桑叶对糖尿病小鼠肝脏Toll样受体基因表达的影响

目的:探讨桑叶水提物对糖尿病小鼠肝组织Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)基因表达量的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:ICR小鼠随机分为正常组(6只),糖尿病组。糖尿病组小鼠利用高脂高糖饲料喂养10周联合多次注射链脲佐菌素(STZ)建立高脂饲养和STZ共同诱导的小鼠糖尿病模型。造模成功小鼠随机分为模型组,二甲双胍组(600 mg·kg~(-1)),桑叶高、中、低剂量组(8,4,2 g·kg~(-1)),每组6只,灌胃(ig)给药,每周测空腹血糖,于实验中后期行口服糖耐量实验,ig给药10周后,测定小鼠血清胰岛素、总胆固醇、甘油三酯和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),并应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测小鼠肝组织中TLR1~9表达量。结果:糖尿病模型小鼠经桑叶水提物治疗后,进水量减少,显著降低空腹血糖,改善糖耐量,显著降低血脂,增加胰岛素含量,改善胰岛素抵抗,同时降低血清中TNF-α(P0.05,P0.01)。Realtime PCR结果显示,糖尿病小鼠肝脏组织TLRs受体中TLR1,TLR2,TLR3,TLR7,TLR8和TLR9表达明显高于正常组(P0.05,P0.01),TLR5表达明显低于正常组;桑叶给药组后,桑叶中剂量组肝组织中的TLR7,TLR8和TLR9表达量,显著降低于模型组(P0.05,P0.01)。结论:桑叶水提物的降糖作用可能与抑制糖尿病模型小鼠肝组织中TLRs受体有关。     

黄芩处方的调查和分析

目的通过处方统计探讨黄芩在医疗机构门诊处方中的使用情况、用药思维和配伍规律。方法调查北京地区医疗机构门诊处方7682张,对其中含有黄芩的处方进行统计分析。结果黄芩处方占门诊处方的15．13％,其中黄芩剂量在6-15g范围的处方占88．83％,黄芩平均剂量为9．82g,黄芩处方主要用于治疗肺系、肝胆系、脾胃系、和妇科四类病证,这四类病证的处方占88．33％,临床常配伍柴胡、黄连、金银花、鱼腥草、半夏、桑白皮、白术等药物。结论黄芩临床使用广泛,配伍药物具有多样性和规律性。     

桑叶对2型糖尿病大鼠肝脏Toll样受体及其下游信号元件基因表达的影响

目的:观察桑叶降糖作用,分析桑叶对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏Toll样受体及其下游信号元件基因表达的影响,初步探讨其降糖机制。方法:选取SPF级雄性Wistar大鼠46只,高脂饲料饲喂8周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ),以制备T2DM模型。根据血糖值将模型大鼠随机分成模型组、阳性药二甲双胍(0. 2 g/kg)组和桑叶高、低剂量(3 g/kg,1 g/kg)组,每组12只,另取10只大鼠为正常对照组。灌胃给药,持续12周,每周测其空腹血糖,并于第11周时进行OGTT和ITT实验。以上实验结束后免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定血清中胰岛素、IL-6、肿瘤坏死因子-(TNF-)和C反应蛋白(CRP)水平,实时PCR法测定大鼠肝脏TLRs及MyD88、TRAF-6、核因子-B mRNA水平。结果:大鼠给药桑叶后,血糖值降低,饮水量明显减少,差异有统计学意义(P 0. 05),糖耐量得到显著改善,血清中IL-6、CRP水平明显降低,差异有统计学意义(P 0. 05),TLR7、TLR8、TLR9以及其下游信号元件TRAF-6、MyD88、核因子-B mRNA相对表达均较模型组明显降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:桑叶降糖可能与其抑制肝脏组织TLRs及其下游信号表达,降低炎性反应有关。     

HPLC法测定仙灵骨葆分散片中淫羊藿苷的含量

目的:建立测定仙灵骨葆分散片中淫羊藿苷含量的高效液相色谱方法。方法:采用AgilentExtent C₁₈(250mm×4.6mm,5μm)柱,以乙腈-0.1%乙酸溶液(28∶72)为流动相,流速:1.0mL·min^-1;在270nm波长处检测。结果:淫羊藿苷在0.368～1.84μg范围内呈线性关系,r=0.9999;平均加样回收率为99.84%,RSD为1.59%(n=6)。结论:该方法简便快速,准确性和重复性好,可用于仙灵骨葆分散片中的淫羊藿苷的含量测定。     

复方丹参注射液Ⅱ中丹酚酸B在大鼠体内的HPLC测定

目的:探讨复方丹参注射液Ⅱ的制备及其指标成分丹酚酸B在大鼠体内的含量测定方法。方法:通过羟丙基-β-环糊精包合增加降香挥发油溶解性;用HPLC法测定主成分丹酚酸B在大鼠体内的含量。结果:成功制备复方丹参注射液Ⅱ,建立注射液中指标成分丹酚酸B在大鼠体内的HPLC测定方法。结论:复方丹参注射液Ⅱ的制备工艺可行,指标成分丹酚酸B在大鼠体内的含量测定方法准确可靠。     

老年性痴呆疾病模型的建立

整理近年来老年性痴呆(alzheimer’s disease,AD)动物模型相关资料,介绍AD模型的建立方法:物理的损伤方法建立AD模型、化学损伤建立AD模型、多因素综合致病模型、转基因AD动物、自然衰老AD动物等。通过文献整理发现,AD模型建立方法多样,每一动物或细胞模型都各有其优缺点,且建模机制不同,研究者应根据个人研究需要选择和建立合适的AD动物及细胞模型。     

