树舌多糖抗肿瘤机制的研究

采用免疫组化方法研究树舌多糖对小鼠HepA瘤细胞Rb基因、p16基因和TNF -α表达的影响 ,阐明中药多糖的抗肿瘤作用机制。实验表明 :树舌多糖组瘤重减轻 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 1) ;树舌多糖组小鼠HepA瘤细胞Rb基因表达活性增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;树舌多糖组p16基因表达活性增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;树舌多糖组TNF -α表达增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :树舌多糖通过增强抑癌基因 -Rb基因、p16基因及TNF -α的表达活性 ,即在基因表达水平上抑制肿瘤的生长     

抑癌基因p16和层粘连蛋白在肺癌中的表达及其意义

目的：探讨p16基因和层粘连蛋白在肺癌中的表达及其意义。方法：用免疫组化法检测76例肺癌组织、20例癌旁组织中p16基因和层粘连蛋白的表达．结果：p16基因表达随着肺癌组织学分级的增加阳性率呈下降趋势，各组之间有显著性差异，而与肺癌淋巴结转移和TNM分期无关，层粘连蛋白表达亦随着肺癌组织学分级的增加阳性率呈下降趋势，Ⅰ、Ⅱ级肺癌中的阳性率明显高于Ⅲ级，在淋巴结转移组中阳性率显著高于无淋巴结转移组，层粘连蛋白表达与肺癌TNM分期无关，p16基因和层粘连蛋白表达之间有明显相关性，结论：p16基因的失活与肺癌的发生有关，层粘连蛋白低表达预示着肺癌的低分化和高转移风险，p16基因和层粘连蛋白表达之间有明显相关性。     

p38丝裂原激活蛋白激酶对人胚胎肾293细胞一氧化氮合酶基因转录的调控

目的探讨p38 丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)家族四种亚型对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的转录调控。方法以人胚胎肾293(HEK 293)细胞为靶细胞,采用脂质体(LPS)介导的细胞基因共转染技术、荧光素酶报告基因技术,分别将FLAG-tagged p38 MAPK 4种亚型、含有鼠iNOS基因启动子区的荧光素酶报告基因质粒(piNOS-Luc)、空载体(pcDNA3)、β-半乳糖苷酶表达质粒(pCMV-β)共转染,检测并比较荧光素酶相对活性。结果(1)未加刺激时,在HEK 293细胞中,p38 MAPK中仅有p38α能够诱导iNOS基因启动子的转录活性;(2)在LPS刺激下,p38 MAPK 4种亚型均能够诱导iNOS启动子的转录活性,其中,p38β所诱导的转录活性最高,p38α的诱导作用亦很明显。结论(1)LPS能够在HEK 293细胞中诱导iNOS基因转录活性;(2)在HEK 293细胞中,p38 MAPK参与了静息时及LPS刺激下对iN-OS基因的转录调控。     

外源性p21WAF1/CIP1基因转染对人胶质瘤细胞生长和细胞周期的影响

目的：探讨外源性p21^WAF1／CIP1基因对胶质瘤细胞生长和细胞周期的影响．方法：采用脂质体介导法将p21^WAF1／CIP1基因质粒转导人人胶质瘤细胞系SHG44细胞，然后用电镜、流式细胞仪等技术对细胞形态、生长及细胞周期进行观察。结果：酶切电泳和斑点杂交显示p21^WAF1／CIP1基因成功的转染至SHG44细胞。转染p21^WAF1／CIP1基因的细胞光镜及电镜下可见凋亡产生；生长速度明显慢于亲代细胞，其倍增时间约是对照细胞的二倍；细胞周期发生明显改变，G1期明显增多，S期明显减少．结论：外源性p21^WAF1／CIP1基因对SHG44细胞的生长和细胞周期有明显的抑制作用，并可诱导细胞凋亡产生。     

子宫内膜癌组织中p16 mRNA及P16蛋白的表达

①目的　探讨抑癌基因 p16与子宫内膜癌发生、发展的关系。 ②方法　应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和免疫组织化学技术 ,对 4 2例子宫内膜癌及 15例正常子宫内膜组织中 p16mRNA及P16蛋白进行检测 ,并结合临床病理特征进行分析。③结果　子宫内膜癌组织中p16mRNA及P16蛋白的阳性表达率分别为6 9.0 5 %和 5 9.5 2 % ,显著低于正常组织 (χ2 =6 .0 15、8.6 2 5 ,P <0 .0 5 )。p16mRNA及P16蛋白的表达缺失与肿瘤的组织学类型无关 (χ2 =0 .10 0、0 .2 94 ,P >0 .0 5 ) ,而与组织学分级和临床分期有关 (χ2 =3.95 4、6 .873,P <0 .0 5 )。④结论　p16mRNA和P16蛋白的表达缺失在子宫内膜癌的发生和发展中可能起重要作用     

