海沙瑞林对慢性心力衰竭大鼠心交感神经重构的影响*

目的：探讨海沙瑞林对慢性心力衰竭（ CHF）大鼠心交感神经重构的影响。 方法： SD大鼠随机分为对照 组（ Control 组）、假手术组（ Sham组）、心力衰竭组（ HF组）和海沙瑞林干预组（ HF+Hx 组），应用冠状动脉结 扎法制作CHF大鼠模型，HF+Hx 组大鼠连续4 周尾静脉注射海沙瑞林 100 μg·kg-1·d-1，其他3 组注射等量的生 理盐水。超声心动图测量左心室功能；H-E 染色及Masson 染色观察各组大鼠心肌病理结构变化；免疫组织化学和 免疫印迹检测脑钠肽（ BNP）、神经生长因子（ NGF）、酪氨酸羟化酶（TH）和生长相关蛋白43（ GAP43）表达。 结果：海沙瑞林干预升高CHF大鼠左室射血分数，改善左心室功能，减轻HF组心肌损伤结构病理改变，降低心 肌细胞内BNP 表达，增加NGF、TH和GAP43 表达，差异均具有统计学意义。 结论：CHF大鼠存在心交感神经重构， 海沙瑞林通过改变心交感神经重构， 改善心功能和CHF的预后可能是其实现心保护的机制之一。     

MLVA基因分型方法研究世界多地区布鲁氏菌的流行病学特征

目的 通过多位点串联重复序列分析（MLVA）研究世界多国家和地区分离的布鲁氏菌分子流行病学特征。方法 选择11个可变数目串联重复序列位点,使用BioNumerics软件,采用非加权配对算术平均法,对1953－2013年全球48个国家和地区分离的布鲁氏菌VNTR资料进行聚类分析,绘制系统发育树和最小生成树,分析菌株的流行分布特征。结果 布鲁氏菌系统发育树的进化关系与经典的生物分型方法基本上吻合,但猪种生物5型菌株与其他猪种生物1、2、3和4型菌株关系较远;鲸种布鲁氏菌也分为2个部分,并且关系较远。2005－2008年出现了全球布鲁氏菌病（布病）流行,中国是布病多发区,主要流行株为羊种布鲁氏菌,其次是牛种布鲁氏菌,猪种布鲁氏菌主要出现在中国南部省份,犬种布鲁氏菌只在犬中出现,人类没有发现病例。结论 布鲁氏菌具有种的系统发育树特征,并且具有分离的时间、地域和宿主的特异性,这些特征对于布病的防控具有重要意义。     

流感嗜血杆菌基因分型研究

目的应用生物学分型、血清学分型和脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)分析从健康人群分离的流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)的分子流行病学规律以及与Hi生物学分型、血清学分型、青酶素酶之间的关系。方法对深圳市1月龄以上380名健康人群采集咽拭子,共分离培养175株流感嗜血杆菌,参照Pitt-man方法对菌株进行血清学分型,应用PCR方法进行流感嗜血杆菌属及荚膜鉴定,参照Kilian方法对其中的141株菌株进行生物学分型,从不同年龄组选出共59株流感嗜血杆菌株,应用PFGE技术进行分子分型研究。结果 141株流感嗜血杆菌分为8个生物型,Ⅰ~Ⅷ型分别为8.51%、36.88%、34.04%、4.96%、7.80%、0.71%、6.38%、0.71%。分离的菌株以无荚膜的不可分型Hi为主(97.14%),5株为有荚膜型,其中2株为b型,3株为e型,Hi产青霉素酶的阳性率为14.18%,59株Hi菌株分为52个PFGE基因型。结论深圳市健康人群Hi携带菌株多为无荚膜的不可分型流感嗜血杆菌,生物学分型以Ⅱ、Ⅲ型为主。PGFE基因分型呈明显的多态性。     

生长激素释放肽对心衰大鼠心肌的影响

目的 研究生长激素释放肽（GHRP）对心衰大鼠心肌的影响,探讨GHRP在心衰（CHF）中的作用,为临床更好地治疗CHF提供理论依据.方法 选取健康Wistar雄性大鼠30只随机分为三组,每组10只.采用腹腔注射阿霉素（ADR）方法 建立大鼠CHF模型,并采用：1）监测血流动力学变化;2）采用HE染色法观察心肌细胞形态变化;3）电镜下观察心肌细胞形态变化.结果 1）模型组与正常组比较血流动力学和心肌组织发生了显著变化,而治疗组干预后的指标接近正常组;2）正常组线粒体结构正常,闰盘结构完好;模型组少数区域有线粒体空泡样变,闰盘结构正常;治疗组许多区域有线粒体肿胀、空泡样变,闰盘电子密度降低.结论 GHRP具有保护和改善心衰大鼠心功能的作用.     

