电针镇痛的累积效应与大鼠下丘脑、海马蛋白激酶A表达变化的观察

目的:观察电针(EA)"足三里"-"阳陵泉"镇痛的累积效应,及大鼠下丘脑和海马细胞蛋白激酶A(PKA)活性的变化。方法:Wistar雌鼠68只,随机分为正常对照组、慢性压迫损伤(CCI)组、CCI+EA 2天(d)组、CCI+EA 2周(w)组、去卵巢(OVX)+CCI组、OVX+CCI+EA 2 d组、OVX+CCI+EA 2 w组。Morris水迷宫法检查OVX+D-半乳糖皮下注射动物的学习记忆能力。结扎坐骨神经造成CCI慢性痛模型,电针双侧"足三里"-"阳陵泉"穴(2/15 Hz,1~2 mA,1次/d)。用辐射热照射大鼠双侧足底引起的缩腿反应潜伏期(PWL)的差值作为痛敏分数(HS)判断动物的痛反应;用免疫组化法检测下丘脑和海马组织PKA的活性。结果:CCI术后,与正常组比较,各组HS都明显升高。在单纯CCI动物上,与CCI组比,CCI术后第18天CCI+EA 2 d、CCI+EA 2 w的HS显著减小(P<0.05);CCI+EA 2 w组的HS显著低于CCI+EA 2 d组(P<0.05)。在记忆损害的动物上,OVX+CCI+EA 2 w和OVX+CCI+EA 2 d组HS明显低于OVX+CCI组(P<0.05);而两EA组间HS差异没有显著性意义(P>0.05)。CCI+EA 2 w组下丘脑室旁核(PVN)、弓状核(ARC)和视上核(SON)区PKA的灰度值均明显低于正常对照组(P<0.05),PVN和ARC区也显著低于CCI+EA 2 d组(P<0.05);OVX+CCI+EA 2 w组PVN和SON区的PKA灰度值亦均明显低于OVX+CCI组(P<0.05)。说明EA 2 w可上调PKA的表达,且具有累积性作用。OVX+CCI+EA 2 w组ARC和SON区PKA的灰度值均显著高于CCI+EA 2 w组(P<0.05),提示EA上调PKA表达的累积效应在记忆功能减退的动物上明显减弱。海马PKA的表达与SON等下丘脑核团PKA的表达趋势类似。结论:电针镇痛有累积作用,其累积效应可能与下丘脑、海马细胞PKA的表达上调有关,并且与动物神经记忆有密切关系。     

电针对抑郁模型大鼠海马一氧化氮-环磷酸鸟苷信号转导通路的影响

目的:观察电针对抑郁模型大鼠海马一氧化氮-环磷酸鸟苷(NO-cGMP)信号转导通路的影响,探讨电针治疗抑郁症的部分作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组10只。用慢性不可预见性轻度刺激结合孤养的方法制造抑郁模型。造模同时针刺治疗电针组动物,选取"百会""印堂"穴,电针20min,每日1次,连续针刺21d。治疗结束后取大鼠海马组织,用免疫组化法检测神经细胞性一氧化氮合酶(nNOS)表达量,用放射免疫法测定cGMP含量。结果:模型组大鼠海马区的nNOS免疫反应阳性颗粒数目减少,电针组nNOS免疫反应阳性颗粒数目较模型组增多。各组测得的nNOS灰度值,模型组明显高于正常组(P<0.01),电针组明显低于模型组(P<0.01)。模型组大鼠海马中cGMP含量与正常组比较有降低的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);电针组大鼠海马中cGMP含量与模型组比较显著升高(P<0.01)。结论:电针"百会""印堂"穴能够提高抑郁模型大鼠海马区nNOS的表达水平,同时提高海马中cGMP的含量,维持NO-cGMP信号转导通路的信息传递功能,从而起到抗抑郁作用。     

雌激素对慢性脑缺血大鼠认知功能及突触素的影响

目的 研究苯甲酸雌二醇对慢性脑缺血大鼠认知功能及突触素的影响.方法 采用双侧颈总动脉永久性结扎制备慢性脑缺血模型,30只大鼠随机分为3组,A组:假手术组;B组:缺血组;C组:雌激素治疗组.各组于手术60d后,应用Y迷宫、免疫组化及图像分析系统测定大鼠认知功能及海马、齿状回突触素的含量.结果 治疗组较缺血组认知障碍明显改善(P＜0.01),与假手术组相比,缺血组突触素的含量明显下降,治疗组以上变化明显减轻(P＜0.01).结论 苯甲酸雌二醇能改善慢性脑缺血大鼠的认知功能,这可能与增加大鼠脑内突触素的含量有关.     

