全文获取类型
收费全文 | 3861篇 |
免费 | 372篇 |
国内免费 | 288篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 33篇 |
儿科学 | 42篇 |
妇产科学 | 65篇 |
基础医学 | 820篇 |
口腔科学 | 52篇 |
临床医学 | 207篇 |
内科学 | 841篇 |
皮肤病学 | 38篇 |
神经病学 | 258篇 |
特种医学 | 54篇 |
外科学 | 328篇 |
综合类 | 696篇 |
预防医学 | 152篇 |
眼科学 | 26篇 |
药学 | 321篇 |
1篇 | |
中国医学 | 87篇 |
肿瘤学 | 500篇 |
出版年
2024年 | 3篇 |
2023年 | 33篇 |
2022年 | 81篇 |
2021年 | 182篇 |
2020年 | 158篇 |
2019年 | 115篇 |
2018年 | 100篇 |
2017年 | 128篇 |
2016年 | 190篇 |
2015年 | 211篇 |
2014年 | 340篇 |
2013年 | 321篇 |
2012年 | 296篇 |
2011年 | 273篇 |
2010年 | 220篇 |
2009年 | 190篇 |
2008年 | 171篇 |
2007年 | 219篇 |
2006年 | 189篇 |
2005年 | 175篇 |
2004年 | 160篇 |
2003年 | 160篇 |
2002年 | 113篇 |
2001年 | 94篇 |
2000年 | 95篇 |
1999年 | 88篇 |
1998年 | 46篇 |
1997年 | 36篇 |
1996年 | 37篇 |
1995年 | 31篇 |
1994年 | 18篇 |
1993年 | 5篇 |
1992年 | 9篇 |
1991年 | 2篇 |
1990年 | 9篇 |
1989年 | 4篇 |
1988年 | 5篇 |
1987年 | 2篇 |
1986年 | 1篇 |
1985年 | 4篇 |
1984年 | 4篇 |
1981年 | 1篇 |
1977年 | 1篇 |
1974年 | 1篇 |
排序方式: 共有4521条查询结果,搜索用时 15 毫秒
71.
目的:探讨KA I l基因的表达与食管癌发生及浸润转移的关系。方法:采用RT-PCR及免疫组化方法,检测食管癌组织及其正常粘膜中KA I lmRNA及蛋白的表达。结果:KA I lmRNA的表达在食管癌组织和其正常粘膜中未见显著性差异,且与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移无关;KA I l蛋白在癌组织中的表达明显低于其正常粘膜,在有淋巴结转移病例中的表达明显低于无淋巴结转移病例,但与肿瘤的分化程度、浸润深度无关。结论:食管癌癌变和转移可能与KM I1蛋白的低表达有关,但与KA I lmRNA的表达无关,推测这可能是由于翻译后修饰所致。 相似文献
72.
目的研究铜绿假单胞菌rhlR表达产物的分子生物学特性,以及对小鼠的免疫保护作用。方法以铜绿假单胞菌标准株PAO1的基因组DNA为模板,PCR方法扩增rhlR基因。利用pGEX4T-1载体构建rhlR-pGEX4T-1重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并用免疫印迹验证。同时用纯化的重组蛋白免疫小鼠,菌落计数法检测免疫组和对照组鼠肺对铜绿假单胞菌的清除率。结果rhlR的全基因序列为726bp,经序列分析和同源性比较,与GenBank中的rhlR基因(登录号:AE004768)完全一致。大肠杆菌BL21(DE3)转化重组质粒rhlR-pGEX4T-1后,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,表达的融合蛋白质相对分子质量为54×103,其中RhlR蛋白为27×103。体内实验中,免疫小鼠肺部对铜绿假单胞菌的清除率与未经免疫的正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论构建的rhlR-pGEX4T-1重组质粒能够在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达出具有生物学活性的RhlR蛋白。重组蛋白对小鼠表现出一定的保护作用。 相似文献
73.
目的:以人类多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-12)为研究对象,利用载体pGEX-5X-3在大肠杆菌(E.Coli)BL21中原核表达其编码序列,并对表达产物进行纯化、复性及酶活检测。方法:首先利用PCR技术从克隆载体pDONR201-T2得到ppGalNAc-T2全长编码序列,将其亚克隆至原核表达载体pGEX-5X-3,形成重组表达质粒pGEX-5X-3/T2。重组质粒转化大肠杆菌DH5α,测序鉴定后转化BL21,异丙基硫代半乳糖(IPTG)诱导后,表达产物为主要以包涵体形式存在的融合蛋白。对其复性后用谷胱甘肽-琼脂糖(Glutathione-Sepharose)4B亲和层析柱进行纯化。然后根据ppGalNAc-T2的催化功能,设计底物,建立酶促反应体系,利用高效液相色谱(HPLC)进行酶活分析。结果:成功构建了原核表达重组载体pGEX-5X-3/T2,通过蛋白质电泳检测到分子量约为90 kD的融合蛋白的表达,利用亲和层析得到纯化的酶蛋白,并经Western印迹得以验证。反应后体系上柱洗脱后出现酶促反应的产物洗脱峰。结论:成功构建了重组表达载体pGEX-5X-3/T2,ppGalNAc-T2伞长编码序列被成功表达、纯化及复性,检测到具有酶活性。 相似文献
74.
