不同器官细胞因子在多细菌感染性炎症时的基因表达和临床意义

目的探讨肝、肺细胞因子基因表达与腹腔吞噬细胞上清液、循环血中细胞因子含量的关系,为临床诊治多细菌感染引发的炎症提供实验依据.方法将30只小鼠分为假手术对照组(sham组)和盲肠结扎组(CLP组).采用RT-PCR法检测肝脏和肺脏肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)的基因表达情况,采用ELISA法检测腹腔巨噬细胞上清液和循环血液中相应细胞因子含量.结果CLP组的TNF-α、IL-10基因表达和腹腔巨噬细胞上清液、循环血液中的相应细胞因子含量均高于sham组.CLP后18h组与4h组比较,TNF-α在腹腔巨噬细胞上清液、循环血液中的活性均有显著性差异(P＜0.05),在肝、肺中基因表达有非常显著性差异(P＜0.01);IL-10在腹腔巨噬细胞上清液和循环血液中的含量无显著性差异,而在肝、肺中基因表达有显著性差异.结论发生多细菌感染性炎症时,肝、肺参与细胞因子的表达;血液中细胞因子含量不能完全代表组织器官内的基因表达情况;多细菌感染性炎症治疗应考虑靶器官细胞因子的表达状态.     

髓过氧化物酶对巨噬细胞骨桥蛋白表达的影响

目的　研究髓过氧化物酶(MPO)对巨噬细胞骨桥蛋白表达量的影响。方法　人单核细胞转化的巨噬细胞 随机分为对照组,MPO不同浓度(125、250、500、1000、2000U/L)及时间(3、24、48h)干预组,用RT PCR技术结合 密度扫描分析,观察巨噬细胞内骨桥蛋白mRNA量的变化。结果　MPO浓度为1000U/L即能刺激巨噬细胞内 骨桥蛋白mRNA量增加,骨桥蛋白的mRNA与β actin的mRNA光密度比值3h干预组1.15±0.09,24h干预组 1.20±0.02,48h干预组1.09±0.04分别较对照组提高57.53%、64.38%和49.32%。结论　髓过氧化物酶能在 基因水平上刺激巨噬细胞骨桥蛋白的表达。     

剥苔基因分子机理的研究

目的:从舌上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bax、TGF-β3表达的角度研究剥苔(舌黏膜剥脱)的基因分子的病理生理机制.方法:运用TUNEL技术、原位杂交、免疫组化和图像分析技术,进行定性和定量分析.结果:与正常薄苔比较,剥苔细胞凋亡增加,同时凋亡相关基因bax表达水平升高,而TGF-β3表达水平降低.结论:促凋基因bax表达上调可能是引起舌苔上皮细胞凋亡增加从而导致舌黏膜剥脱的重要病理机制.     

神经细胞黏附分子L1-Ig（1-4）的原核表达及其功能

目的：利用基因克隆、表达、纯化等分子生物学手段获取具有生物活性的神经细胞黏附分子L1（L1）的Ig（1-4）结构域融合蛋白。 方法：实验于2001-10／2004-12在解放军第二军医大学神经生物教研室完成。①从新生4d的SD大鼠的海马组织中提取总RNA，采用反转录-聚合酶链反应法获取L1-Ig（1-4）基因，进行序列分析后构建表达载体pET28a（＋）-LI-Ig（1-4）。②转染大肠杆菌BL21，用IPTG诱导L1-Ig（1-4）的表达。③利用Ni2＋-NTA柱纯化和复性。④用L1-Ig（1-4）融合蛋白观察培养脊髓原代神经元轴突生长情况及其活性，未加入融合蛋白的细胞做对照。 结果：①克隆出编码正确的大鼠L1-Ig（1-4）基因。②并在大肠杆菌中获得高效表达，表达产物占全菌总蛋白的28-3％。③Ni^2＋-NTA柱纯化后的纯度达90％以上。④加入融合蛋白后脊髓神经元突触的生长能力较未加入融合蛋白的细胞增强[（56&;#177;3．8），（43&;#177;2．7）μm，P〈0．01]。 结论：通过原核表达可大量获得L1-Ig（1-4）融合蛋白，该融合蛋白同样具有促神经生长的生物学活性。     

速率法测定血清心肌酶谱干扰因素实验探讨

速率法测定血清心机酶谱(AST、CK、LDH、α—HBDH)结果准确,但实验方法外的干扰因素较多,有关报道较少。本文就心肌酶谱测定方法外的干扰因素进行探讨,对标本离心分离速度,采血后血清分离时间、肝素抗凝血浆与血清测定的比较、VitaminC、Hb对测定影响等因素进行实验研究。现将结果报告如下。     

感染性腹泻患儿心肌酶谱的变化

目的：探讨感染性腹泻患儿心肌酶谱的变化情况，方法：对８４例感染性腹泻患儿作心肌酶谱测定及对其中７０例同时做心电图检查的患儿进行分析，结果：心肌酶谱出现异常改变者轮状病毒肠炎占７６．７％，空肠弯曲菌肠及占６９．２％，细菌性性痢疾占５５．０％，致病性大肠杆菌肠炎占７１．４％，差异无显著性（Ｐ〉０．０５）；心电图有异常表现的分别占３１．０％，４０．０％，３１．３％，３３．３％，四者间差异无显著性（Ｐ〉０     

针剌“风府”穴对大鼠脑内神经肽胆囊收缩素基因表达的影响

手法针剌大鼠“风府”（天门）穴，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ方法针剌不同时限的生理状态大鼠脑内神经肽胆囊收缩素（ＣｈｏｌｅｃｙｓｔｏｋｉｎｉｎＣＣＫ）的基因在转录水平的表达情况进行比较研究。结果表明针剌即刻ＣＣＫ信息核糖核酸（ｍＲＮＡ）表达开始增加，３小时其深度急剧升高，６小时已回落，２４小时几近平复。提示针剌后３－６小时ＣＣＫ基因表达的高峰时期，手法地剌诱发的脑内ＣＣＫｍＲＮＡ的表达没有观察到累     

AFP的基因结构和AFP mRNA的检测方法及应用前景

AFPmRNA是成人肝细胞癌变后AFP基因表达产物，是从癌灶脱落入血的肝癌细胞的标志，检测AFPmRNA对肝细胞癌转移的基础与应用研究具有指导意义。本文论述了AFPmRNA的基因特点，检测方法及应用前景。     

C—erbB—2和波形蛋白在乳癌表达及临床意义分析

Ｃ－ｅｒｂＢ－２和波形蛋白在乳癌表达及临床意义分析辽宁省人民医院病理科（１１００１５）景士兵魏少忠任秋华王泽兴中国医科大学第二临床学院病理科（１１０００３）何小明沈阳市红十字会医院外科（１１００４３）吴星恺近年来研究报告表明Ｃ－ｅｒｂＢ－２在乳癌中的...     

基因芯片技术在肿瘤研究中的应用

基因芯片也称为基因微阵列 (Microarray) ,是近几年发展起来的一项前沿生物技术 [1 ] ,是指采用原位合成或直接点样的方法将 DNA片段或寡核苷酸片段排列在硅片、玻璃等介质上形成微阵列 ,待检样品用荧光分子标记后 ,与微阵列杂交 ,通过荧光扫描及计算机分析即可获得样品中大量的基因序列及表达信息 ,以达到快速、高效、高通量地分析生物信息的目的。基因芯片能将 c DNA文库中的已知和未知序列固定于玻片上 ,可同时检测比较生物样品中多个已知或未知的序列表达状况 ,向研究者报告所要比较样品中的差异基因 ,为进一步有效地进行基因测序和…