布鲁顿酪氨酸激酶对破骨细胞增殖及分化作用的实验研究

目的 观察布鲁顿酪氨酸激酶（BTK）对破骨细胞增殖及分化的影响,探讨BTK对根尖周炎骨破坏的作用。方法 破骨前体细胞RAW264.7经100 ng·L ^-1核因子κB受体活化因子配体（RANKL）诱导5 d后,通过观察细胞形态、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色及实时荧光定量PCR（RT-qPCR）的方法,验证破骨细胞是否诱导成功。破骨细胞诱导成功后,转染BTK-小干扰RNA（siRNA）24 h,利用RT-qPCR检测TRAP mRNA的表达,采用CCK-8和TRAP酶活性检测法检测破骨细胞的增殖及分化情况。结果 RAW264.7细胞经RANKL诱导5 d后,可见大量体积较大,外观呈圆形、椭圆形,周围有不规则突起及TRAP染色阳性的多核破骨细胞。经BTK-siRNA转染24 h后,破骨细胞TRAP mRNA的表达水平显著降低（P<0.05）,其增殖及分化能力也明显受到抑制（P<0.05）。结论 抑制BTK表达,可以抑制破骨细胞的增殖及分化;BTK可作为抑制破骨细胞的新靶点。     

Asxl1在炎性微环境中对成骨细胞增殖分化的作用

背景:研究表明Asxl1的缺失可导致骨质发育不全、骨质缺损类疾病的发生,但目前在根尖周炎环境下该因子与骨破坏之间的关系暂无相关报道。目的:探讨炎性微环境下Asxl1对成骨细胞增殖分化的影响。方法:实验选用脂多糖刺激MC3T3-E1细胞建立体外炎性微环境,通过CCK-8实验筛取脂多糖最佳质量浓度和最佳作用时间,然后用20 mg/L脂多糖刺激MC3T3-E1细胞24 h,免疫荧光检测Asxl1的蛋白表达水平,Real Time-PCR检测Asxl1 mRNA的表达水平。为进一步验证Asxl1基因在炎性微环境中影响成骨细胞的增殖与分化,脂多糖刺激形成炎性微环境后转染Asxl1-SiRNA 24 h,采用CCK-8检测细胞增殖活性,RealTime-PCR检测Asxl1及成骨相关基因ALP和RUNX2 mRNA的表达水平。结果与结论:①脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后,Asxl1蛋白和mRNA表达水平呈降低趋势;②脂多糖刺激MC3T3-E1细胞后,转染Asxl1-SiRNA 24 h,细胞增殖活性下降趋势明显,Asxl1基因及成骨相关基因ALP和RUNX2 mRNA的表达水平明显降低;③结果提示,Asxl1可能通过参与炎性反应过程,影响成骨细胞的增殖与分化,进而参与骨破坏进程。     

白细胞介素17在人乳头状瘤病毒感染的宫颈癌中表达变化及临床意义

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)所致的宫颈癌前病变(CIN)和宫颈癌患者体内白细胞介素17(IL-17)表达的变化及临床意义。方法选取CINⅠ级、CINⅡ级及CINⅢ级患者各20例和宫颈癌患者30例,所有患者均为HPV阳性,另选20名HPV阴性的正常女性作为对照;以酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组血清中IL-17;以流式细胞术检测各组外周血中IL-17+CD4+细胞。结果 CINⅠ组和CINⅡ组血清中IL-17分别为(143.6±27.3)pg/ml和(127.7±33.1)pg/ml,对照组为(48.5±11.2)pg/ml,差异均有统计学意义(P<0.05);CINⅢ组和宫颈癌组血清中IL-17分别为(210.9±22.4)pg/ml和(239.6±41.5)pg/ml,不仅与对照组相比差异有统计学意义,与CINⅠ组和CINⅡ组相比,差异也有统计学意义(P<0.05);CINⅠ组和CINⅡ组的IL-17+CD4+细胞分别为(1.92±0.26)%和(2.16±0.98)%,对照组为正常对照(0.37±0.08)%,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);CINⅢ组和宫颈癌组的IL-17+CD4+细胞分别为(3.74±0.34)%和(4.03±0.41)%,与CINⅠ组和CINⅡ组相比,其表达进一步增高(P<0.05)。结论血清IL-17水平的上升和IL-17+CD4+细胞数量的增加对HPV所致宫颈癌前病变和宫颈癌的恶性程度具有一定的提示意义。     

