强化教师主导性与学生主体性有机结合深化寄生虫学教学改革

新形势下的教学改革需要把教师主导性与学生主体性有机结合起来。本文通过对我国寄生虫病的流行特点及传统教学中存在问题的论述,指出在寄生虫教学改革中要采取优化教学内容,发挥教师的主导性,强化学生主体性,应用多媒体课件和引入案例式教学等多项措施来提高教学质量,培养合格人才。     

稳定表达EGFRvIII的U87MG细胞株的建立与鉴定

目的:构建稳定表达表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)的U87MG细胞株。方法:采用电转染方法将pcD-NA4/TO-EGFRvⅢ质粒导入U87MG细胞,加入zeocin筛选,进一步将细胞有限稀释并克隆化培养以建立稳定的转染细胞株。应用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定稳定表达EGFRvⅢ基因的细胞株。结果:经RT-PCR鉴定发现V6号和V24号单克隆细胞株EGFRvⅢ基因mRNA水平高表达,进一步Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定发现V6号细胞株EGFRvⅢ蛋白水平高表达。结论:成功建立了稳定表达EGFRvⅢ的U87MG细胞株,为进一步的抗肿瘤治疗及其机制研究提供基础。     

胃癌根治术后免疫型肠内营养支持的应用

目的：为了探讨免疫营养制剂在胃癌术后营养支持上的作用,通过使用含特殊营养物质的免疫增强型肠内营养制剂与术后早期标准肠内营养的比较,研究术后早期免疫肠内营养对胃癌患者营养状态、免疫功能、应激状况的影响,评价免疫肠内营养应用的优势。方法：将48例胃癌病人随机分为两组,每组24例。第l组术后早期给予常规肠内营养制剂（EN）（对照组）,第2组术后早期接受免疫增强型肠内营养制剂（IEN）（实验组）,均在肠内营养输注系统通过空肠造口管持续泵入肠内营养剂,连续7天。于术前、术后第1天、术后第9天分别检测两组病人的营养指标和免疫指标。结果：两组病人术后第9天营养指标、免疫指标均较术后第1天有升高（P〈0.05）;实验组营养指标及免疫指标较对照组显著升高（P〈0.05）;48例病人均能较好地耐受肠内营养支持。结论：免疫增强型肠内营养制剂较常规肠内营养制剂更有利于增强胃癌术后病人的营养及免疫功能。     

大鼠坐骨神经雪旺细胞体外培养纯化的实验研究

目的:探索大鼠坐骨神经雪旺细胞体外培养纯化的方法,以获取大量的雪旺细胞应用于周围神经组织工程研究.方法:取预变性坐骨神经,去神经外膜,剪碎块后,用胰酶及胶原酶组成的混合酶消化15 min,加入含10%胎牛血清的DMEM吹打成悬液进行培养.24 h后将培养液全部吸出,组织块中的细胞游出铺满皿底后,将组织块移入新的培养皿中,反复3次后将得到雪旺细胞扩大培养,加入b-FGF(20 ng/mL),待细胞铺满瓶底的80%～90%时,即可传代.纯化后细胞行S-100免疫细胞化学鉴定.结果:双酶消化法结合差速贴壁法可去除较多杂细胞,应用b-FGF刺激雪旺细胞增殖,可获得大量高纯度的雪旺细胞,经S-100蛋白免疫细胞化学鉴定,雪旺细胞纯度达96%以上.结论:双酶消化法、差速贴壁法结合b-FGF刺激增殖的方法可从坐骨神经中分离纯化大量雪旺细胞.     

内源性GDNF在针刺促进损伤脊髓神经元轴突出芽中的作用

目的探讨内源性胶质源性神经营养因子(glia derived neurotrophic factor,GDNF)在针刺促进SD大鼠脊髓神经元轴突出芽中的生物学机制。方法 25只雌性SD大鼠随机分为单侧备用根手术组、针刺组、针刺并GDNF抗体封闭组。切除脊髓单侧L1～L3及L5～L6背根节(dorsal root ganglion,DRG),保留L4背根为备用根,制备单侧备用根模型。选择足三里和悬钟、伏兔和三阴交两组穴位进行针刺实验。免疫组化和辣根过氧化物酶(HRP)追踪分别检测GDNF及背根神经节(DRG)源的神经纤维表达变化。结果针刺可显著增加GDNF在受损脊髓中的表达,而抗体封闭可显著逆转该作用。结论针刺可能通过增加内源性GDNF的表达促进损伤脊髓神经元形态和功能修复。     