[Ca^2＋]i change in hippocampal neurons influenced by preconditioning of etomidate fat emulsion following cerebral ischemia in rats

BACKGROUND: It is known that intravenous anesthetic etomidate fat emulsion has cerebral protection. Now many scholars focus on the research of its cerebral protection from molecular biology, but the mechanism of cerebral protection is still fully unclear. OBJECTIVE: To observe the influence of etomidate fat emulsion on the [Ca2+]i in hippocampal neurons during the transient cerebral ischemia injury in rats. DESIGN: Randomized controlled observation. SETTING: Weifang Medical College. MATERIALS: This study was carried out in the functional laboratory of Weifang Medical College between October 2005 and March 2006. Twenty-four male healthy Wistar rats, aged 3 to 4 months, were involved. Etomidate fat emulsion was provided by the limited company of En-hua Medical Bloc in Jiangsu Province (code of H20020511) and the other agents and materials were provided by Laboratory Center of Weifang Medical College. METHODS: The 24 Wistar rats were randomized into 3 groups: sham-operation group, model group and etomidate preconditioning group, with 8 rats in each. Rat models of transient cerebral ischemia injury were made by the ligation of bilateral carotid arteries combined with descending blood pressure in the latter two groups. Before ischemia (ligation of bilateral common carotid artery), rats in the etomidate preconditioning group were intraperitoneally injected with 12 mg/kg etomidate fat emulsion and then persistently intraperitoneally injected with etomidate fat emulsion at 1.0 mg/kg per minute. Rats in the model group were not administrated. Rats in the sham-operation group were only performed bilateral common carotid artery isolation. When rats were modeled, their brain tissues were quickly taken out and detected. MAIN OUTCOME MEASURES: Change of the fluorescence pixel value of the [Ca2+]i in each group by the laser scanning confocal microscope. RESULTS: Twenty-four rats were involved in the final analysis. Fluorescence pixel value in the sham-operation group was in the low level. Fluorescence pixel value in the model group was significantly higher than that in the sham-operation group (P < 0.01). Fluorescence pixel value in the etomidate preconditioning group was significantly lower than that in the model group (P < 0.01). CONCLUSION: The protection of etomidate fat emulsion to the transient cerebral ischemic injury in rats is associated with the inhibition to the increase of [Ca2+]i to some extent.     

花生四烯酸和二十二碳六烯酸对海马神经细胞生长发育的影响

【目的】观察不同浓度花生四烯酸 (AA)和 (或 )二十二碳六烯酸 (DHA)对体外培养海马神经细胞生长发育的影响。【方法】无血清培养液中分别加入不同剂量的AA和 (或 )DHA ,采用噻唑蓝比色试验 (MTT法 )反映各组海马神经细胞存活状况 ,神经元特异性烯醇化酶 (NSE)染色鉴定神经细胞 ,图像分析技术测量神经细胞的胞体大小和突起长度。【结果】培养液中分别添加AA为 4～ 8μmol/L、DHA为 2～ 8μmol/L时 ,神经细胞活力高于对照组 ;当培养液中AA和DHA总浓度为 4μmol/L、比例为 2∶1或 4∶1时 ,神经细胞的活力、胞体面积、最大长径、最大短径和平均突起长度均显著高于单一添加 4μmol/LAA、4μmol/LDHA和对照组。【结论】AA、DHA均具有促进体外培养海马神经细胞生长发育的作用 ;与单独添加AA、DHA相比 ,AA和DHA共同作用的促海马神经细胞生长发育作用更好。     

神经生长因子对小鼠突触体内Ca^2＋水平的调节作用

观察了多次海马内微注射ＮＧＦ对小鼠突触体内游离钙水平的影响，并在离体情况下观察ＮＧＦ对ＥＧＴＡ和ＣａＣｌ２分别造成突触体内低钙和高钙状态的调节作用。结果如下：（１）在体实验表明，一定剂量的ＮＧＦ可显著降低老年小鼠海马突触体内游离钙水平（Ｐ＜００５）；（２）离体实验表明，当突触体游离钙水平降低时，适当剂量的ＮＧＦ具有升高游离钙水平的作用；而突触体内游离钙水平升高时，则ＮＧＦ有降低游离钙水平的作用。提示ＮＧＦ对游离钙水平的双向调节作用可能是ＮＧＦ改善老年性记忆衰退的作用机制。     