IL-18在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究人IL-18成熟蛋白(mhIL-18)在大肠杆菌中的高效的非包涵体表达以及纯化方案。方法:利用PCR方法扩增出mhIL-18基因,构建融合型表达载体pPTYB1-IL18,转化入大肠杆菌ER2566中,IPTG诱导表达,优化表达条件,超声裂解细胞,采用SDS-PMGE和Weslern blot分析重组蛋白的表达,亲和层析后用MTT法检测表达mhIL-18的活性。结果:成功构建载体并转化入ER2566后,经IPTG诱导,表达量可占菌体总蛋白的26%以上,其中80%以上的mhIL-18融合蛋白以可溶、有活性的形式存在。亲和层析后的mhIL-18纯度可达95%,具有显著的IL-18的生物学活性。结论:成功的在大肠杆菌中的高效以非包涵体表达mhIL-18,并具有显著的IL-18的生物学活性。 相似文献
75.
苦参碱对C6胶质瘤细胞的增殖和原癌基因表达的影响 总被引:10,自引:1,他引:10
目的:本研究拟探讨苦参碱对胶质瘤细胞株(C6细胞株)的抑制作用及其作用机理.方法:应用MTT比色法检测不同浓度苦参碱对C6细胞的增殖抑制,应用流式细胞仪观察苦参碱对C6细胞周期的影响,应用RT-PCR观察原癌基因C-myc表达的变化.结果:苦参碱对C6细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性,当浓度为0.20g/L时,对C6细胞增殖的抑制率达到(53.8±5.6)%.流式细胞仪分析显示,用0.20g/L苦参碱培养3 d,细胞周期中G0/G1期所占比例增加,S期占细胞周期的比例降低.RT-PCR结果显示,随着苦参碱作用剂量的增加,C-myc基因的表达被明显抑制.结论:苦参碱对大鼠胶质瘤细胞系C6的增殖具有明显的抑制作用,并对原癌基因C-myc的表达具有抑制作用. 相似文献
76.
目的 探讨急性自发性脑出血(ICH)患者血清HA水平的表达情况及临床意义。 方法 选取2016年4月~2017年8月我院收治的120例ICH患者为研究对象,并选取同期体检的102例健康者为对照组。采用改良Rankin 量表对ICH患者出院后3个月情况进行评分,根据评分分为预后良好者(≤2分)和预后不良者(>2分),观察并分析患者透明质酸(HA)水平表达及临床意义。结果 预后良好者的年龄、血肿体积均明显低于预后不良者,差异有统计学意义(均P<0.05)。入院时,ICH组患者HA水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。入院时,预后良好者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及HA水平均明显低于预后不良者,且NIHSS评分与HA表达水平呈正相关(r=0.573,均P<0.05);治疗3个月后,mRS评分与HA表达水平亦呈正相关(r=0.757,P<0.05)。单因素表示,预后良好者的年龄、血肿体积、HA水平、NIHSS评分及mRS评分与预后不良者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic多因素回归分析表示,年龄、血肿体积、HA水平、NIHSS评分及mRS评分与ICH患者预后不良相关。结论 ICH患者血清HA水平表达异常升高,病情严重,预后较差。因此,入院时血清HA水平的高表达可作为预后不良的预测因素。 相似文献
77.
【摘要】 目的 探讨前列腺癌(PCa)患者血清miRNA 194和miRNA 206表达水平及临床意义。方法 选取2008年5月~2014年12月我院收治的108例PCa患者为PCa组,以及同期就诊的60例良性前列腺增生(BPH)患者为BPH组、前列腺正常者60例为正常组,分析所有纳入研究者的临床及随访资料,记录年龄等一般临床资料和血清miRNA 194和miRNA 206等指标水平及PCa患者肿瘤及预后情况,并比较不同PCa患者间上述资料的差异性。结果 BPH组和PCa组患者血清miRNA 206水平较正常组低(P<005),而血清PSA水平和miRNA 194较正常组高(P<005);且PCa患者其血清miRN A 206水平较BHP患者更低,而血清PSA和miRNA 194水平则更高(P<005);Gleason 评分大于7分、临床分期T3~T4期以及出现淋巴结转移和术后复发的PCa患者其血清miRNA 206水平均显著降低,而血清miRNA 194显著升高(P<005);死亡患者血清miRNA 206水平均显著低于生存者,而血清miRNA 194水平显著高于生存者(P<005);经 Log rank检验,Gleason 评分大于7分、临床分期T3~T4期、出现淋巴结转移、术后复发以及血清miR NA 194水平升高和miRNA 206水平降低的PCa患者其生存时间均较短(P<005);经多因素Cox 比例风险回归模型分析,淋巴结转移、术后复发以及血清miRNA 194升高和miRNA 206水平降低均为影响PCa患者预后的独立影响因素(P<005)。结论 血清miRNA 194在PCa患者中显著上升,而血清miRNA 206水平显著下降,且血清miRNA 194的上升和miRNA 206的下降均为影响PCa患者预后的独立影响因素,因此临床上可将其作为评估PCa患者病情及预后的有效指标。 相似文献
78.
microRNA(miRNA)在肺癌的发生、发展中发挥着重要的调控作用。循环miRNA的发现,为肺癌诊断、治疗及预后判断提供了一种潜在的非侵入性生物标志。本文结合国内外最新报道对循环miRNA在肺癌诊断、预后判断及铂类化疗敏感性预测等方面的研究进展作一综述。 相似文献
79.
80.