与大劣按蚊先天免疫相关丝氨酸蛋白酶的克隆及分析

目的克隆及分析与先天免疫相关的大劣按蚊差异基因。方法利用抑制性消减杂交 （ suppression subtractive hybridization, SSH）方法克隆大劣按蚊差异基因，并对与先天免疫相关的差异基因（文中命名为T6基因）进行生物信息学分析及半定量实验，分析约氏疟原虫感染前后其转录的变化，探讨它与按蚊抗疟原虫感染的先天免疫反应的关系。结果目前克隆的差异基因包含以下几类：①与先天免疫相关的酶类；②与能量代谢有关的酶：③与信号传递和调节有关的因子。对与先天免疫相关的分子进行的半定量实验表明，大劣按蚊T6基因的转录与感染疟原虫相关。结论本研究成功地克隆了与先天免疫相关的大劣按蚊差异基因，进一步的实验分析提示该基因可能与按蚊抗约氏疟原虫感染的黑化反应相关。     

人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2基因的克隆与鉴定

目的 获得人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶－２（ＭＡＳＰ－２）编码区基因。方法采用 ＲＴ－巢式 ＰＣＲ技术从 人胎肝组织总ＲＮＡ扩增目的cＤＮＡ片段,克隆人ｐＧＥＭ－Ｔ载体,酶切图谱分析和测序鉴定。结果获得了编码合信号 顺序的ＭＡＳＰ－２肽链全长cＤＮＡ,将其与pＧＥＭ－Ｔ载体连接,转化大肠杆菌ＴＧ１,建立了ＭＡＳＰ－２的重组克隆。酶切图 谱与微机分析结果无异;序列分析表明,与报道的人 ＭＡＳＰ－２ｃＤＮＡ序列一致。结论成功克隆了人 ＭＡＳＰ－２基因,为深 入研究补体凝集素途径的激活机制和甘露聚糖结合凝集素基因突变引起免疫缺损的发病机制奠定了基础。     

蛋白激酶抑制剂

蛋白激酶抑制剂方芳，刘景生（中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院，北京１００００５）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｒｅｉｓｎｏｗｃｏｎｖｉｎｃｉｎｇｅｖｉｄｅｎｃｅｔｈａｔｐｒｏｔｅｉｎｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｉｓａｃｏｍｍｏｎｃ...     

酶法合成L—丝氨酸及反应液中氨基酸的分离

含ｇｌｙＡ的基因工程菌所表达的ＳＨＭＴ可催化甲醛和甘氨酸特异地合成Ｌ－丝氨酸。对酶法合成的部分条件进行了优化,并根据甲醛滴定的原理,确定了通过检测ｐＨ变化控制甲醛流加速度的方案,最终的反应液中Ｌ－丝氨酸浓度达０．２ｍｏｌ／Ｌ。反应结束后的酶反应液中同时含有甘氨酸和丝氨酸,利用国产７１７树脂获得较为理想的分离效果,丝氨酸的收率达７７％,高效液相分析表明其中不含甘氨酸等杂质。     

O-苄基丝氨酸苄酯盐酸盐的制备方法研究

目的 研究O-苄基丝氨酸苄酯盐酸盐的制备方法。方法 从L-Ser(Bzl)-OH与Boc20／NaOH反应制备6x-Ser(Bz1)-OH(Ⅱ)后，试用4种方法合成关键中间原料Boc-Ser(Bzl)-OBz1(Ⅲ)。用HCl／EtOAc法或HCl／EtOH法脱Boc，得到目标化合物I。结果 L-Ser(Bzl)-OH和Boc20反应，以83．7％的收串制得Ⅱ。Ⅱ与PhCHzBr／Et3N或PhCH2OH／CDI或DCC／HOBt反应，得中间产物Ⅲ，Ⅲ再脱去Boc合成目标化合物(I)，收率60％-84％。结论 由L-Ser(Bz1)-OH出发制得Boc-Ser(Bzl)-OH后，在Bzl-Br／Et3N／EtOAc／reflux反应条件下顺利得到Ⅲ，进一步脱Boc得到目标化合物I。HCl／EtOAc法较HCl／EtOH法更快、更安全。     

复能剂在治疗有机磷中毒中的应用

急性有机磷中毒的治疗除消除毒物外,解毒包括2个方面,一是治标(抗乙酰胆碱),二是治本(应用胆碱酯酶复活剂),有机磷农药属于有机磷酸酯类化合物,大量进入人体后与胆碱酯酶溶解部位的丝氨酸以共价建结合,形成中毒酶一磷酸化胆碱酯酶,不易水解,临床出现中毒症状。 1 中毒表现大体分3方面的症状:(1)中枢神经系统症状如头痛、头     

组织激肽释放酶基因7研究进展

组织激肽释放酶7(kallikrein7,KLK7)是组织激肽释放酶基因家族成员之一,该家族均表达丝氨酸蛋白酶,近些年关于该家族基因的研究报道越来越多,多数学者认为该家族表达产物与多种疾病相关 .现将KLK7基因与疾病关系的近期文献综述如下.     

抗癌药Sorafenib

Ras/Raf/MEK途径作为调控细胞生长及存活的信号传导系统,当被激活时会引起一系列自细胞表面至胞核的连锁反应,最终影响细胞的增殖、凋亡、分化和转化。其中MEK为MAP/ERK激酶,而ERK为胞外信号器相关激酶;Raf是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,为Ras的下游效应器酶,一旦被激活,继而激活MEK     

D-丝氨酸在中枢神经系统的作用研究进展

长期以来,人们普遍认为D型氨基酸在高等生物中没有功能。但最近10年的研究表明,D丝氨酸不但能够被胶质细胞合成和分泌,而且能够作为共激活因子,作用于NMDA受体的“甘氨酸位点”,参与该受体的激活。该文对D丝氨酸在中枢神经系统的产生、代谢和作用进行了简要介绍。     

D-serine enhances impaired long-term potentiation in CA1 subfield of hippocampal slice from aged senescence-accelerated mouse prone／8

The molecular and cellular mechanisms underlying the cognitive deficient of senescence-accelerated mouse prone/8 (SAMP8) have been attributed to many pathobiological changes in neurons. Recently, increasing evidence have shown that astrocyte, by mean of D-serine, was involved in the process of synaptic transmission. Here we reported the decrease of longterm potentiation (LTP) in SAMP8 along with aging, and the