DNA片段,符合设计要求。结论：含人ICAM-2启动子的DAF重组基因表达载体获得成功。     

复制缺陷型腺病毒AdE1CMV-NGF的制备

通过DNA重组技术 ,经亚克隆和克隆过程构建分泌表达型重组腺病毒穿梭质粒pAdE1CMV NGF ;制备完整高纯度辅助病毒 pJM1 7。将 pAdE1CMV NGF和 pJM1 7在 2 93细胞中同源重组 ,获得复制缺陷型腺病毒重组体AdE1CMV NGF。梯度系列稀释测得滴度为 4 .6× 1 0 10 PFU/mL。     

小鼠对HBV DNA疫苗的免疫应答及细胞因子的免疫佐剂效应

目的 :观察编码小鼠 IL- 2及 IL- 12的真核表达载体 ,对 HBV DNA疫苗诱导 Balb/ c小鼠 (H- 2 d )免疫应答的调节作用及其对稳定表达 HBs Ag的小鼠肥大细胞瘤 P815细胞 (P 815 - HBV- S)成瘤性的影响。　方法 :肌内注射HBV DNA疫苗及细胞因子真核表达载体 ;背部皮下接种 P 815 - HBV - S细胞 ,观察成瘤情况 ;EL ISA法测定血清抗HBs;4h5 1 Cr释放法检测小鼠脾细胞 CTL 活性。　结果 :免疫 8周后 ,以 p CR3.1- S、p CR3.1- S+IL- 2及 p CR3.1-S+IL- 12免疫的小鼠血清 ,45 0 nm A值分别为 0 .87± 0 .1、1.98± 0 .17及 1.6 7± 0 .15 ,均较 p CR3.1组显著提高(P<0 .0 5 )。CTL 细胞杀伤活性分别为 (5 0 .5± 6 .4) %、(6 1.9± 7.1) %及 (73.3± 8.8) % ,后两组与 p CR3.1- S组比较差异均显著 (P<0 .0 5 )。脾细胞悬液经抗 CD4+ 单克隆抗体处理后 ,CTL细胞杀伤活性分别为 (48.3± 5 .9) %、(5 6 .2± 7.5 ) %和 (75 .6± 9.1) % ,抗 CD8+ 单克隆抗体处理后分别为 (10 .6± 1.4) %、(13.6± 1.9) %和 (16 .9±2 .3) %。对照组成瘤率为 10 0 % ,p CR3.1- S组小鼠成瘤率为 12 .5 % ,p CR3.1- S+IL- 12真核表达载体组成瘤率为0 ,对照组平均存活期和 6周后存活率分别为 2 8.4天和 0天。后两组分别 >38.2天及 45