预适应锻炼对急进高原新兵脑功能的保护作用

目的探讨预适应锻炼对新兵急进高原后脑功能的改善作用。方法120名新兵随机分为4组:对照组、面罩组、运动组和面罩复合运动组。在进入高原前,面罩复合运动组佩带低氧呼吸器小步快走10 min,休息5 min后重复进行,上、下午各进行4次,连续进行7 d;面罩组、运动组分别只佩带低氧呼吸器或单纯运动。在空运进入高原后,比较进高原前、后的神经行为核心测试组合系统指标的改变,并对急性高原反应症状进行分析。结果使用低氧呼吸器复合小步快走5 min时动脉血氧饱和度可降到(80.5±5.7)%,达到预缺氧的目的。新兵进入3 658 m高原后,对照组、面罩组和运动组的数字跨度、目标追踪测试分值明显下降(P<0.05),而面罩复合运动组无明显改变(P>0.05);各组进藏前、后的简单反应时、数字译码和视觉保留均无显著性改变(P>0.05),手敏捷度则显著提高(P<0.05)。对照组、面罩组、运动组和面罩复合运动组的急性高原反应发病率分别为13.3%、20.0%、20.0%、3.3%。结论进入高原前,应用低氧呼吸器辅以适当运动,能改善急进高原人群的即时听觉记忆能力和手部运动的速度及准确性,避免部分脑功能的损害,并使急性高原反应发病率呈降低趋势。     

吗啡导致猕猴海马神经元自发放电节律转变

目的 分析吗啡对猕猴海马神经元自发放电节律的影响。方法 分析注射吗啡后猕猴海马神经元自发放电节律变化情况，并用数学方法加以验证。结果 在吗啡作用下海马神经元自发放电节律会发生转变，纳络酮可以逆转这种转变，共观察到种转变形式。为了研究这种转变的动力学机制，用数学模型模拟吗啡对神经元自发放电节律的影响，得到了与在体实验一致的结果。结论 在吗啡作用下海马神经自发放电节律发生转变。利用数学模型研究发现节律转变的原因是吗啡改变了膜上钠，钾，超极化电流等离子通道的功能所致，节律转变的过程存在着混沌规律。     

低氧对大鼠附睾功能的影响

目的研究低氧对大鼠附睾功能的影响。方法将成年雄性Wistar大鼠随机分为常氧和低氧5d、15d、30d4组。低氧各组置低压舱内模拟5,000m高原低氧。测定附睾尾精子数量、质量,生化法测定各组大鼠附睾液中果糖、肉毒碱的含量及α-葡萄糖苷酶的活性。结果低氧15d组、30d组大鼠附睾尾精子数显著低于常氧组。低氧各组精子活力、活率显著低于常氧组;尾部畸形精子数显著高于常氧组。低氧5d组、15d组大鼠附睾液果糖含量显著高于常氧组(P<0.01)。低氧5d、30d组,大鼠附睾液中性α-葡萄糖苷酶活性显著低于常氧组。结论低氧可抑制附睾尾精子数量和质量,并抑制附睾液中性α-葡萄糖苷酶活性,提示低氧可干扰附睾功能,并抑制精子的成熟。     

VEGF参与CoCl2预处理对神经细胞缺氧损伤的保护作用

目的：探讨CoCl2对体外培养分化SH-SY5Y细胞的缺氧损伤保护作用及缺氧诱导基因产物VEGF在其中的作用。方法：分化的SH-SY5Y细胞随机分为对照组、化学缺氧预处理组（预处理组,细胞先用50μM CoCl2预处理3 h,换液后常氧培养1 h,然后在2%的低氧孵箱内缺氧28 h）、缺氧组（无CoCl2预处理过程,其余同预处理组）。用Western Blotting法测细胞VEGF的蛋白表达,RT-PCR测VEGF的mRNA表达,通过乳酸脱氢酶释放率和MTT细胞活力测定判断细胞损伤程度。然后,进一步通过添加VEGF单克隆抗体、重组人VEGF,验证VEGF在化学缺氧预处理组中的保护作用。结果：化学缺氧预处理组细胞VEGF蛋白、VEGF mRNA表达都显著高于缺氧组（P〈0.01）,预处理组细胞较缺氧组细胞存活率高,乳酸脱氢酶释放率减少（P〈0.01）。MTT细胞活力测定显示,40μg/ml VEGF单克隆抗体可抑制预处理的保护作用,而100 ng/ml重组人VEGF可模拟预处理组的保护作用。结论：CoCl2化学预缺氧可保护神经型细胞对缺氧产生耐受,VEGF可能在其中发挥重要的保护作用。     

适用于低等哺乳动物的视听分辨行为自动训练系统

分辨学习是神经科学研究中的一类重要行为模型,包括视觉、听觉、空间分辨等[1].目前已有的分辨行为多数是用灵长类训练的,很难用于低等哺乳动物(如大鼠、小鼠、兔等).为此我们研制了一种适用于低等动物的视听分辨行为自动训练系统.     

