重组RA538,反义c—myc腺病毒对bcl—2高表达细胞系的作用及分子 …

目的 研究重组ＲＡ５３８（Ａｄ－ＲＡ５３８）、反义ｃ－ｍｙｃ腺病毒（Ａｄ－ＡＳｃ－ｍｙｃ）在ｂｃｌ－２高表达细胞系中的作用及其分析机制。方法 采用细胞形态学观察、ＭＴＴ、ＲＴ－ＰＣＲ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ等方法,研究ＲＡ５３８,反义ｃ０ｍｙｃ重组腺病毒在ｂｃｌ－２高表达的人宫颈癌细胞系ＨｅＬａ－ｂｃｌ２和ＳｉＨａ－ｂｃｌ２以及在其亲本细胞中的生物学作用及其分子机制。结果 以ｌｉｐｏｆｅｃｔｉ     

Auer小体对初诊非M3型急性髓细胞白血病患者预后的影响

目的 探究Auer小体对初诊非M3型急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)预后的影响.方法 采用回顾性队列研究设计,纳入本中心2012年1月至2019年12月收治的154例初诊非M3型AML患者病历资料,根据骨髓原始细胞有无Auer小体分为Auer小体阳性组和Auer小体阴性组,随访数据...     

Notch1活化型突变诱导T-ALL发病的研究进展

急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是我国儿童和青少年常见的恶性疾病之一,其进展迅速,病死率高。1991年,首次在伴有t(7;9)转位的T-ALL中发现Notch1的一类活化型突变,在此后至今的近20年里,对活化型Notch1突变与T-ALL发病之间关系的理解进一步深入。本文就活化型Notch1突变影响正常信号转导过程和基因表达、继而诱导T-ALL发病的机制研究进展作一综述。     

腺病毒介导反义c-myc RNA对人胃癌细胞系作用的分子机制研究

序列特异的ＤＮＡ结合蛋白ｃｍｙｃ在细胞的增殖与分化过程中起着十分重要的调节作用,并能诱导细胞凋亡。反义ｃｍｙｃＲＮＡ,采用ｃｍｙｃ基因含有起始密码子的第二外显子及其两侧部分内含子序列,共1.53ｋｂ片段构建而成,具有抑制ｃｍｙｃ表达的作用[1]。本研究以腺病毒介导,胃癌细胞系作为靶细胞,研究反义ｃｍｙｃ的抑癌作用及其机制。材料与方法一、细胞系ＳＧＣ7901细胞为人胃腺癌细胞系。293细胞为腺病毒Ｅ1基因转化的人胚肾细胞系。二、重组体腺病毒的制备反义ｃｍｙｃ及ＬａｃＺ重组体腺病毒(ＡｄｅｎｏｖｉｒｕｓＡｎｔｉｓｅｎｓｅ…     

幽门螺杆菌感染及其根除后胃液磷脂酶A2含量变化

幽门螺杆菌感染及其根除后胃液磷脂酶Ａ２含量变化ＣｈａｎｇｅｓｏｆｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２ａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｊｕｉｃｅｗｉｔｈｈｅｌｉ┐ｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉｉｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄａｆｔｅｒｅｒａｄｉｃａｔｉｎ...     

开展定期病例讨论是临床医生继续教育的有效途径

结合英国临床医生开展临床相关学科定期病例讨论,实现继续教育目的的见闻,分析了我国教学医院开展临床继续教育的弊端,认为在临床相关专业医生间开展定期病例讨论,是提高临床医生素质、改善知识结构、扩大知识面的有效途径和可取方法。     

重组RA538腺病毒对人胃癌细胞的体内及体外分子治疗研究

目的：研究重组ＲＡ５４３８腺病毒对胃癌细胞的体内外生物学作用。方法：ＥａｃＺ基因Ｘ－ｇａｌ染色、ＭＴＴ、克隆形成试验、ＤＮＡ梯度降解试验、原位末端标记、流式仪、裸鼠致瘤性、裸鼠皮下移植溜模型实验等方法,对ＲＡ５３８重组腺病毒在人胃癌ＳＧＣ７９０１细胞的作用进行体内外研究。结果：Ａｄ－ＲＡ５３８对ＳＧＣ７９０１细胞产生明显的生长抑制作用,ＭＴＴ显示生长抑制率为７６．３％。ＤＮＡ梯度降解试验,原位末端     

胆固醇转运相关基因NPC1、NPC2调节造血前体细胞的增殖和分化

目的 采用NPC1、NPC2基因敲低的造血前体细胞(erythroid myeloid lymphoid,EML)作为模型,探讨NPC1、NPC2对EML细胞增殖、分化的影响.方法 通过NPC1 shRNA、NPC2 shRNA重组慢病毒感染EML细胞获得NPC1、NPC2基因有效沉默的EML细胞模型.利用该模型以Filipin染色检测NPC1、NPC2基因敲低后对EML细胞内胆固醇分布的影响,采用CCK-8和台盼蓝染色检测细胞增殖,采用流式细胞仪检测NPC1、NPC2基因沉默后EML细胞干性标志物CD34、sca-1、c-kit及TER-119、CD11b、B220的变化,采用Western blot检测造血干细胞因子(stem cell factor,SCF)刺激细胞后c-kit磷酸化的改变.结果 成功构建NPC1、NPC2基因沉默的EML细胞模型,NPC1、NPC2基因在mRNA和蛋白表达均显著降低(P＜0.01).NPC1、NPC2敲低的EML细胞中出现胆固醇蓄积,且在NPC1敲低的EML细胞模型中胆固醇蓄积更显著.沉默NPC1、NPC2基因后使得EML细胞增殖减慢(P＜0.01),并且能够降低EML细胞CD34、sca-1和TER-119、B220的阳性率(P＜0.01).经SCF刺激后NPC1基因沉默的EML细胞中c-kit的磷酸化降低显著(P＜0.01),但在NPC2基因沉默的EML细胞中c-kit磷酸化的改变差异无统计学意义.结论 胆固醇转运相关基因NPC1通过调节细胞胆固醇流动参与了EML细胞的增殖和分化调控.     

CTLA4Ig基因修饰的BMSCs支持CD34+细胞扩增的实验研究

目的：通过腺病毒介导CTLA4Ig在骨髓基质细胞（BMSCs)中的表达，探讨CTLA4Ig基因修饰的BMSCs支持CD34^ 细胞扩增的功能变化，为该基因修饰的BMSCs联合造血干细胞移植（HSCT），达到预防移植物抗宿主病（GVHD）和纠正预处理损伤的造血微环境（HIM）积累实验依据。方法：以CTLA4Ig-重组腺病毒按感染复数（Multiplicity of infection,MOI)50转染BMSCs，以RT－PCR检测目的基因转录；免疫磁珠（MACS）阳性选择分选骨髓CD34^ 细胞，流式细胞仪检测其纯度；通过骨髓基质细胞支持CD34^ 扩增的细胞总数及集落形成细胞数（CFC）的变化，比较转染和未转染BMSCs在支持CD34^ 细胞扩增方面的差异。结果：RT－PCR在转染组及转染后传两代BMSCs中检测到CTLA4Ig基因的转录；通过观察扩增后细胞总数及CFC数的变化，发现CTLA4Ig基因转染组与未转染组BMSCs支持CD34^ 细胞扩增的能力也无显著差异（P＞0．05）。结论：CTLA4Ig－重组腺病毒有效介导目的基因对BMSCs的转染，在MOI为50时对其支持造血的功能无显著影响。