正常人眼小梁组织的二维凝胶电泳及质谱分析

【目的】应用二维电泳和质谱对正常人眼小梁组织蛋白质组的进行初步分析。【方法】采用二维凝胶电泳对正常人眼小梁组织进行蛋白分离和图像分析。分别用(7cm×8cm、13cm×16cm、18cm×16cm)3种不同尺寸大小凝胶分离蛋白,并结合基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析及数据库搜索从而鉴定部分蛋白质斑点。【结果】建立小梁组织蛋白样品处理及二维凝胶电泳的实验条件及方法,获得正常人眼小梁组织二维凝胶电泳蛋白图谱。3种不同尺寸大小凝胶的蛋白质分离斑点数分别为230个、875个、1213个。质谱鉴定出14个蛋白点。【结论】完成人眼小梁组织蛋白质的二维电泳凝胶“标准”图谱并作质谱分析的方法性探索对同类研究具有参考意义,为分析小梁组织在青光眼发病过程中蛋白质表达改变研究提供了新的方法及途径。     

Plasma proteomic profiling for detecting and differentiating in situ and invasive carcinomas of the uterine cervix

The objective of this study was to identify multiple plasma protein markers that might be characteristic of in situ and invasive cervical cancers. Plasma samples obtained from patients with in situ cervical cancer (carcinoma in situ [CIS], n= 32), from patients with early invasive cervical cancer without lymph node metastasis (squamous cell carcinoma [SCC], n= 60), and from age-matched disease-free controls (n= 37) were analyzed by cation-exchange protein chips and surface-enhanced laser desorption and ionization time-of-flight mass spectrometry. A classification tree defined by six protein peaks could discriminate 84 of the 92 cancers (CIS and SCC) and 36 of the 37 controls, with 91% sensitivity and 97% specificity. In comparing the CIS and SCC samples, two protein peaks with Mr values of 6586.41 and 3805.68 were able to classify 55 of the 60 SCC and 31 of the 32 CIS samples, with 92% sensitivity and 97% specificity. This study demonstrates for the first time the feasibility of differentiating in situ and invasive cervical cancers through plasma protein profiling. Identification of the proteins different in invasive and in situ cancer may be of great value in the understanding of cervical cancer invasion and in the development of novel therapeutic intervention.     

切割海马伞海马中56 kD差异蛋白的质谱分析

目的:探讨切割海马伞海马中具有生物活性的56kD差异蛋白的组成成份及其功能。方法:切割SD大鼠海马伞后14d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对56kD差异蛋白进行检测和功能分析。结果:质谱分析找到了33组肽段,这些蛋白按照其功能可以分为:细胞骨架蛋白、参与代谢的酶、信号传递、蛋白降解、核酸水解、氧化应激、神经递质运输、突触形成、功能未知蛋白。结论:切割海马伞海马中56kD差异蛋白中含有功能涉及神经干细胞迁移、分化的蛋白质。     

DADS诱导HL-60细胞分化的相关蛋白

目的研究二烯丙基二硫诱导人髓性白血病HL-60细胞分化过程中蛋白质组的差异表达。方法形态学观察和硝基四氮唑蓝还原反应鉴定DADS诱导HL-60细胞分化；运用蛋白质组学方法（双向凝胶电泳、质谱分析、生物信息学方法）分析鉴定差异表达的蛋白质。结果DADS诱导HL-60细胞分化后，形态发生明显变化，NBT还原能力明显增强。通过质谱分析和数据库搜索初步鉴定了18个差异表达的蛋白质点，其中galectin-10在处理组中表达上调，钙网硬蛋白前体则表达下调。结论galeetin-10表达上调、钙网硬蛋白前体表达下调与DADS诱导HL-60细胞分化有关。     

小波变换-人工神经网络用于烟酸片的近红外快速、无损定量测定

目的：研究采用近红外漫反射光谱法结合小波变换-人工神经网络算法用于烟酸片的无损含量测定。方法：所有光谱通过载有InGaAs检测器和光纤探头的傅立叶变换近红外装置获得。所有样品在12000cm^-1到4000cm^-1扫描，每个样品光谱扫描64次，光谱预处理采用一阶导数。特定波段7999．599～3999．8cm^-1用于建模，线性范围：50％～150％。结果：预示集平均回收率100．06％，RSD％为1．5。为确证近红外漫反射光谱法应用的可行性，预示集与参比方法紫外分光光度法测定结果进行比较，采用配对比较t检验，近红外法与紫外光谱法比较无显著性差异。结论：近红外漫反射光谱法快速，简便，无损，能够用于烟酸片含量测定。     