大鼠海马内强啡肽1—8和亮啡肽的癫痫发作及电针时的变化

用免疫组织化学方法观察大鼠青霉素致痫及加电针后脑内强啡肽１－８及亮啡肽的变化，致痫时，在海巴门区及苔样纤维上强啡肽１－８含量相显减少，在海巴下脚，ＣＡ１区等结构内亮啡肽含量明显增加，电针后海马中强啡肽１－８含量增加，亮啡肽含量在上述各区显针抗痫可能与脑内强啡肽１－８和亮啡肽的变化有关。?     

海马内部血管构筑—硷性磷酸酶显示法

本文用硷性磷酸酶示内皮法，对１５例ＳＤ系大鼠海马内部的微血管构筑在光镜下进行了观察，结果显示大鼠海马内部各区各层的血管分布与其神经组织构筑有明显的对应关系，即从血管的排列可辨认海马内部各层，ＣＡ１区锥体层血管密度最低，而其腔隙分子层血管密度最高，辐状层血管相互平行排列且与海马裂垂直。在ＣＡ２及ＣＡ３区交界处有恒定的小动脉及其分支出现，ＣＡ１与ＣＡ２区移行处锥体层硷性磷酸酶反应可明显差异，此外还观察     

帕罗西汀对抑郁模型大鼠不同脑区环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的影响

目的探讨帕罗西汀在不同用药时间对抑郁模型大鼠海马、前额叶皮质环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）磷酸化（p-CREB）及总蛋白（t-CREB）水平的影响。方法成年雄性SpragueDawley大鼠36只，随机分为6组：对照组、抑郁模型组（以下简称模型组）、抑郁模型＋用药1d组（以下简称用药1d组）、抑郁模型＋用药1周组（以下简称用药1周组）、抑郁模型＋用药2周组（以下简称用药2周组）和抑郁模型＋用药4周组（以下简称用药4周组），每组各6只。抑郁模型的制作为强迫大鼠游泳4周，每天1次，每次15min。帕罗西汀的剂量为10m∥kg体质量，灌胃给药，时间分别为1d和1，2，4周，每天1次，于每次游泳前用药。采用Westernblot法检测各组大鼠海马及前额叶皮质的p-CREB和t-CREB水平。结果（1）模型组及用药1d、1周组大鼠海马p-CREB水平明显低于对照组（P〈0．01），用药2，4周组大鼠海马p-CREB水平与对照组的差异无统计学意义（P〉0．05）；模型组及各用药组海马t-CREB水平与对照组的差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）模型组及用药1d和1，2周组大鼠前额叶皮质p-CREB水平均明显低于对照组（P〈0．05），用药4周组与对照组的差异无统计学意义（P〉0．05）。模型组及用药1d、1周组大鼠前额叶皮质t-CREB水平与对照组的差异无统计学意义（P〉0．05），用药2，4周组大鼠前额叶皮质t-CREB水平均明显高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）。结论慢性强迫游泳导致大鼠海马及前额叶皮质CREB活性降低，长期使用帕罗西汀可逆转此效应，提高抑郁大鼠前额叶皮质的CREB水平。     

人参总皂甙对不完全性脑缺血后海马CA1区NOS阳性神经元表达的影响

目的探讨人参总皂甙(GS)对不完全性脑缺血及再灌注不同时间后海马CA1区一氧化氮合酶(NOS)的影响及对神经元的保护作用.方法用双侧颈总动脉夹闭加放血的方法制成大鼠不完性脑缺血及再灌注模型,以还原烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学方法观察缺血及再灌注后海马CA1区NOS阳性神经元变化及GS对其的影响.结果单纯缺血组海马CA1区在缺血30min时NOS阳性细胞数最高(44.5±7.42),为假手术组2倍,再灌注2h、12h、24h、3d后逐渐下降,5d时恢复正常水平(21.12±3.50),缺血再灌注3d、5d时出现神经细胞损伤.GS能抑制缺血30min及再灌注各时程中NOS阳性神经元数量变化,并能预防缺血再灌注后迟发的神经元损害.结论GS对大鼠不完全性脑缺血及再灌注不同时程后海马CA1区NOS的异常表达有抑制作用,对神经元的保护作用.