Survivin转录变异体在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的研究survivin各转录变异体在胃癌组织中的表达情况及与其预后的关系。方法采用实时荧光定量RT-PCR技术,对77例胃恶性肿瘤患者的肿瘤组织、正常胃黏膜的成对标本进行mRNA定量检测。结果在检测患者肿瘤组织中野生型survivin、survivin-2B与survivin-△Ex3的表达量均显著高于其对应正常胃黏膜组织中的表达量(P<0.01)。在胃癌组织中,survivin的表达率为100%(77/77),survivin-2B的表达率为79.8%(61/77),survivin-△Ex3的表达率为64.9%(50/77)。survivin高表达组患者的生存率明显低于低表达组(P<0.01)。结论Survivin的3个转录变异体中,野生型survivin对胃癌患者预后具有重要的评估价值。     

PFT-α对结肠上皮细胞凋亡和周期的影响及机制探讨

目的探讨p53抑制剂（p-fifty three inhibitor—alpha，PFT-α）对结肠上皮细胞凋亡、周期的影响及机制。研究PFT-α对热化疗损伤结肠上皮细胞的影响。方法顺铂联合温热处理原代培养结肠七皮细胞30min，对比加入不同浓度PFT-α后，Annexin V—FITC／PI染色，流式细胞仪检测细胞凋亡。PI染色检测细胞周期。Western blot检测结肠上皮细胞Cyclin B1和Cdc2（Tyr15）表达。结果不同浓度PFT-α作用于热化疗处理的结肠上皮细胞后，细胞凋亡率下降且呈剂量依赖性。流式细胞仪细胞周期分析显示在运用PFT-α后，结肠上皮细胞的G2／M延长，CyclinB1和Cde2（Tyr15）蛋白表达随PFT—α的剂量升高而逐渐增强。结论PFT-α可能通过促进CyclinB1蛋白表达，Cde2（Tyr15）磷酸化水平升高，降低CyclinB1／Cde2活性，细胞停滞于G2／M期，减轻热化疗对结肠上皮细胞的损伤。     

性传播疾病

20071002 尖锐湿疣中医证型与Th1／Th2细胞因子水平的关系研究；20071003 尖锐湿疣患皮损及外观正常皮肤表皮中P21“和C—myc的表达；20071004 生存素mRNA和Caspase-3蛋白在尖锐湿疣组织中的表达；20071005细胞周期蛋白E、细胞周期蛋白D1和p21^WAF1/CIP1在尖锐湿疣中的表达;[编按]     

小鼠耳蜗核因子-κB p50免疫组化定位

目的 了解核因子-κB(NF-κB)在耳蜗的表达情况.方法 小鼠皮下注射卡那霉素(KA),鼓室注射脂多糖(LPS),以注射等量生理盐水作为对照,用多克隆兔抗体NF-κB p50免疫组化染色,观察NF-κB p50在小鼠耳蜗的表达.结果 NF-κB p50主要定位在耳蜗的螺旋缘、盖膜、血管纹、螺旋韧带、螺旋神经节和神经纤维.整个耳蜗各圈均可观察到免疫反应,而螺旋韧带、盖膜、螺旋突、螺旋神经节和神经纤维均可观察到较强的免疫反应,Corti器的免疫反应比上述结构要弱一些.Corti器的内、外毛细胞,内、外柱细胞,Deiter细胞和Claudious细胞均可观察到NF-κB p50的免疫反应,这些免疫反应在内沟细胞、Hensen细胞和Claudious细胞较弱,而在螺旋神经节可观察到较强的免疫反应,内、外毛细胞核未见免疫反应.结论 注射脂多糖和卡那霉素可使NF-κB p50在小鼠耳蜗产生急性反应.     

p63与头颈部鳞癌

随着p53基因的广泛和深入研究，p53家族的新成员p63与p73陆续被发现。本就p63的表达类型、结构、功能及与头颈部肿瘤的相关性作一综述。p63基因定位于染色体3q27-29，与p53有高度的同源性，与p53不同的是其可以编码多种蛋白质。发现p63主要表达鳞状上皮源性的恶性肿瘤。