急性中毒患者血液毒鼠强的GC/MS检测及临床应用

目的利用气相色谱-质谱（GC/MS）建立一种快速检测中毒患者血液毒鼠强的方法.方法考察5种有机溶剂液-液法提取血液毒鼠强的回收率,研究毒鼠强的线性方程、最低检测限及精密度.结果乙酸乙酯提取毒鼠强的回收率为90.40%,RSD=2.8%,n=5;毒鼠强线性方程为y=156.5x＋236.1,R=0.9988;最低检测限为4ng/ml;日内精密度为RSD为4.3%,日间精密度为RSD为6.7%.解析了毒鼠强质谱图的主要碎片归属.结论所建方法简单快速,灵敏度高,选择性好,可用于临床中毒患者血液毒鼠强的检测.     

猪肾中砷的氢化物发生原子荧光测定法

目的研究氢化物发生—原子荧光法测定猪肾中砷的适宜条件。方法试验酸介质和还原剂用量对测定砷的影响;选择仪器的最佳工作条件及氢化物发生条件;试验样品中常见元素对砷测定的干扰情况及消除方法。结果在测定条件下,砷的线性范围为0~200μg/L,相关系数达0.999 3以上;检出限为0.14μg/L,回收率在95.5%~101.0%之间,相对标准差(n=7)小于2.7%。结论该试验选用5.0%HCl为介质;样品测定原子化观察高度8 mm;5%硫脲 5%抗坏血酸混合溶液掩弊干扰效果最好。在该工作条件下测定猪肾中的砷,方法灵敏度高,准确度、精密度好。     

高效液相色谱-串联质谱联用法检测保健食品中西地那非的方法研究

目的应用高效液相色谱-串联质谱联用法和固相萃取技术测定保健食品中的西地那非。方法在样品前处理步骤中应用固相萃取净化技术,于液相色谱仪上进行样品分离,用三重四极杆串联质谱检测器作定性和定量检测。结果固相萃取技术减少了杂质对质谱仪的污染,串联质谱检测器降低了基质对测定的干扰,方法的检测限为0.01 ng,变异系数<5.0%,回收率在90.2%~97.0%之间。结论方法测定特异性好,灵敏度高,定性定量准确,结果令人满意。     

液相色谱-质谱联用法检测中药降糖制剂中非法掺入的苯乙双胍和格列本脲

目的建立检测中药降糖制剂中非法掺入的苯乙双胍和格列本脲专属性方法 ,并对若干市售药品进行检测。方法采用液相色谱 离子阱质谱联用法。选用DiamonsilC18柱 ,以乙腈 水 甲酸(V∶V∶V =6 0 0∶4 0 0∶0 1)为流动相 ,对中药降糖制剂的提取液进行液相色谱 离子阱质谱分析。通过与对照品的色谱及质谱行为相比较 ,对中药降糖制剂中非法掺入的合成降糖药进行定性鉴别。结果在 4种受试中药降糖制剂中 ,2种被检测到同时掺有苯乙双胍和格列本脲 ,1种被检测到掺有格列本脲。结论该方法选择性强 ,灵敏度高 ,可作为分析检测非法中药降糖制剂的有效方法     

电感耦合等离子质谱法测定常通口服液中铅的含量

目的 建立中药常通口服液中重金属铅（Pb）的含量测定方法。 方法采用电感耦合等离子质谱法测定常通口服液中铅的含量，RF功率 1.35 kW，反射功率 ＜ 5W，采样深度6.8 mm，溶液提升量 1 mL·min^-1，氩气流量：冷却气 12.0 L·min^-1，辅助气 1.0 L·min^-1，雾化气1.0 L·min^-1。结果铅在1～8 μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好（r＝0.999 2），平均回收率为99.12%，RSD＝2.86%。结论 该方法简单、快捷、灵敏，可用于常通口服液的质量控制，常通口服液中铅含量符合规定。