复方银杏叶颗粒改善人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的作用及其机制研究

该实验于体外使用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)与复方银杏叶颗粒(80,160,320,640 mg·L-1)预孵育,合并使用H2O2(1 200μmol·L-1)建立氧化应激损伤模型。采用MTT法研究药物对HUVEC细胞增殖情况的影响,检测细胞培养上清中的LDH,MDA,NO含量及SOD活性,判断药物对内皮细胞的保护作用。通过Casepase-3活性检测以及Annexin V-FITC/PI流式细胞术,检测药物对细胞凋亡的保护作用。使用Western blot法测定凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。研究发现1 200μmol·L-1H2O2能够诱导内皮细胞产生氧化应激损伤,使细胞存活率降低,且细胞增殖抑制程度与H2O2的作用时间呈正相关。而80,160,320,640 mg·L-1的复方银杏叶颗粒能够明显减轻该模型下内皮细胞的氧化应激损伤,恢复细胞正常增殖水平,改善细胞状态,抑制细胞凋亡,同时能够上调Bcl-2的表达以及下调Bax的蛋白表达。该实验证明了复方银杏叶颗粒对H2O2诱导的内皮细胞氧化应激损伤及细胞凋亡具有一定的保护作用,其机制可能与复方银杏叶颗粒抑制了内皮细胞凋亡的线粒体途径有关。     

Protective effect of Tanreqing injection on axon myelin damage in the brain of mouse model for experimental autoimmune encephalomyelitis

ObjectiveTo evaluate the effect of Tanreqing injection on axon myelin in the mouse brain of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE).MethodsAn EAE model was established by myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG)_35-55 immunization in C57BL/6 mice. Mice were randomly divided into the following groups: normal, model, prednisone acetate (PA) (6 mg/kg), Tanreqing high dose (5.14 mL/kg), Tanreqing low dose (2.57 mL/kg). On the day of immunization, both Tanreqing groups were treated by intraperitoneal injection, with the PA group treated by intragastrical perfusion after T cell response, and the other groups treated with saline. Changes in body weight, neurological deficit score, incidence rate, mortality rate, and course of disease were observed for all mice. Brain tissue was isolated and stained with hematoxylin-eosin, and pathological investigations performed to evaluate axon myelin damage by transmission electron microscopy (TEM). Myelin basic protein and microtubule associated protein-2 were analyzed by immunohistochemistry.ResultsTanreqing injection significantly prolonged EAE latency and decreased the neurological deficit score, alleviated infiltration of inflammatory cells in the focus area, up-regulated hippocampal MBP expression at the acute stage and the remission stage, and increased microtubule associated protein-2 expression in the EAE brain to varying degrees in the acute stage. TEM analysis indicated that Tanreqing injection alleviates myelin damage in the EAE mouse and maintains the integrity of circular layer structures and alleviates axon mitochondrial swelling.ConclusionTanreqing injection alleviates EAE symptoms.     

黄连-牛黄药对源流考证与配伍探析

黄连与牛黄是临床常见的清热泻火中药,二者配伍具有协同增效的作用,是治疗火热病证的经典药对。自《华佗神方》一书首次记载黄连与牛黄药对以来,后世医家不断补充和完善,妇、儿内外各科均能找到应用痕迹,其中以治疗心肝经火热证最为精湛,涌现了安宫牛黄丸、牛黄清心丸、牛黄丸和黄连丸等经典名方。从药对配伍的历史源流、机制和特征分析这3个角度,系统考察了黄连与牛黄药对的创制年代、临床应用主治、配伍剂量比例、中药基原、炮制方法、方剂剂型,勾画出黄连与牛黄药对配伍应用的全景图,为拓宽该药对的临床范围、新药开发和有效物质基础研究提供参考。     

枳实化学成分与治疗功能性消化不良关联性分析及实验验证

目的 研究枳实治疗功能性消化不良（functional dyspepsia,FD）的药效物质基础。方法 运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术对10批枳实水煎液进行分析,确定共有成分;采用不规则喂养和夹尾刺激建立FD大鼠模型,以小肠碳末推进率、胃排空率及血清中胃动素、胃泌素水平为药效指标,采用灰色关联度分析法和Pearson双变量相关性分析建立色谱图中共有峰峰面积与药效指标的相关性,筛选出枳实治疗FD的药效物质,并通过斑马鱼肠蠕动模型进行药效验证。结果 10批枳实水煎液中共指认35个共有成分,通过灰色关联度和Pearson双变量相关性分析,筛选出辛弗林、马尔敏、黄柏酮、N-甲基酪胺、圣草次苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷共8个成分为枳实治疗FD的潜在药效物质。选择药效相关性较强、易得、可测的圣草次苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和辛弗林进行实验验证,发现这5个成分均显著促进斑马鱼肠道蠕动（P＜0.01）。结论 圣草次苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和辛弗林为枳实治疗FD的药效物质。     

