组织缺陷修复中的基因转移策略

为了使先天形成的（出生缺陷）或后天发生的缺失的器官获得新生，基因治疗和组织工程的联合应用受到了再生医学很多人的关注。利用治疗性基因转移技术和其他的再生生物工程策略，能提高生物材料再生器官的可能性。此技术可能应用在多方面，并且已经研究的再生器官包括皮肤、软骨、骨骼、神经、肝、腺以及血管。     

前列腺癌组织学变异型的临床病理学

前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤之一,尤其在血清前列腺特异性抗原(PSA)检测普及及改进后,其发病率逐年升高,虽然组织形态学上以腺泡细胞型、微腺泡型和一般的腺癌最常见,但前列腺癌组织结构和细胞学特点极富多样性,可见多种组织学变异型,这些变异型的识别可以帮助病理医师更全面掌握前列腺癌,避免误诊和漏诊[1].     

视网膜祖细胞干细胞特性及移植入视网膜后的研究

目的：研究视网膜祖细胞的干细胞特性及移植入视网膜后的存活和迁移。方法：体外培养胎龄18d 大鼠的视网膜细胞,用 RT-PCR、细胞免疫荧光方法鉴定其增殖分化；成年 SD 大鼠腹腔注射 N-甲基-N-亚硝基脲形成视网膜感光细胞退化的动物模型,培养的视网膜祖细胞用 CM-Di(?) 标记后,移植入模型鼠的玻璃体腔。结果：视网膜祖细胞体外表达中间神经丝蛋白 nestin；表达 Flk-1、Pax6及 Notchl 的 mRNA；能掺入 BrdU；分化后表达视网膜各类细胞特异性蛋白；移植后在实验组大鼠视网膜能存活及迁移,而在对照组中仅聚集在玻璃体腔。结论：视网膜祖细胞具有干细胞特性,移植入受损伤视网膜后,能存活、整合及迁移。     

Tourmaline纤维抑制高黏血症家兔血小板聚集的实验研究

目的 研究Tourmaline纤维对高黏血症家兔血小板聚集的影响。方法 用静脉注射高分子右旋糖酐(MW>140000)的方法复制高黏血症家兔模型,测定应用Tourmaline纤维(实验组,n=6)及对照纤维(对照组,n=6)前后血小板聚集率(1分钟聚集率A1和最大聚集率Amax)的变化。并分析TXA_2水平的变化与血小板Amax间的相关关系。结果 与对照组比,实验组高黏血症家兔在应用Tourmaline纤维后6、12h血小板A1和Amax明显降低,与应用前比,差异有显著意义(P<0.05),12h时TXA_2降低与A-max间呈显著负相关(r=-0.94),24h无显著差异(与对照组比)。结论 使用Tourmaline纤维6h和12h后,高黏血症家兔的血小板聚集明显被抑制,此作用与血浆TXA_2的降低相关。     

高糖对THP-1细胞及平滑肌细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4表达的影响

目的：探讨高糖对单核/巨噬细胞系THP-1细胞及人主动脉平滑肌细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(TRAIL-R4)表达的影响。方法：用PMA孵育THP-1细胞，诱导其分化成为巨噬细胞。流式细胞仪检测成功诱导的巨噬细胞粘附分子CD11b及CD11c。采用不同糖浓度干预THP-1细胞，用Western blotting技术检测TRAIL-R4的表达。用25 mmol/L 高糖培养液在不同时点孵育人主动脉平滑肌细胞，观察TRAIL-R4蛋白表达的变化。用PKC激动剂干预THP-1细胞后，用Western blotting技术检测TRAIL-R4的表达。结果：佛波酯(PMA)孵育THP-1细胞48 h可诱导其分化成为巨噬细胞。20 mmol/L 高糖明显上调人THP-1细胞TRAIL-R4的表达。高糖对人主动脉平滑肌细胞TRAIL-R4表达上调的影响随着刺激时间的增加而增加。PKC激活后THP-1细胞TRAIL-R4的表达明显上调。结论：高糖上调TRAIL-R4蛋白表达，TRAIL-R4通过抑制巨噬细胞及平滑肌细胞的凋亡促进动脉粥样硬化。     

人早孕蜕膜基质细胞及免疫活性细胞趋化因子受体CXCR6的表达

目的分析人早孕期蜕膜基质细胞趋化因子配基受体对CXCL16/CXCR6的表达及免疫活性细胞趋化因子受体CXCR6的表达,以探讨CXCL16/CXCR6在蜕膜免疫活性细胞募集中的可能规律.方法收集早孕期蜕膜组织,分离蜕膜基质细胞和免疫细胞,分别采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学、流式细胞术分析蜕膜基质细胞CXCL16和CXCR6的表达;流式细胞术分析蜕膜CD56^＋CD16^-NK细胞、CD56^＋CD16^＋NK细胞、NKT细胞、T细胞、γδT细胞、单核细胞CXCR6的表达.结果人早孕蜕膜基质细胞高水平转录趋化因子受体CXCR6,低水平转录其配体CXCL16,但CXCL16和CXCR6在蛋白水平的表达偏低.早孕蜕膜γδT细胞CXCR6阳性率为87.29%;CD14^＋单核细胞CXCR6阳性率为47.71%;NKT细胞CXCR6阳性率为44.14%;T细胞CXCR6表达率为32.91%;而蜕膜两种NK细胞（CD56^＋CD16^-、CD56^＋CD16^＋）几乎不表达CXCR6.结论人γδT细胞、单核细胞、NKT细胞、T细胞可能通过表达趋化因子受体CXCR6被募集到蜕膜局部并驻留,从而参与早孕期母胎界面的免疫调节.     

转基因内皮细胞的构建及其在复合血管上种植的初步研究

目的:为了解决小口径(直径7mm以下)人造血管术后通畅率低下的问题,利用生物-人工复合血管,结合分子生物学手段,将转入血管内皮生长因子(VEGF165)基因的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)种植于复合血管内腔面,为解决此临床难题提供新的思路和手段。材料方法:构建VEGF165真核表达质粒pCI-neo-VEGF165,获得正确的质粒用于转染HUVEC。从中科院购买HUVEC(代号:ECV-304),用脂质体介导法将pCI-neo-VEGF165转入细胞,经G418筛选后,计数阳性克隆,以比较脂质体和质粒在不同比例情况下转染效率的高低。实验组按质粒和脂质体比例的不同分为4组:1μg/3μl;2μg/6μl;2μg/8μl;3μg/12μl。ELISA检测瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达。再将VEGF165基因瞬时转入HUVEC,利用自己设计的旋转培养装置,将细胞均匀地粘附、种植于复合血管内腔面。复合血管是人工材料(聚酯)和生物材料(成纤维细胞长入,胶原形成)有机结合而成,是将包有聚酯网的硅胶棒埋入绵羊背部皮下组织,3个月后取出,抽去硅胶棒而得到的。结果:脂质体转染效率以2μg/8μl组阳性克隆数最多;ELISA测定瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达量为532·5±43·1pg/ml。使用旋转培养装置的细胞均匀地粘附于复合血管,未使用者细胞积聚于血管腔面下部;转入和未转入VEGF165基因的HUVEC在复合血管内腔面覆盖面积百分比分别为69·9%±3·5%、43·7%±2·5%,有明显改善。结论:转入VEGF后可促进HUVEC在复合血管上生长,旋转培养装置有利于细胞的均匀粘附。     

猴脑杏仁体的认知功能

认知是脑的高级功能，其产生机制是脑科学的研究前沿之一。脑的认知功能涉及大脑皮质和皮质下的广泛脑区，不同部位涉及不同的认知类型。杏仁体（amygdala）是参与情绪性学习认知的重要结构。作者工作过的日本富山医科药科大学（现为富山大学医学部）研究生院系统情绪科学研究室长期从事杏仁体的认知功能研究，成绩卓著。本文综述了该研究室对猴脑杏仁体社会认知功能以及相关的最新研究成果，以飨读者。     

表达前列腺特异性膜抗原的DNA疫苗对肿瘤细胞的抑制作用

目的构建表达前列腺特异性膜抗原（PSMA）的DNA疫苗，观察其在体外对肿瘤细胞的免疫攻击和在体内对肿瘤细胞攻击的免疫保护作用。方法通过稳定转染构建表达PSMA的小鼠黑色素瘤细胞系B16-PSMA，将DNA疫苗pCDNA3．1-PSMA通过肌肉注射导入C57BL／6小鼠体内，分离小鼠脾细胞，检测细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes，CTL）反应。以B16-PSMA细胞攻击免骺小鼠，观察免疫动物的无瘤生存期和肿瘤体积增长情况，评价DNA疫苗的抗肿瘤作用。结果DNA疫苗可诱导小鼠脾淋巴细胞CTL活性，经过免疫后的小鼠成瘤率降低，无瘤生存期延长，肿瘤生长缓慢，肿瘤组织内有较多淋巴细胞浸润，表明产生较强的抗肿瘤反应。结论表达PSMA的DNA疫苗能够诱导小鼠产生特异性免疫反应，对表达PSMA的肿瘤细胞的攻击产生免疫保护作用，为前列腺癌的预防和免疫治疗提供了新的思路。     

正常人肩关节囊内CGRP和SP免疫阳性神经纤维的分布

目的探讨粘连性肩关节囊炎(冻结肩)的发病机制。方法用免疫组织化学方法观察人肩关节囊内CGRP和SP免疫阳性神经纤维存在的情况。结果人肩关节囊的纤维层内有CGRP和SP免疫反应阳性神经纤维存在,免疫反应阳性神经纤维数量较多,独立直行或网状交织。结论CGRP和SP免疫阳性神经纤维可能参与了人肩关节囊的伤害性感觉信息的传递。当人肩关节囊发生炎症时,CGRP和SP免疫阳性神经纤维受到刺激,可能是引起粘连性肩关节囊炎时肩痛的原因之一。