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人肿瘤特异抗原MAGE-3基因疫苗的构建和表达 总被引:8,自引:1,他引:7
目的:克隆肿瘤特异性共享抗原mage-3基因,制备基于α-病毒复制酶的高效黑色素瘤特异性基因疫苗。方法:用RT-PCR方法从黑色素瘤细胞系LB373中制备mage-3基因,以含α-病毒复制酶的哺乳细胞高效表达质粒pSMART2a为载体,构建重组DNA疫苗。重组子用载体中的T7和T3启动子序列为测序引物进行自动测序。再将鉴定过的重组质粒用脂质体法转化293细胞,用免疫印迹法和免疫组化法鉴定转化细胞中mage-3蛋白的表达。结果:正确构建了mage-3/pSMART2a重组质粒,并且在转化此质粒的293细胞中检测出了mage-3蛋白的表达。结论:此重组mage-3/pSMART2a质粒可以作为肿瘤特异的DNA疫苗,可进行下一步的肿瘤动物模型的疫苗接种及相关免疫学效应研究。 相似文献
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目的:建立HPLC同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1与Rb1的方法。方法:采用HPLC法,以茶碱为内标,氨基键合相为固定相,流动相为乙腈-水(80:20),检测波长203nm。结果:三七总皂苷中人参皂苷Rg1和Rb1与其他成分分离良好,保留时间分别约为5.7和21.5min。人参皂苷Rg1在80-280μg/mL(r=0.9995),Rb1在80-240μg/mL(r=0.9993)线性关系良好,Rg1和Rb1加样回收率分别为97.1%和98.4%,RSD分别为2.44%和2.35%(n=9)。结论:本法操作简便,准确,重现性好,可用于人参及三七的质量控制。 相似文献
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盐酸左旋咪唑是一种驱虫药,该产品在酸、碱、高温等条件下易产生副产物而影响质量,而中国药典、英国药典、美国药典对副产物的检测均采用薄板层析法,该方法只能定性及检测含量较大的杂质,而对微量组分则难以测定.笔者采用高效液相色谱法对盐酸左旋咪唑原料中有关物质的残留量及产生的副产物进行定量测定,取得了较为满意的效果. 相似文献
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目的 建立HPLC法测定五味子低温水提取物有效成分含量的方法.方法 用外标法测定五味子醇甲的含量.色谱柱Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水系统(梯度洗脱),流速1.00 mL/min,柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测波长240 nm.结果 五味子醇甲的线性范围为5.0-200.0 μg/mL;r=0.999 9:平均加样回收率为101.27%(RSD为1.97%;n=6).结论 该测定方法简便可靠,专属性强,重现性好,可为五味子制剂的质控标准提供参考依据. 相似文献
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目的:建立测定仙灵骨葆分散片中淫羊藿苷含量的高效液相色谱方法。方法:采用AgilentExtent C18(250mm×4.6mm,5μm)柱,以乙腈-0.1%乙酸溶液(28∶72)为流动相,流速:1.0mL·min-1;在270nm波长处检测。结果:淫羊藿苷在0.368~1.84μg范围内呈线性关系,r=0.9999;平均加样回收率为99.84%,RSD为1.59%(n=6)。结论:该方法简便快速,准确性和重复性好,可用于仙灵骨葆分散片中的淫羊藿苷的含量测定。 相似文献