流感嗜血杆菌表型和脉冲场凝胶电泳分型研究

目的 应用生物学分型、血清学分型和脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)分析临床分离流感嗜血杆菌的表型和分子分型特征,了解流感嗜血杆菌的分子流行病学规律.方法 1988年和2004-2007年期间,成都市儿童医院从患者的下呼吸道分泌物分离培养273株流感嗜血杆菌,菌株的分离培养与鉴定参照美国<临床微生物手册>.菌株的生物学分型和血清学分型分别参照Kilian和Pittman分类法.应用PCR方法对所有的菌株进行荚膜鉴定和血清学分型鉴定.随机选择100株流感嗜血杆菌菌株,应用PFGE技术进行分子分型研究.结果 273株流感嗜血杆菌可分为8个生物型.17.6%(48/273)的菌株为生物型I型,43.6%(119/273)为生物型Ⅱ型,22.7%(62/273)为生物型Ⅲ型,7.3%(20/273)为生物型Ⅳ型,5.9%(16/273)为生物型V型,0.4%(1/273)为生物型Ⅵ型,1.8%(5/273)为生物型Ⅶ型,0.7%(2/273)为生物型Ⅷ型.99.6%(272/273)的菌株为无荚膜的、血清学不可分型的流感嗜血杆菌,1株为血清型f型.100株流感嗜血杆菌经PFGE分析,可分为96个PFGE基因型,93株菌株各自代表一个PFGE基因型.基因型的分布与菌株的分离时间无明显的相关性.结论 引起儿童下呼吸道感染的流感嗜血杆菌主要是无荚膜的、不可分型流感嗜血杆菌菌株,生物型主要是Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型.血清学不可分型流感嗜血杆菌菌株PFGE基因型呈现明显的多态性,菌株的分子多态性可能是流感嗜血杆菌感染在成都市没有形成暴发与流行的分子流行病学原因;PFGE基因分型与生物学分型和血清学分型比较,具有很强的菌株分辨能力,是流感嗜血杆菌感染流行病学研究适用的分析方法.     

生长激素释放肽对心衰大鼠植物神经重构的影响

本研究观察了生长激素释放肽(GHRP)的应用对心衰动物胆碱能神经和肾上腺素能神经支配的影响。Wistar大鼠50只,随机分为:假手术组10只;GHRP组30只;模型组10只。心衰模型成功后4周,Karnovsky-Roots法及免疫组织化学方法分别显示心肌胆碱能神经纤维及肾上腺素能免疫阳性纤维,应用多功能真彩色病理图像分析系统分析两种神经纤维密度。结果显示,模型组大鼠心肌中胆碱能神经纤维和肾上腺素能神经纤维密度明显低于假手术组(P<0.01);GHRP组大鼠心肌中两种神经纤维密度较模型组明显增高(P<0.01),但略低于假手术组神经纤维密度(P<0.05)。上述研究表明GHRP可延缓大鼠心衰后的去神经支配,改善神经重构。     

建立16S rRNA基因聚合酶链反应方法快速检测脑膜炎奈瑟菌

目的建立以16S rRNA基因为靶基因的聚合酶链反应(PCR)方法,用于快速检测脑膜炎奈瑟菌。方法根据GenBank公布的奈瑟菌属16S rRNA基因序列,使用DNAstar软件设计引物,应用PCR方法特异检测脑膜炎奈瑟菌,对部分菌株结合16S rRNA基因测序和APIRNH生化鉴定系统以验证该方法的准确性,同时与文献报道的检测脑膜炎奈瑟菌crgA-PCR方法进行比较。结果 16S rRNA-PCR与crgA-PCR方法检测脑膜炎奈瑟菌阳性预测值皆为100%,阴性预测值分别为100%和46.94%,假阳性率分别为0%和36.73%,假阴性率皆为0%。约登指数分别为1和0.47。对188名健康儿童咽拭子杂菌DNA应用16S rRNA-PCR和crgA-PCR方法检测脑膜炎奈瑟菌,检测阳性率分别为18.62%(35/188)和15.96%(30/188)。两者同时检测到脑膜炎奈瑟菌的标本为7.98%(15/188)。结论 16SrRNA-PCR方法特异、敏感、快速,可用于脑膜炎奈瑟菌的快速检测与鉴定。     

