HCCA1在原发性肝癌中的表达及其意义

目的 对近期克隆的新基因HCCA1与肝癌的相关性进行研究。方法 采用Northern杂交分析HCCA1 mRNA在肝癌中的表达,应用制备的特异性抗体检测其蛋白水平的表达,结合临床及病理学资料进行分析。结果 65例HCC患者在其癌组织中HCCA1 mRNA表达的检出率为90.8％（59／65）,其中91.5%(54/59)患者HCCA1 mRNA在肝癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,有13.8%(9/65)患者在癌旁组织中检测到较弱的HCCA1 mRNA的表达,86.2％（56／65）患者在癌旁组织中未检测到HCCA1 mRNA的,与病理指标的相关性分析表明,HCCA1 mRNA在Ⅲ-Ⅳ级肝癌中的表达水平明显高于Ⅰ-Ⅱ级肝癌,有门脉癌栓形成者的表达水平明显高于无癌栓形成者。免疫组织化学在蛋白水平上证实HCCA1在肝癌中的高表达。结论 HCCA1是一个新的肝癌相关基因,可能在肝癌的浸润和转移中起重要作用。     

三氧化二砷对肝癌细胞凋亡的诱导及机理的探讨

三氧化二砷 (ａｒｓｅｎｉｃｔｒｉｏｘｉｄｅ)可诱导急性早幼粒细胞性白血病细胞凋亡 ,并取得了满意的临床效果。那么三氧化二砷对实体肿瘤的治疗效果又如何呢 ?本实验旨在探讨三氧化二砷对肝癌细胞株的作用 ,及其发挥作用的机制。一、材料与方法1.材料 :肝癌细胞株ＢＥＬ 740 2由中国医学科学院肿瘤研究所周传农教授、王德昌教授惠赠 ,ＨＬＥ细胞由中国医学科学院分子肿瘤学国家重点实验室许智雄博士惠赠。ＲＰＭＩ16 40培养基、小牛血清、琼脂糖购自ＧＩＢＣＯＢＲＬ公司 ,分子量标记ＤＮＡ/ＨｉｎｄＩＩＩ和ＤＮＡ/ＨａｅＩＩＩ ,蛋白酶…     

热休克蛋白gp96的纯化及其对荷肝癌小鼠的治疗作用

肿瘤的手术治疗和放射治疗有着立竿见影的作用 ,但肿瘤的治愈率很难得到突破。疫苗能充分调动全身的免疫细胞及 /或免疫分子 ,发挥抗肿瘤效应 ,显示出广阔的应用前景[1] 。近年来有研究证实热休克蛋白 (ＨＳＰ)具有抗肿瘤作用[2 ] ,我们用蛋白层析法及Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹法分离并鉴定小鼠肝癌细胞Ｈ2 2 的ｇｐ96 ,并以ｇｐ96免疫治疗Ｂａｌｂ/ｃ小鼠 ,观察其抗肿瘤效应。一、材料与方法1 材料 :(1)主要试剂及仪器 :ＣＤ4 ＰＥ单抗、ＣＤ8 ＰＥ单抗、γ干扰素 (ＩＦＮ γ) 荧光素异硫氰酸脂 (ＦＩＴＣ)单抗、白细胞介素 (ＩＬ 10 ) ＦＩＴ…     

原发性肝癌经皮微波凝固治疗前后局部免疫活性细胞功能检测

目的：了解原发性肝癌经皮微波凝固治疗前、后局部免疫活性细胞功能变化。方法：C地38例病理诊断原发性肝癌,并接受超声导引下经皮微波凝固治疗的患者。分别治疗前及治疗后17d,超声导引下经皮用18G组织切割针于病灶及其周边肝组织取活检标本,取出的组织标本石蜡包埋,采用特异性单克隆抗体免疫组织化学染色,检测CD3^ 、CD56^ 、CD68^ 细胞及T淋巴细胞表面Fas配体;并在光镜下观察,用病理图像分析仪测量治疗前后、后阳性细胞直径、阳性细胞占单位面积百分比、T淋巴细胞Fas-L阳性表达率及治疗前后巨噬细胞内次级溶酶体变化。结果：治疗前肿瘤内仅有少量免疫细胞浸润,多数浸润的CD3^ 和CD56^ 细胞最大径小于10μm,CD68^ 细胞最大径小于18μm。治疗后病灶内浸润的CD3^ 、CD56^ 和CD68^ 细胞数量较治疗前明显增加,细胞体积明显增大（同治疗前相比CD3^ 细胞和CD56^ 细胞t和P值分别为3．48,－4．76和0．025,0．000,巨噬细胞t和P值分别为－2．46和0．028）。最大径大于10μm的CD3^ 和CD56^ 细胞分别由治疗前的10．4％和20．1％增至24．9％和30．2％,最大径大于18μm的CD68^ 细胞由10．2％增至33．4％。T淋巴细胞Fas-L阳性率由治疗前的7．2％增高至20．1％（P＜0．01,巨噬细胞内次级溶酶体和T淋巴细胞内细胞器明显增多。结论：原发性肝癌经皮微波凝固治疗提高局部浸润免疫细胞的功能。     

