Box-Behnken设计优化小儿消积止咳制剂提取纯化工艺

目的 优选小儿消积止咳制剂的提取纯化工艺。方法 以辛弗林转移率、柚皮苷转移率和干物质得率为综合评价指标,通过单因素试验及响应曲面法分别考察料液比、提取数、提取时间对小儿消积止咳制剂水提工艺的影响及浸膏相对密度、醇沉醇度、醇沉时间对小儿消积止咳制剂醇沉工艺的影响。结果 最佳提取纯化工艺为料液比1∶8,提取数3次,提取时间100 min,醇沉浸膏相对密度1.20,醇沉醇度60%,醇沉时间20 h。结论 采用Box-Behnken设计优选的小儿消积止咳制剂提取纯化工艺科学、合理、可行。     

一测多评法同时测定胡黄连提取物中多种化学成分

目的：建立HPLC一测多评法同时测定胡黄连提取物中的10个成分,验证该方法在胡黄连质量分析中应用的科学性及可行性。方法：采用Sepax HP-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.5%乙酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min ^-1,检测波长294 nm,柱温30℃。以胡黄连苷Ⅱ为内参物,建立该成分与云杉苷、草夹竹桃苷、胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅳ、黄金树苷、米内苷、6-阿魏酸梓醇、藏黄连苷B的相对校正因子,采用相对校正因子计算各成分的质量分数,同时用外标法进行测定。比较2种测定结果,评价一测多评法在胡黄连中应用的准确性及科学性。结果：10个成分在测定范围内线性良好,平均回收率在98.0%~102.0%,相对校正因子耐用性良好;采用外标法和一测多评法测定3批胡黄连提取物中10个成分含量,2种测定方法结果无明显差别。结论：以胡黄连苷Ⅱ为内标同时测定其多种成分的一测多评法可用于定量分析。     

荆防颗粒对脂多糖致小鼠急性肺损伤的预防和保护作用

目的：研究荆防颗粒对脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤(ALI)模型的预防和保护作用,并探讨其作用机制。方法：将雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、荆防颗粒低剂量组(1.25 g/kg)、荆防颗粒中剂量组(2.5 g/kg)、荆防颗粒高剂量组(5 g/kg),每组10只。各组分别给予同体积生理盐水和相应浓度荆防颗粒灌胃。给药6 d后,模型组和各给药组采用气管滴注LPS的方法建立ALI模型,对照组给予气管滴入相同体积生理盐水。分析各组肺组织宏观形态学变化;采用苏木精-伊红(HE)染色法观察肺组织病理变化并进行病理学评分;检测肺组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)等炎症指标的变化;进一步检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)等氧化应激指标的变化。结果：与对照组比较,模型组小鼠肺组织中MCP-1、TNF-α、IL-1β、IL-6、MPO、iNOS和MDA的含量显著升高(P<0.01),SOD和GS...     

SD大鼠和Beagle犬口服或注射环黄芪醇的药代动力学研究

建立了UPLC-MS/MS法检测SD大鼠和Beagle犬血浆中环黄芪醇(1)的含量，以20(S)-原人参二醇为内标，采用甲醇沉淀蛋白。并设计了SD大鼠和Beagle犬口服或注射1的体内试验以考察1的药代动力学行为。将24只SD大鼠随机分成4组，分别灌胃1、3、10 mg/kg剂量的1混悬液，或静脉注射1 mg/kg的1注射液。结果显示，SD大鼠口服1、3、10 mg/kg的1混悬液在0.5 h左右达峰，半衰期在0.83～0.93 h,AUC_0→t分别为190、602、1 818 μg·L^-1·h，血浆暴露量与给药剂量呈线性比例增加，口服生物利用度为29.4%。将12只Beagle犬随机分成2组，分别灌胃30 mg/kg剂量的1混悬液，或静脉注射1 mg/kg的1注射液。结果显示，Beagle犬口服30 mg/kg的1混悬液在0.75 h达峰，半衰期为1.26 h，消除速度稍慢于SD大鼠，AUC_0→t为110 μg·L^-1·h，口服生物利用度为0.5%。本研究首次对比了1混悬液在SD大鼠和Beagle...     

荆防颗粒浸膏对巨噬细胞活化的增强作用及机制研究

为探究荆防颗粒浸膏对巨噬细胞活化的增强作用及机制，该研究在RAW264.7细胞培养体系中加入荆防颗粒浸膏，然后再加入不同刺激剂处理细胞，提取RNA后使用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定多种细胞因子mRNA的转录，使用酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞上清液中细胞因子分泌量，另外提取细胞内蛋白使用免疫印迹法测定信号通路活化状态。研究发现荆防颗粒浸膏单独处理细胞不增加或轻度增加RAW264.7细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β、MIP-1α、MCP-1、CCL5、IP-10和IFN-β的mRNA转录，但是呈剂量依赖性显著增强R848和CpG诱导RAW264.7细胞中这些细胞因子的mRNA转录；同时荆防颗粒浸膏能够显著增强R848和CpG诱导RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-6、MCP-1和IFN-β。机制研究显示荆防颗粒浸膏对CpG诱导RAW264.7细胞中p38、ERK1/2、IRF3、STAT1和STAT3磷酸化具有显著增强作用。结果表明，荆防颗粒浸膏对R848和CpG诱导巨噬细胞活化具有选择性增强作用，其机制可能与增强MAPKs、IRF3和STAT1/3信号...     