固本通络汤对糖尿病肾病模型大鼠TGF-β1、MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的 观察固本通络汤对糖尿病肾病大鼠（diabetic nephropathy,DN）转化生长因子-β1 （transforming growth factor β1,TGF-β1）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制因子-1（tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1）表达的影响.方法 采用单侧肾切除加链脲佐菌素制备DN模型,分为正常对照组、模型对照组、氯沙坦组和固本通络汤大、中、小治疗组,免疫组织化学法检测大鼠肾脏TGF-β1、MMP-9、TIMP-1的表达.结果 大、中剂量的固本通络汤能明显降低TGF-β1、TIMP-1的表达（P〈0.05）,升高MMP-9的表达（P〈0.01）.结论 固本通络汤可能通过抑制DN大鼠肾组织TGF-β1的表达,调节MMP-9、TIMP-1的平衡,发挥对DN大鼠的肾脏保护作用.     

北京产黄花蒿中青蒿酸的含量测定与定向分离

目的：建立北京产黄花蒿中青蒿酸的含量测定及定向分离方法。方法：采用HPLC测定北京产黄花蒿中青蒿酸含量,以Agilent Extend-C₁₈ ODS（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱为固定相,以甲醇-0.05%醋酸水溶液（85：15）作为流动相,流速0.8 mL·min^-1,检测波长220 nm;采用乙醇冷浸提取、硅胶柱层析和重结晶等手段定向分离青蒿酸。结果：青蒿酸在0.11~2.76 μg 进样量与峰面积之间有良好的线性关系（r=0.999 6）,平均回收率98.39%,RSD 0.81%,北京产黄花蒿中青蒿酸的含量为0.36%~0.58%;建立了从北京产黄花蒿中定向分离纯度>98%的青蒿酸的方法。结论：建立的含量测定方法简便、快速、重复性好,可用于北京产青蒿中青蒿酸的含量测定;提取分离路线可用于北京产黄花蒿中青蒿酸的定向分离。     

国医大师薛伯寿运用升降散经验

名方升降散具有升清降浊、通利三焦、调畅气机之效.国医大师薛伯寿临证活用升降散,不仅用于四季热病、温疫,也用于内伤杂病.本文结合案例介绍薛老针对不同病机,运用升降散与其他方剂合方施治经验,其辨证准确,用药精良,疗效显著,值得临床借鉴.     

制何首乌的炮制方法探索

目的:考察黑豆汁炖制时间对制何首乌外观性状及各类有效成分含量变化规律的影响。方法:采用HPLC同时测定不同炮制时间制何首乌样品中二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷的含量,选择Agilent ZORBAX Extend-C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),甲醇(A)-水(B)为流动相梯度洗脱(0～30 min,5%～100%A; 30～40 min,100%A),流速1. 0 mL·min~(-1),柱温35℃,检测波长280 nm。结果:随炖制时间的增加,二苯乙烯苷含量逐渐降低,与8 h时相比,至64 h时含量降低76%;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-葡萄糖苷2种蒽醌苷含量先上升后下降,至24 h时达最高值,炖制40 h时降至与8 h近似的水平,之后略有波动;大黄素、大黄素甲醚2种蒽醌苷元含量先上升后下降,炖制32 h时达最大值,之后缓慢降低并趋于稳定。结论:炖制时间对制何首乌中各类成分含量的影响显著,且变化趋势不尽相同,应规范制何首乌饮片的炮制时间;同时,仅以二苯乙烯苷及蒽醌类成分作为制何首乌的指标性成分依据不够充分,应考虑增加多糖类等质量控制指标。     

基层医院“西学中”人才培养的实践与思考

西医学习中医(以下简称“西学中”)培训开展60余年来,为我国中西医结合事业作出了巨大贡献。以首都医科大学中医药学院开展基层医院“西学中”人才培养的实践为例,介绍了为基层医院举办“西学中”培训班的方案和实施效果,并提出了培训所面临的问题和解决对策。认为“西学中”是具有中国特色的继续教育模式,是培养中西医结合人才的重要方式之一。     

药用植物学线上实践教学的探索与思考

线上实践教学是应对疫情特殊时期，实现“停课不停学”的一个重要举措。通过介绍首都医科大学中医药学院依托雨课堂和腾讯会议的药用植物学线上实践教学模式，对疫情后实践教学改革进行思考，探讨如何发挥在线教学的优势来推动药用植物学教学方法的创新和中药资源实验室的建设。