人肝细胞癌4号染色体高频率杂合子丢失的研究

目的 为克了生新的肝细胞（HCC）相关肿瘤抑制基因的供位点依据。方法 使用4号染色体的12个微卫星DNA多态性标志,分析了48例原发性HCC的杂合子丢失（LOH）。结果 44％（21／48）和63％3（30／48）的肿瘤组织中至少有1个位点的LOH分别发生在4p和4q。丢失图排列鉴定了两个独立的共同丢失片段（CDR）。第1个定位在4q22-q25的CDR位于D4S392和D4S1625位点之间;第2个定位在4q27-q31的CDR位于D4S1625和D4S1652位点之间。结论 至少有两个肿瘤抑制位点存在于4q.     

丙型肝炎病毒感染与HCC相关性的研究

目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）感染与肝细胞癌发生的关系。方法：用聚合酶链反应（PCR）对淮南地区92例肝癌、117例肝硬化和100例肝癌切 除的肝组织标本进行HCV-RNA检测,并以限制性片段长度多态性分析对其中89例HCV-RNA阳性血清进行了HCV基因分型。结果：肝癌组HCV感染率29.3%,肝硬化组HCV感染率26.5%,肝组织标本组HCV感染率31.0%;各组均以HCVⅡ型为（65.2%）,HCVⅢ型次之（31.5%)。结论：淮南地区肝癌的诱发与HCV感染密切相关,HCVⅡ型在本地区HCV相关性肝癌和肝硬化的发生中可能起主要作用。     

长期口服足叶乙甙和三苯氧胺治疗晚期肝癌临床观察

目的：探讨长期口服足叶乙苷（VP－16）及三苯氧胺（TAM）方案治疗晚期肝癌的效果。方法：对失去手术及介入治疗机会的40例晚期肝癌分为两组。观察组：口服VP－1650mg,每日1次及TAM20mg,每日2次,两药均应用14天,休息14天,为1周期。对照组：采用对症、支持、保肝等姑息性治疗。结果：两组有效率（CR＋PR）分别为26．1％和0％（P＜0．05）。观察组有效者中位生存10．8个月,进展者中位生存3．5个月。对照组中位生存3．0个月。观察组有效者生存质量及KS评分均明显提高,主要毒副反应是脱发、骨髓抑制和胃肠道反应,均为轻度。结论：长期口服VP－16及TAM治疗晚期肝癌具有一定疗效,能提高患者生存质量,且无明显毒副反应。     

肝癌相关性甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测法

目的：进一步探讨血清肝癌相关性GPDA同工酶分离检测条件,提高其对原发性肝癌的诊断价值。方法：对分离血清肝癌相关性GPDA同工酶电泳体系的凝胶浓度及梯度、缓冲液的pH及离子强度、电泳的环境温度、标本 用量以及呈色条件等进行了逐项摸索,建立了稳定且分离效果好的GPDA同工酶检测方法。结果：采用三层阶段梯度聚丙烯酰胺凝胶体系将血清GPDA分为肝癌相关性的快带（GPDA－F）和相关性的慢带（GPDA－S）,肝癌相关性GPDA的检出率明显提高。结论：肝癌相关性血清GPDA检测法稳定可靠、敏感,适合于临床推广应用。     

早期肝癌中端粒酶活化与细胞增殖相关性研究

目的：研究早期肝癌中端粒酶基因蛋白(hTRT)与细胞增殖核抗原（PCNA）表达及其相关性。方法：在20例早期肝癌中用原位杂交检测hTRT基因,免疫组化方法检测PCNA的表达。结果：hTRT阳性信号检出率80．0％,PCNA强阳性率为55．0％;癌中hTRT阳性信号、PCNA表达强度显著高于癌旁非癌组织（P＜0．05）;癌不则分化组中PCNA表达有显著差异（P＜0．05）;癌中hTRT阳性信号分布有模型和浆型两种形式,其分布形式、 信号强度均与PCNA阳性强度密切相关（P＜0．01）。结论;肝癌发生与细胞增殖密切相关。端粒酶活化是肝癌发生的早期事件,是肝细胞增生和恶性转化所必需,其检出结果对鉴别肿瘤恶变有重要意义。