AMI大鼠Ghrelin的变化及人Ghrelin对其影响

目的：研究急性心肌梗死（acute myocardial infraction,AMI）大鼠血浆Ghrelin水平变化,探讨人与大鼠Ghrelin在AMI病理过程中的潜在的生物学效应。方法：结扎左冠状动脉前降支制作AMI大鼠模型,实验设为正常对照组、假手术组、AMI模型组、AMI模型＋人Ghrelin组及AMI模型＋生长激素促分泌素（growth hormone secretagogues,GHSs）受体（GHSR）阻滞剂[D--Lys3]-GHRP-6组f以酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测AMI术后24h大鼠血浆Ghrelin含量。结果：与正常组大鼠比较,大鼠血浆的Ghrelin水平均升高,但假手术组与正常组比较没有统计学意义;以GHSR阻滞剂组最高（P〈0．01）,人Ghrelin干预组比模型组低（P〈0．05）。结论;MI术后24h大鼠Ghrelin明显升高,人Ghrelin抑制但GHSR阻滞剂增加AMI大鼠血液循环Ghrelin水平的升高,本研究结果有助于更好理解GHSR介导的心脏保护活性。     

多位点可变数目串联重复序列分析方法在布鲁杆菌病监测中的应用

目的 建立多位点可变数目串联重复序列分析方法(MLVA),并评价其在布鲁杆菌菌株鉴定及流行病溯源中的价值.方法 使用MLVA方法,对16株羊种菌、22株牛种菌、21株猪种菌和10株犬种菌株进行分析,使用BioNumerics(Version 5.0),对16个位点进行聚类分析,聚类方式用平均连锁聚类法(UPGMA).计算每个位点的差异指数,菌株的基因型通过MLVA2010数据库确定.结果 使用MLVA方法,通过Bruce06、Bruce08、Bruce11、Bruce12、Bruce42、Bruce43、Bruce45、Bruce55共8个位点可以区分布鲁杆菌的种;通过Bruce04、Bruce07、Bruce09、Bruce 16、Bruce30共5个位点可以对菌株进行溯源,确定菌株流行病学相关性.结论 MLVA技术是一种分辨率高且易于在省级疾病防控系统监测实验室使用的标准化分型技术,可以加强布病监测能力.     

五种布鲁氏菌核酸检测试剂盒检测性能的评价北大核心CSCD

目的比较5种布鲁氏菌核酸实时荧光PCR检测试剂盒的一致性和检出能力,为临床实验室选择检测方法和布鲁氏菌的诊断提供参考依据。方法选用经病原学检测确定为布鲁氏菌阳性的血液样本38份,健康人的血液样本24份,潘氏变形杆菌、溶藻弧菌、河弧菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌DNA各1份,使用5种试剂盒(编号A-E)分别进行核酸检测,比较5种试剂盒临床样本检测的一致性;选择1份阳性样本核酸用无RNA酶水梯度稀释得到5个浓度(浓度1:4453.13 fg/μL,浓度2:1113.28 fg/μL,浓度3:278.32 fg/μL,浓度4:69.58 fg/μL,浓度5:17.40 fg/μL),每个浓度使用5种试剂盒(编号A-E)分别进行3次检测,比较5种试剂盒的阳性检出率及批内重复性。结果5种试剂盒检测67份DNA样品的符合率稍有不同,试剂盒ABDE的符合率均为100%,试剂盒C的符合率为98.51%。批内重复性显示5种试剂盒在浓度1、浓度2、浓度3水平重复检测DNA的Ct值变异系数均<5%;在浓度1与浓度4梯度区间,试剂盒的阳性检出能力比较显示试剂盒A、B、D较高,为11/12,试剂盒C和E较低,为8/12。结论5种试剂盒的真实性和可靠性较好,灵敏度和符合率稍有差别,特异度均为100%;重复性较好,检测性能良好。部分试剂盒对弱阳性样本的检出能力不强,该类样本可使用多种试剂盒复核,以保障结果的准确性。