严重烧伤早期心功能抑制的体液机制Ⅱ烧伤血浆毒性物质对离体豚鼠乳头肌电活动的影响

作者观察了严重早期烧伤及假伤（正常）血浆提取物（分别以ＢＰＴ及ＮＰＥ表示）对离体灌流正常豚鼠乳头肌细胞电活动的影响。结果发现:高、中、低３种浓度的ＢＰＴ，①均可使静息电位减小，其时程曲线略呈“Ｓ”形，其潜伏期有明显的浓度依赖性；②均可引起乳头肌节律不整的自发兴奋；③高浓度ＢＰＴ明显使动作电位幅度（ＡＰＡ）降低，中、低浓度的ＢＰＴ对ＡＰＡ及最大除极速度均无明显影响；④ＢＰＴ对复极化时程ＡＰＤ１０的影响不大，但使ＡＰＤ５０及ＡＰＤ９０显著延长，使动作电位波形在复极化初期出现明显的凹陷和平台期延长；⑤高浓度ＮＰＥ有相当于低浓度ＢＰＴ的生物效应。提示ＢＰＴ可能直接影响心肌细胞Ｋ＋、Ｃａ２＋的转运，对Ｎａ＋的离子转运影响较小     

低压缺氧延迟预适应对小鼠海马神经元的保护作用研究

目的：了解低压缺氧预处理是否能够诱导小鼠海马神经元产生延迟预适应，增强神经元耐缺氧能力。 方法： 将近交系Babl/c小鼠放入减压舱，模拟海拔7 000 m高度减压2.5 h/d，连续3 d。第3次减压毕36 h后，观察严重低压缺氧(12 000 m 4 h)、严重缺血(双侧颈总动脉阻塞18 min)、缺血合并低压缺氧 (结扎右侧颈总动脉后，低压缺氧8 000 m 4 h)对低压缺氧预处理及正常对照小鼠海马神经元的损伤情况。 结果： 7 000 m 2.5 h低压缺氧预处理对小鼠海马神经元无显著损伤，能够诱导其产生延迟预适应，显著增强海马神经元耐受严重低压缺氧、严重缺血、缺血合并低压缺氧损伤的能力。 结论: 本研究所采用的低压缺氧预处理方法能够诱导海马神经元产生延迟预适应，增强其抗缺血缺氧能力。     

小鼠pdx-1基因真核表达载体的构建及其在胚胎干细胞中的表达

目的： 克隆小鼠pdx-1基因，构建其真核表达载体，并在小鼠胚胎干细胞中表达，为糖尿病的细胞移植治疗奠定基础。方法： PCR扩增小鼠胰腺pdx-1基因 cDNA，酶切后和携带绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-N1重组，将pdx-1基因 cDNA片段连接到pEGFP-N1载体的多克隆位点，形成重组载体pEGFP/pdx-1，转化大肠杆菌DH5α菌株，构建成pdx-1基因真核表达载体质粒。扩增DH5α后抽提质粒DNA，Hind Ⅲ 和BamHⅠ酶切，电泳，DNA测序鉴定。鉴定正确的质粒DNA用脂质体包裹后转染小鼠胚胎干细胞MESPU13。结果： 从小鼠胰腺cDNA扩增出876 bp的DNA片段并成功重组到pEGFP-N1载体中。经酶切和DNA测序验证，插入载体的DNA片段为pdx-1基因，插入方向正确。重组质粒经脂质体转染胚胎干细胞MESPU13，24 h 后观察到绿色荧光蛋白报告基因和目的基因的pdx-1表达。结论： 小鼠pdx-1基因的克隆和真核表达载体构建获得成功，为进一步研究其功能奠定了基础。     

不同浓度缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞缺氧耐受性的影响

目的： 探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液(HP extract)对PC12细胞缺氧耐受性的影响。方法: 复制小鼠急性重复缺氧模型，制备HP extract。在培养PC12细胞中加入HP extract使其终浓度分别为0.2、0.8、3.2、6.4、12.8 g/L(HP组)。以同浓度正常小鼠脑匀浆提取液(N extract)作为对照组(N组)。缺氧(2%O2) 培养24、48、72 h后, 采用四唑盐（MTT）比色法检测各组细胞活力 (A570值)并检测缺氧24、48、72 h乳酸脱氢酶（LDH）透出率、缺氧24 h早期凋亡率(Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测)、缺氧72 h晚期凋亡率(Hoechst33258染色荧光显微镜检测)。结果: HP extract浓度低于6.4 g/L(包括6.4 g/L), 缺氧培养24 h时, HP组A570值显著高于同浓度N组, 其 LDH透出率显著低于同浓度N组。随缺氧时间延长, 高浓度HP extract逐渐失去细胞保护作用。至72 h时浓度高于6.4 g/L(包括6.4 g/L)HP extract有促细胞凋亡作用, 此时HP组A570值显著低于同浓度N组, 其LDH透出率和晚期凋亡率均显著高于同浓度N组。结论: 缺氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞缺氧耐受性的影响呈浓度依赖性和时间依赖性。     

小鼠胚胎干细胞体外分化为神经前体细胞的研究

目的 探索小鼠胚胎干细胞（Embryonic stem cell,ES cell）体外分化为神经前体细胞（Neural precursor cells,NPC）的无血清培养条件,比较人胚胎成纤维细胞（Human embryonic fibroblasts,HEF）与小鼠胚胎成纤维细胞（Mouse embryonic fibroblasts,MEF）对小鼠ES细胞生长的作用。方法 在MEF或HEF饲养层上培养ES细胞,培养液中含白血病抑制因子。采用无血清方法培养NPC,免疫组化方法检测巢蛋白（Nestin）,用硝基四氮啖蓝/5-溴-4-氯-吲哚基磷酸（NBT/BCIP）显色检测碱性磷酸酶。结果 无血清培养可以获得86%的NPC。HEF与MEF-样能维持ES未分化状态。结论 无血清培养方法有利于ES细胞向NPC分化,HEF可用于小鼠ES细胞的培养,而且比MEF优越。