基于PPAR-α/CPT-1信号通路的桑叶总黄酮调控T2DM大鼠肝脏脂质代谢作用及其机制

目的 观察桑叶总黄酮改善2型糖尿病（T2DM）大鼠肝脏脂代谢紊乱的药效学作用,并基于肝脏过氧化物酶增殖物激活受体-α（PPAR-α）、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1（CPT-l）蛋白探讨其作用机制。方法 采用醇提法+大孔树脂纯化法提取、纯化桑叶总黄酮,并进行鉴定。利用高脂肪饮食（HFD）+链脲佐菌素（STZ）法建立T2DM大鼠模型,选择血糖≥11.1 mmol·L^-1的大鼠,以桑叶总黄酮高、中、低剂量（300、150、75 mg·kg^-1）分别灌胃给药8周,观察大鼠体质量及血糖情况。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肝脏病理变化,生化法检测大鼠血清脂代谢指标总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏组织PPAR-α及CPT-1 mRNA和蛋白的表达。结果 桑叶总黄酮干预8周后,与正常组比较,模型组大鼠摄食量、肝脏指数、空腹血糖显著升高（P<0.01）;与模型组比较,桑叶总黄酮高、中、低剂量组大鼠摄食量、空腹血糖、肝脏指数显著降低（P<0.01）。HE结果显示,正常组大鼠肝组织结构完整未见明显异常;模型组大鼠肝细胞空泡变性且有炎性浸润;桑叶总黄酮高、中、低剂量组大鼠肝脏结构未见明显异常。血脂四项结果显示,与正常组比较,模型组大鼠TC、TG、LDL-C水平显著升高（P<0.01）,HDL-C水平显著降低（P<0.01）;与模型组比较,各给药组TC、TG、LDL-C水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,HDL-C水平显著增加（P<0.01）。Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组大鼠PPAR-α和CPT-1 mRNA表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,桑叶总黄酮高剂量组PPAR-α和CPT-1 mRNA表达显著升高（P<0.01）。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组大鼠PPAR-α和CPT-1蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,桑叶总黄酮高剂量组PPAR-α和CPT-1蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01）。结论 桑叶总黄酮可有效降低T2DM大鼠血糖,改善肝脏脂质代谢紊乱,其发挥降糖调脂的作用机制可能是通过激活调控PPAR-α和CPT-1蛋白、促进脂肪酸氧化分解,发挥调控脂质代谢,进而发挥降糖作用。     

TGF-β相关信号通路在糖尿病病理机制中的作用及中医药干预研究进展

现代社会生活方式的改变,特别是高脂饮食和运动量减少使糖尿病发病率日益升高,已成为全球性的公共卫生问题,寻找有效的糖尿病治疗方法日益迫切。转化生长因子-β（TGF-β）信号通路与糖尿病并发症、肿瘤关系的研究较多,但其在糖尿病发生的作用尚未阐明。TGF-β信号通路可被多种因素激活,直接或间接导致胰岛β细胞凋亡和胰岛素抵抗（IR）,有望成为糖尿病治疗的重要新靶点。TGF-β相关信号通路包括腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、糖基化终产物受体、c-Myc、SnoN、Smurf1、miR-335-5P等信号分子,参与IR、胰岛β细胞凋亡、胰岛素分泌障碍、脂肪细胞纤维化表型及脂肪细胞代谢障碍的发生发展,并抑制白色脂肪棕色化,在人类糖尿病病理过程中发挥重要作用。中医认为糖尿病的病机为气阴两虚,后期除气虚外兼有阳虚血瘀,治以益气养阴,后期兼有温阳活血。研究发现部分中药和复方治疗糖尿病的作用与其对TGF-β信号通路的抑制高度相关。现综述TGF-β信号分子相关多条信号通路,阐明其在糖尿病形成过程中的病理机制,并就治疗糖尿病的中药复方与TGF-β信号通路相关性进行展望性分析。为治疗糖尿病的研究提供一定的理论依据。     

Aβ25-35刺激对海马神经细胞株NG108-15 Toll样受体3、4表达的影响

目的: 研究Aβ刺激对小鼠神经细胞株NG108-15 Toll样受体(TLR)3、TLR4 mRNA表达的影响。 方法: Aβ刺激NG108-15细胞,24 h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子TNF-α、IFN-β含量,荧光定量PCR法测定TLR3、TLR4 mRNA表达量的变化。 结果: Aβ诱导NG108-15细胞分泌TNF-α、IFN-β的量较正常对照组明显增多(均P<0.01);Aβ可诱导NG108-15细胞TLR3、TLR4 mRNA表达增强,与空白对照组相比,均P<0.01。 结论: Aβ刺激可体外诱导NG108-15细胞TNF-α、IFN-β分泌增多,诱导TLR3、TLR4 mRNA表达增强,提示Aβ致阿尔茨海默病(AD)作用可能与免疫性炎症及TLRs信号转导通路有关。     

冰片对脑外伤脑血管内皮细胞iNOS表达的影响

冰片为芳香开窍药的一种，现代中医药中多用于心脑血管疾病。有研究表明冰片具有促进血脑屏障(blood brain barrier,BBB)通透性增加和引药上行的作用^[1]，另有研究发现，冰片可促进其它物质如造影剂泛影葡胺、染料伊文思蓝和药物如庆大霉素等进入脑组织中的量。为了进一步研究冰片促血脑屏障开放是否为生理性开放，以及其与病理性开放的异同，进行了下面的研究。