基于肠道菌群与肠道代谢探究脉络舒通丸对大鼠股骨骨折引起的后肢肿胀的治疗作用及机制

探讨脉络舒通丸对大鼠股骨骨折引起的后肢肿胀的保护作用及其潜在机制。将大鼠随机分为假手术组、模型组、脉络舒通丸(MLST)低剂量组(1.8 g·kg^-1·d^-1)、MLST高剂量组(3.6 g·kg^-1·d^-1)和阳性药组(迈之灵片60 mg·kg^-1·d^-1)。假手术组暴露股骨后缝合伤口，其余4组均进行机械性损伤造成股骨骨折，于造模前7 d及造模后5 d对各给药组给予灌胃给药，假手术组、模型组给予等剂量蒸馏水灌胃。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色检测大鼠后肢肌肉组织的病理损伤，并测量其后肢肿胀度。酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)试剂盒检测各组大鼠血清中白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的水平...     

开心散抗抑郁作用的靶点群发现及分子机制研究

基于靶点“钩钓”策略鉴定开心散在脑组织中的抗抑郁靶点群，探索靶点群相关药理学信号通路，诠释开心散抗抑郁的分子机制。通过慢性不可预见性温和应激(CUMS)方式建立Balb/c小鼠抑郁模型，以糖水偏好及强迫游泳行为学实验评价开心散抗抑郁作用；进而利用光交联反应将开心散药效组分键合到磁性微球表面，形成开心散成分芯片，从抑郁小鼠脑皮层、丘脑、海马组织中捕获直接作用靶点蛋白，并通过液相色谱高分辨质谱联用(LC-MS/MS)进行鉴定；利用Cytoscape软件进行靶点蛋白通路富集分析，同时通过免疫组化和蛋白免疫印记等方法对可能的靶点生物学功能进行验证。研究发现，开心散对抑郁小鼠的行为学指标有明显改善作用；靶点鉴定实验发现开心散药效组分在皮层、丘脑和海马组织中的潜在作用靶点分别有64、91和44个，靶点功能主要与加压素调控的水重吸收、沙门菌感染、甲状腺激素合成等信号通路相关。免疫组化和免疫印记等分析表明，开心散上调了抑郁小鼠脑皮层中加压素(AVP)的表达，上调了小鼠丘脑中热休克蛋白60(HSP60)、细胞色素C氧化酶4(COX4)、促甲状腺激素释放激素(TRH)的表达，并下调了丘脑中的肿瘤坏死因子α...     

UPLC-Q-TOF-MS/MS法分析鼻渊通窍颗粒化学成分

目的 建立UPLC-Q-TOF-MS/MS法分析鼻渊通窍颗粒化学成分。方法 该药物甲醇提取物的分析采用Agilent poroshell 120 SB-C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 2.7μm);流动相0.1%甲酸-甲醇，梯度洗脱；体积流量0.4 mL/min;柱温30℃;电喷雾(ESI)离子源；正负离子模式。通过保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片，对所得成分的主要色谱峰进行鉴定。结果 共鉴定出103种化学成分，包括29种黄酮类、19种萜类、12种木脂素类、11种香豆素类、9种醌类。结论 该方法能全面地表征鼻渊通窍颗粒中的化学成分并进行结构多层级研究，初步阐明该颗粒剂的化学成分轮廓，可为该复方的成分研究提供坚实的基础。     

荆防颗粒对氧嗪酸钾诱导小鼠高尿酸肾病的防治作用机制探讨

目的 探讨荆防颗粒对氧嗪酸钾诱导小鼠糖尿病肾病的防治作用机制。方法 采用靶点“钩钓”方法制备荆防颗粒有效成分键合的磁性微球，将携带荆防颗粒有效成分的磁性微球与小鼠的正常肾组织裂解液共同孵育，捕获荆防颗粒潜在结合靶点蛋白；再采用高分辨质谱筛选荆防颗粒有效成分特异性结合的靶点蛋白。采用京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析靶点蛋白富集的信号通路。将36只ICR雄性小鼠按体重随机分为荆防颗粒低剂量组、荆防颗粒中剂量组、荆防颗粒高剂量组、模型组、别嘌呤醇（AL）组、对照组，每组6只。除腹腔注射250 mg/kg氧嗪酸钾溶液外，荆防颗粒低、中、高剂量组分别灌胃荆防颗粒0.5、1、2 g/kg；模型组灌胃相应体积纯化水；AL组灌胃25 mg/（kg·d） AL溶液；对照组灌胃相应体积纯化水；均1次/d，连续用药4周。末次给药后1 h，测定血清尿酸（UA）、尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）,HE染色观察肾组织病理变化，Western blotting法检测靶点蛋白相关信号通路的主要指标（氧化应激指标MDA、SOD、GSH、Nrf2、HO-1、NQO1，黏膜屏障功能蛋白Occludin、ZO-1）。结...     

基于BDNF/TrkB/CREB通路探讨参苓开心颗粒的抗抑郁作用机制

研究参苓开心颗粒(Shenling Kaixin Granules)对慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)模型大鼠的抗抑郁作用机制。将90只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、舒肝解郁胶囊(110 mg·kg^-1)组及参苓开心颗粒低(90 mg·kg^-1)、中(180 mg·kg^-1)、高(360 mg·kg^-1)剂量组，通过CUMS法复制抑郁大鼠模型，实验结束后通过糖水偏好、旷场、高架十字迷宫及强迫游泳等实验评估大鼠行为学变化；ELISA检测血清白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)含量，检测海马CA1区超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD...