散发性病毒性脑炎免疫组化和原位杂交研究

２０例临床诊断为散发性病毒性脑炎的尸检和活检脑组织，通过单纯疱疹病毒多克隆抗体免疫组化和生物素标记单纯疱疹病毒ＤＮＡ探针原位杂交研究，５例诊断为单纯疱疹病毒脑炎。结果说明：单纯疱疹病毒是国内散发性病毒性脑炎的重要病原；免疫组化和原位杂交是诊断单纯疱疹脑炎的两种敏感方法。     

正、反义β-1,4半乳糖基转移酶Ⅱ和Ⅴ地高辛标记RNA探针的制备和应用

目的 :为了探讨 β1,4半乳糖基转移酶 -Ⅱ和V(β1,4-galactosyltransferaseⅠ ,β -1,4-GalT -ⅡandⅤ )表达定位 ,本实验通过分子生物学手段 ,制备了正、反义 β -1,4-GalT -Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针。 方法 :设计引物 ,提取小鼠脑总RNA ,通过RT -PCR方法 ,得到 β -1,4-GalT -Ⅱ和Ⅴ基因序列 ,将其克隆到 pGEM -T载体。根据其多克隆酶切位点和Sp6及T7位置 ,分别酶切后作为转录模板 ,通过Sp6及T7RNA聚合酶 ,得到正、反义 β -1,4-GalT -Ⅱ和V地高辛标记的RNA原位杂交探针。检测标记探针的效价后 ,最后通过原位杂交分析标记探针的特异性和杂交效果。结果 :本实验得到了高效价的正、反义 β -1,4-GalT -Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针 ,并表现出很好的杂交效果。结论 :正、反义 β -1,4-GalT -Ⅱ和VRNA原位杂交探针的制备 ,为进一步研究 β -1,4-GalT -Ⅱ和Ⅴ在组织中的表达 ,尤其在神经组织的定位奠定基础     

地高辛精标记cRNA探针原位杂交法检测大鼠胃肠胰系统生长…

目的：建立敏感的非放射性原位杂交技术检测胃肠调节肽基因的表达。方法：用体外转录法制备地高辛精（Ｄｉｇ）标记生长抑素ｃＲＮＡ探针，在４％多聚甲醛固定的胃、十二指肠和胰腺恒冷箱切片标本上进行了原位杂交。结果：杂交阳性部位呈紫蓝色，位于胞浆，背景浅谈，反差强烈。含生长抑素ｍＲＮＡ细胞与以前所报道的生长抑素免疫反应细胞的形态、分布均一致。结论：Ｄｉｇ标记ｃＲＮＡ探针原位杂交法敏感、简便、迅速、可靠，可用于     

光谱核型分析技术在产前诊断染色体复杂核型异常中的应用

如何对精细的染色体异常做出准确的核型分析，一直是产前诊断中的研究课题。应用传统的细胞遗传学G显带技术进行的染色体核型分析，已经成为染色体异常的常规筛选方法。但其费时、费力，对复杂染色体核型异常的分析很不理想，难以自动化操作。荧光原位杂交技术具有高度的敏感性和特异性，但它只能检测已知的染色体核型异常。光谱核     

HCMV感染动物胃肠组织损伤实验研究

目的 探讨HCMV感染是否引起大鼠和家兔胃肠组织损伤。方法 将人巨细胞病毒(Human Cyto—megalovirus，HCMV)AD168毒株静脉接种大鼠和新西兰兔，大鼠90d、兔30d后，检查动物胃、肠组织的病理变化，用免疫组化方法和原位杂交方法检查组织中的病毒抗原和DNA片段。结果 接种病毒之部分动物出现食量减少、粘液性大便，胃粘膜组织可见淋巴细胞浸润，肠粘膜变性坏死，甚至有穿孔灶；在粘膜细胞中查到病毒抗原或DNA片段。结论 HCMV感染可以侵犯动物胃肠组织并引起该组织病理损伤。     

汉坦病毒M RNA在隐性感染大鼠组织中的分布(论著)

目的：了解汉坦病毒ＭＲＮＡ在隐性感染大鼠各组织中的定位与分布情况。方法：以地高辛标记的汉坦病毒的ＭＲＮＡｃＤＮＡ为探针，与隐性感染大鼠的多种内脏组织进行原位分子杂交。结果：病毒ＭＲＮＡ主要分布在感染大鼠的肝脏，定位于受染细胞的胞浆，这与在死于流行性出血热的患者尸检组织中的分布有所不同。结论：（１）肝脏是鼠类最易受汉坦病毒侵犯与寄生的器官；（２）汉坦病毒感染大鼠与人的机理有所不同，这很可能是大鼠感染汉坦病毒后不发病的原因之一。     

荧光原位杂交技术在辐射剂量学中应用进展

荧光原位杂交技术在辐射剂量学中应用进展姜涛作者单位：１０００８８北京，卫生部工业卫生实验所早在六十年代，当染色体分析技术开始用于辐射剂量估算时，一些染色体工程学者就打趣说：“如果生物学家能将每一条染色体涂染成不同颜色，一切就将变得简单得多”。三十年后...     

电镜水平的核酸原位杂交研究进展

电镜水平的原位杂交旨在将细胞、染色体和病毒等的核酸分子定位与超微形态相互联系。本文就此项技术的原则,电镜样品原位杂交的类型,结合最新的电镜原位杂交的技术和研究进展作一综述。指出,简化复杂的顺序,达到简便、精确、保持靶序列的自然定位和超微结构的细致清晰是电镜原位杂交技术向更高水平发展的方向。     

母血中胎儿有核红细胞的荧光原位杂交法在产前诊断中的可行性探讨

探讨荧光原位杂交法（FISH）对母血中胎儿有核红细胞（NRBC）进行无创性产前诊断的可行性。20例孕龄15-20周的孕妇外周血经不连续密度梯度离心、制片、显微镜下识别并共计数NRBC及定位，然后行Y染色体的FISH检测。结果发现10例孕男性胎儿的孕妇外周血细胞涂片中每例均有阳性杂交信号出现；阳性率为60％（24/40）。10例孕女性胎儿的孕妇外周血细胞涂片中1例出现阳性杂交信号；阴性率为95％（38/40），假阳性率仅为5％（2/40）。结果提示FISH法对于用母血中分离到的胎儿细胞进行染色体异常的无创性产前遗传学检查具有重要意义。     

半乳糖凝集素PPL13在人胎盘血管内皮细胞中表达的实验研究

目的：以原位杂交法检测PPL13在人胎盘组织的表达情况。方法：用DIG标记的PPL13有义RNA探针及反义RNA探针与胎盘组织切片进行原位杂交。结果：反义RNA探针杂交标本显色3h，显微镜下可见胎盘毛细血管内皮细胞中出现棕色沉淀物，滋养层细胞中未见棕色沉淀物；而有义RNA探针杂交标本显色24h仍无棕色沉淀物出现。结论：PPL13在人胎盘内皮细胞中特异性表达．提示PPL13可能与胎盘的屏障作用有关。