本科护生临床实习期间压力因素的调查分析

目的了解本科护生在临床实习阶段的压力因素，以便针对性采取相应对策，促使角色尽快转变。方法采用问卷调查方法对127位护生作压力源调查。结果压力因素依次为专业心理矛盾、实习阶段的学习压力、人际关系敏感、实际操作能力弱等。结论本科护生实习期间压力大，心理健康状况不容乐观，应加强心理健康教育。     

提高成年大鼠神经干细胞单克隆形成率的方法

目的　探索提高神经干细胞单克隆形成率的方法并证实所分离培养的神经干细胞仍具有多分化潜能。　方法　对神经干细胞单克隆方法进行改良 ,即在单克隆培养液中加入 1 2原代克隆培养液。将所得到的单细胞克隆球消化、分离、增殖成大量的神经干细胞球 ,用含血清的DMEM分化培养液促其分化。 14d后 ,分别用神经元和胶质细胞的特异性标记物MAP 2标记神经元、GFAP标记星形胶质细胞和CNP标记少突胶质细胞。　结果平均每块含 1 2原代克隆培养液的 96孔培养板中有 2～ 3只孔可形成克隆球 ,而含纯新鲜培养液的培养板中仅 0 5～ 1 0只孔可形成克隆球。这些单细胞克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球分化后分别呈MAP 2、GFAP和CNP免疫荧光阳性。　结论　单细胞克隆实验中加入 1 2原代克隆培养液可提高神经干细胞的单克隆形成率 ,单克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球亦具有多分化潜能。     

本科护生临床实习期间压力原因的调查分析

目的了解本科护生在临床实习阶段的压力因素,以便针对性采取相应对策,促使角色尽快转变.方法 采用问卷调查方法对127位护生作压力源调查.结果 压力因素依次为专业心理矛盾、实习阶段的学习压力、人际关系敏感、实际操作能力弱等.结论 本科护生实习期间压力大,心理健康状况不容乐观,应加强心理健康教育.     

脑外伤及胚脑移植患者脑电地形图观察

目的：探讨脑电地形图在脑外伤和胚脑移植病人临床价值。方法：应用NDC-200型脑电地形图仪对临床颅脑外伤患者及胚脑移植患者进行脑电信号检测和脑电功率谱分析。结果：脑外伤患者损伤侧病理性δ波和θ波的绝对功率值和相对功率值均明显地高于健侧和对照组；但经胚脑移植后，随着临床症状的改善，上述现象明显恢复并与正常对照组接近。结合在鼠脑额叶皮层损伤后进行胚脑移植的脑电地形图资料及形态学观察证实脑电地形图有改善的大鼠均有移植区存活良好的佐证。结论：脑电地形图能准确地定性，定量和定位反映脑功能状态的改变，并且可作为中枢神经系统再生功能测试手段之一。     

海人酸、使君子在酸致Huntington病鼠纹状体NOS阳性细胞的变化

为了研究海人酶和使君子酸对大鼠纹状体NOS阳性细胞的影响,用神经毒海人酸、使君子酸破坏大鼠左侧尾壳核,将夜间活动超过600次、主动回避试验阳性率在35％以下的大鼠作为成功的Huntinton舞蹈病模型。注射后2个月,将动物脑切片进行Nissl、NADPH－d组化和GFAP免疫组化反应。结果表明,海人酸和使君子酸均可使纹状体nNOS阳性神经元丢失、出现iNOS阳性胶质细胞和侧脑室扩大,两者无显著差异。在损伤中心区nNOS阳性元减少甚至消失,但这种变化自中心向周围呈渐变趋势;iNOS阳性胶质细胞呈两种不同形态：一类胞体略大而突起粗短,一类胞体小而突起相对较长。对侧纹状体及伤侧纹状体非损毁部均未见NOS阳性胶质细胞;NADPH－d组化和GFAP免疫组化双重反应表明一些iNOS胶质细胞为GFAP阳性胶质细胞。本研究提示,海人酸和使君子酸均可使纹状体nNOS神经元减少消失,损毁区出现的NOS阳性胶质细胞为诱导型神经胶质细胞(iNOS）。海人酸和使君子酸所引起的Huntington病模型鼠形态学及行为变化均无明显差异。     

拜斯亭治疗高脂血症42例近期疗效观察

通过观察拜斯亭对临床42例高脂血症患者的TC和TG的影响,表明拜斯亭有明显降低TC和TG的作用,总有效率分别为97.6%和67.9%.说明拜斯亭降低血脂近期疗效明显,是一种有效的降脂药.