17-烯丙氨基格尔德霉素对人乳腺癌细胞基质金属蛋白酶表达调控作用的研究

目的观察17-烯丙氨基格尔德霉素(17-AAG)对人乳腺癌MCF-7细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9 mRNA及其表达的调控作用。方法体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,分别给予不同剂量及不同作用时间的17-AAG进行作用,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖能力;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白印迹(Western Blotting)法检测MCF-7细胞的MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达水平。结果 (1)10.000、5.000、2.500、1.250、0.625、0.310、0.165 mg/L 17-AAG及空白对照组培养24 h和48 h时A值比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。体外作用24 h后IC50均值为34.61,体外作用48 h的IC50均值为6.22。(2)RT-PCR法检测不同浓度17-AAG对MCF-7细胞MMP-2、MMP-9 mRNA表达的影响,结果显示,对照组及1.00 mg/L组、2.00 mg/L组、3.00 mg/L组、5.00 mg/L组MMP-2/β-actin和MMP-9/β-actin比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中各组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)Western Blotting法检测不同浓度17-AAG对MCF-7细胞MMP-2、MMP-9表达的影响,结果显示,对照组及1.00 mg/L组、2.00 mg/L组、3.00mg/L组、5.00 mg/L组MMP-2/β-actin和MMP-9/β-actin比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中各组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 17-AAG对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有明显的抑制作用,并能抑制MMP-2和MMP-9的表达,具有剂量依赖性。     

D13S301位点Amp—FLP分析及在Wilson病基因诊断中的应用

Ｗｉｌｓｏｎ病（ＷＤ）基因内的Ｄ１３Ｓ３０１位点为二核苷酸重复序列（ｄＧ－ｄＴ）ｎ。为了探讨该病的产前诊断方法，应用聚合酶链反应方法对４１名无关中国汉族个体和４个ＷＤ家系Ｄ１３Ｓ３０１位点的多态性进行检测，用银染聚丙烯酰胺变性胶分析扩增片段长度多态性共发现８个等位片段，杂合率为７５％，多态信息量（ＰＩＣ）为０．７８。表明Ｄ１３Ｓ３０１位点ＰＩＣ高，可以作为中国汉人的ＷＤ基因的遗传标记对ＷＤ家系进行基因诊断。     

生长激素释放肽对心衰大鼠心肌的影响

目的 研究生长激素释放肽（GHRP）对心衰大鼠心肌的影响,探讨GHRP在心衰（CHF）中的作用,为临床更好地治疗CHF提供理论依据.方法 选取健康Wistar雄性大鼠30只随机分为三组,每组10只.采用腹腔注射阿霉素（ADR）方法 建立大鼠CHF模型,并采用：1）监测血流动力学变化;2）采用HE染色法观察心肌细胞形态变化;3）电镜下观察心肌细胞形态变化.结果 1）模型组与正常组比较血流动力学和心肌组织发生了显著变化,而治疗组干预后的指标接近正常组;2）正常组线粒体结构正常,闰盘结构完好;模型组少数区域有线粒体空泡样变,闰盘结构正常;治疗组许多区域有线粒体肿胀、空泡样变,闰盘电子密度降低.结论 GHRP具有保护和改善心衰大鼠心功能的作用.     

创伤后应激障碍大鼠海马组织5-HT1受体mRNA的表达

目的探讨创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠海马组织中5-羟色胺受体1mRNA的表达。方法随机将雄性Wistar大鼠分为对照组和PTSD组,采用改良的单一连续应激(SPS&S)方法刺激大鼠建立PTSD大鼠模型,Morris水迷宫实验检测大鼠记忆功能,化学发光法检测大鼠血清皮质醇浓度。建模后1d、4d、7d、14d分离海马组织,RT-PCR方法检测5-羟色胺受体1的变化。结果 (1)对照组水迷宫实验逃避潜伏期为(5.632±1.065)s,模型组为(20.762±3.236)s(t=9.932,P<0.01);(2)对照组血清皮质醇浓度为(1.25±0.12)μg/dl,模型组为(0.58±0.09)μg/dl(t=7.340,P<0.01);(3)应激后1d、4d、7d、14d海马5-HT1A受体mRNA表达相对水平分别为0.846±0.067、0.510±0.052、1.007±0.137、1.109±0.106,与对照组1.223±0.152相比较,1d、4d、7d表达低于对照组(P<0.05);5-羟色胺1受体其他亚型未见表达。结论 PTSD大鼠海马中5-HT1A受体mRNA表达降低。     

载脂蛋白E基因敲除及高脂饮食小鼠皮质额叶区形态学及Mortalin表达的变化

目的 观察载脂蛋白E基因敲除(ApoE KO)及高脂饮食(HF)后小鼠额叶区形态学及Mortalin蛋白表达变化,以进一步探讨ApoE异常导致阿尔茨海默病及记忆损伤的可能机制.方法 10只野生型小鼠予普通饲料喂养作为对照(C)组,10只ApoE KO小鼠予普通饲料喂养作为KO组,10只ApoE KO小鼠予高脂饲料喂养作...